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原生动物生物多样性观察

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第27卷第3期 2010年6月 晋中学院学报 V01.27 No.3 Journal of Jinzhong University Jun.2010 原生动物生物多样性观察 江春,张谨华 (晋中学院生物科学与技术学院,山西晋中030600) 摘要:传统的普通动物学原生动物的经典实验苹履虫(Paramecium sp.)实验目的单 一.本文提供了一种培养草履虫,还可同时进行原生动物生物多样性观察的简便方法. 关键词:原生动物;生物多样性;实验方法 中图分类号:Q141 文献标志码:A 文章编号:1673—1808(2010)03—0074—02 生物多样性,既是生物之间以及生物与其生存环境之间复杂的相互关系的体现,又是生物资源丰富多 彩的标志.[ ]觋在一提到生物多样性,人们就会马上联想到众多的大型哺乳类动物、热带森林植物等,而个 体小型、又容易经简单培养便可得到的原生动物,却往往被人们忽略. 普通动物学原生动物的经典实验当属纤毛纲(Ciliata)的草履虫(Paramecium sp.)实验. 传统的实验方 法是到野外采集含有草履虫的水样,经解剖镜镜检确认后进行提纯,扩大培养成为单一的草履虫实验材料. 笔者在多年的工作中,总结了培养草履虫同时进行原生动物生物多样性观察的简便方法,作为原生动 物实验的拓展,供大家参考. 1.培养原液的制备:根据经验取玉米须、胡萝卜、稻草和麦麸任一种加水煮20min左右,制成2%玉米须 水、3%胡萝卜水、2%稻草水和3%麦麸水或直接在冷开水中加入蜂蜜制成0.1%蜂蜜水的培养原液,静置ld. 2.取水样:草履虫生活在富含有机质、水体稍有浑浊的平静水域,取水域上层的水样,草履虫密度较高. 3.直接观察:将采集到的水样直接观察,能观察到可用于实验的原生动物,纤毛纲的喇叭虫(Stentor)、 固定足吸管虫(Suctorida)、钟虫(Vorticella)和鞭毛纲(Mastigophora)的盘藻(Gonium)、合尾滴虫(Synura utella).[3] 4.培养:经解剖镜镜检确认所采水样中有草履虫(Paramecium sp.)后,将静置1d的培养原液倒人盛水 样的容器中,培养原液的倒人量约为水样的 左右,放置在阳光下温暖的地方或培养箱内,箱内温度控制 在22℃左右,一般培养3~5d,可得到大量的、多种类的纤毛纲动物和小的节肢动物等. 5.分离:将培养液倒入培养皿中,置于解剖镜下,用毛细管吸取分离.此时可将节肢动物门(Arthropoda) 桡足亚纲(Copepoda)的近邻剑水蚤(Cyclops vicinus)、轮虫动物门(Rotifera)的红眼旋轮虫(Phitoai, ̄ roseola)和萼花臂尾轮虫(Brachionus forifcula)嘲以及原生动物门(Protozoa)纤毛纲的棘尾虫(Stylonychia)跚 分离,以便分别观察.水蚤和轮虫,个体较大且以草履虫为食,培养过程中每一天都应及时检查、及时分离. 棘尾虫和草履虫共同培养的结果是由于食物的竞争,棘尾虫的数量大大多于草履虫.棘尾虫虽然也是纤毛 纲动物,但棘尾虫游动速度较快,不易观察其内部和外部结构,应及时分离,保证草履虫的培养. 6.观察:剩余草履虫培养液容器中再次倒人静置1d的培养原液,培养原液约为含草履虫培养液的1/3 左右,放置在阳光下温暖的地方或培养箱内,箱内温度仍然控制在22℃左右,一般再培养l一2d,可得到大 量的、多种类的纤毛纲的檐纤虫(Aspidisca)、游仆虫(Euplotes)、四膜虫(Tetrahymena)口 和草履虫,常规观察 [收稿日期]2OLO一03—21 [作者简介]江春(1956一),女,重庆人,晋中学院生物科学与技术学院,副教授,硕士,研究方向:动物学; 张谨华(1976一),女,山西交城人,晋中学院生物科学与技术学院,讲师,硕士,研究方向:微生物学 ・74・ 江春张谨华 原生动物生物多样性观察 即司._2 7.虫体形态区别:镜检刚采集的水样和培养初期的培养液,草履虫和棘尾虫虫体大小相差无几.培养初 期,草履虫游动过程中,虫体由于口沟的存在和该处的纤毛粘合成小膜带,摆动有力,使虫体不断旋转向前 游动;棘尾虫游动过程中虫体少有旋转,偶尔旋转表现出侧扁虫体.培养后期,草履虫虫体变大,沿身体长轴 向前旋转游动时体呈圆筒状,口沟明显;棘尾虫虫体由扁变圆,虫体短粗,游动快速.草履虫虫体大于四膜 虫、檐纤虫和游仆虫,且易与培养液表面虫体不断由钟形变为圆形的钟虫相区别. 8.pH调整:用I%NaHCO,微调培养液的pH值,可在不同pH环境下得到相应的原生动物. 表1不同pH对原生动物的影响 注:表中“一”表示无虫体;“+”表示虫体个数20以下;“++”表示虫体个数20—40;“+++”表示虫体个数40—60;“++++”表示 虫体个数6O以上.计数以三滴培养液观察后取平均值. 由表1可知:草履虫、四膜虫和钟虫在pH6.0—7.0范围内数量极大,四膜虫数量甚至超过100.游仆虫和 楣纤虫在pH6.0—7.0范围内数量较多,棘尾虫pH适应范围最广. 9.取土培养观察:采集绿化草坪土壤100g,加入静置1d的培养原液至高出土壤平面30~40mm,放置于 培养草履虫同样的环境中,可观察到土壤原生动物东方长颈虫(Dileptus orientalis).D 10.抗污染性实验:以原生动物为主的观察结束后,可将棘尾虫与大量的、多种类的纤毛纲培养液混合, 取造纸厂排出的、经镜检后无任何生物的污水加入其中,观察在被污染的水域中,哪种原生动物抗污染性 最强.实验观察的结果为:2d后,加入废水的培养液中有少量钟虫和大量棘尾虫存活;5d后,有少数棘尾虫 存活;8d后,镜检无棘尾虫,棘尾虫生命力最强. [参考文献] [1]张恒庆.保护生物学[M].北京:科学出版社,2005. [2]孙虎山.动物学实验教程[M].北京:科学出版社,2004. [3]沈韫芬.原生动物学[M].北京:科学出版社,1999. Observation of the Protozoa Biodiversity JIANG Chun,ZHANG Jin—hua (School ofBiology and Technology, ̄nzhong University, ̄nzhong 030600,China) Abstract:The purpose of traditional experiment about the protozoa Paramecium sp.in general zoology textbooks is simple This article provides a way to cultivate Paramecium sp.,and provides a conventional treatment to observe Protozoa biodiversity. Keywords:protozoa;biodiversity;experimental methods (编辑杨乐中) ・75・ 

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