第４２卷第１０期 ２０１４年５月 广州化工 Ｖｏ１．４２ Ｎｏ．１０ Ｍａｖ．２０１４ Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ 从红豆杉中提取紫杉醇的工艺研究 金洪顺，楼惠琴，蒋世春，白 骅 （浙江海正药业股份有限公司，浙江 台州 ３１８０００） 摘 要：紫杉醇（Ｔａｘｏ１）是从红豆杉树皮中分离得到的一种二精化合物，具有独特疗效的抗癌物，现已被多个国家批准应用 于临床治疗卵巢癌和乳腺癌等疾病。由于红豆杉中的紫杉醇含量非常低（仅为０．０１０％一０．０１３％），而且大量结构类似的紫杉烷类 物质存在，使得紫杉醇的分离纯化非常困难。本文通过对比５种不同提取方法（液液萃取、固相萃取、硅胶层析、氧化铝层析、 薄层层析），提出一种新的以氧化铝层析结合固相萃取工艺，具有紫杉醇高回收率的特点。 关键词：紫衫醇；红豆杉；提取；纯化；ＨＰＬＣ 中图分类号：ＴＱ９１４．１ 文献标志码：Ｂ 文章编号：１００１—９６７７（２０１４）０１０—００８８—０４ Ｓｔｕｄｙ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ ｏｆ Ｉｓｏｌａｔｅｄ Ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ ｆｒｏｍ Ｔａｘｕｓ Ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ ＪＩＮ Ｈｏｎｇ—ｓｈｕｎ。ＬＯＵ Ｈｕｉ—ｑｉｎ，ＪＩＡＮＧ Ｓｈｉ—ｃｈｕｎ，ＢＡＩ Ｈｕａ （Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｈｉｓｕｎ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｔａｉｚｈｏｕ ３ １ ８０００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ａｎｔｉｎｅｏｐｌａｓｔｉｃ ａｇｅｎｔ ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ（Ｔａｘｏ１），ａ ｄｉｔｅｒｐｅｎｅ—ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅ ｉｓｏｌａｔｅｄ ｆｒｏｍ Ｔａｘｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｂａｒｋ， ｗａｓ ｕｓｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ／ｏｒ ｂｒｅａｓｔ ｃａｎｃｅｒ ｉｎ ｍａｎｙ ｃｏｕｎｔｉｒｅｓ．Ｂｅｃａｕｓｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔｒａｃｅ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ（ｏｎｌｙ ０．０１０％一０．０１３％）ａｎｄ ａ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｓｉｍｉｌａｒ ｓｔｒｕｃｔｕｒａｌ ｔａｘａｎｅｓ ｉｎ Ｔａｘｕｓ Ｃ．，ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ ｗａｓ ｄｉｉｃｕｌｆｔ ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ｆｒｏｍ Ｔａｘｕｓ Ｃ．．Ａ ｎｅｗ ｈｉｇｈ—ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ—ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｐｒｏｃｅｓｓ ｗｉｔｈ Ａ１２ Ｏ３ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ—ＳＰＥ ｐｒｏｃｅｓｓ ｗａｓ ｐｒｅｓｅｎｔｅｄ ｂｙ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ ｏｆ ＬＬＥ，ＳＰＥ，ｓｉｌｉｃａ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，Ａ１２ Ｏ３ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ａｎｄ ＴＬＣ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ；Ｔａｘｕｓ ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ；ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ；ＨＰＬＣ 紫杉醇（ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ，商品名Ｔａｘｏ１）是当今重要的抗癌新 药。１９６３年，沃尔（Ｍ，Ｅ．Ｗｅｌ１）和瓦尼（Ｍ．Ｃ．Ｗａｎｉ） 首次从红豆杉树皮和木材中分离得到含有紫杉醇的粗提物。早 分离的研究，虽已有不少文献报告 ，但提取的产品纯度有 局限。本文研究了运用高效提取分离技术获得紫杉醇的工艺。 在１９７１年，由美国的Ｗａｎｉ等从红豆杉属植物短叶红豆杉 （Ｔａｘｕｓｂｒｅｖｉｆｏｌｉａ）的树皮中发现并分离出的二萜类成分…，与 １材料与方法 １．１ 实验仪器 ＤＵ一７紫外／可见分光光度计及ＦＬ一７５０ＨＰＬＣ仪， Ｂｅｃｋｍａｎ公司；ＸＺ一６Ａ旋转蒸发器，北京科龙仪器公司；常 压层析系统，Ｐｈａｒｍａｃｉａ公司；ＧＦＳＪ一８Ａ粉碎机，江苏瑰宝； 岛津ＬＣ一６Ａ高效液相色谱仪，ＳＰＤ一６ＡＶ紫外检测器，ｃ— Ｒ３Ａ数据处理机，ＣＱ一５００Ｊ超声波振荡器。 杜克大学姆克法尔（Ｍｃｐｈａｉｌ）协作，用ｘ射线确定了紫杉醇的 化学结构，化学式为Ｃ Ｈ Ｏ Ｎ。１９７９年美国Ｈｏｒｗｉｔｚ等发现 其具有良好的抗癌活性和独特的抑制微管解聚、稳定微管等效 果。可用于卵巢癌和乳腺癌及非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）的一线和 二线治疗，以及头颈部癌、食管癌，精原细胞癌，复发非何杰 金氏淋巴瘤等治疗。由于它特异的临床抗癌疗效，１９９２年被美 国ＦＤＡ批准为治疗晚期乳腺癌的特效药而上市。 然而，在实际药物生产中，紫杉醇的大规模制备仍存在许 多问题。首先，紫杉醇来源匮乏，其主要存在于红豆杉树皮和 针叶中。为了解决紫杉醇的有限药源，国内外学者围绕红豆杉 的栽培、紫杉醇的化学合成（包括半合成和全合成）、红豆杉 组织和细胞培养等诸多领域，进行了有益的探索，取得了一些 令人瞩目的进展。目前市场出售的紫杉醇都是从天然和栽培红 豆杉的树皮或枝叶中直接提取得到的。其次，由于天然植物中 紫杉醇含量极低，大约为０．０１０％一０．０１３％，而紫杉醇与其它 紫杉烷化合物在化学结构和极性等方面又极为相似，要将它们 １．２ 实验材料 １．２．１材料 红豆杉枝叶，富阳红豆杉种植基地；紫杉醇（Ｔａｘｏ１）标准品 （纯度Ｉ＞９７％，规格：ＣＰ，批号：１００３８２—２０１１０２），中国生物 药监所；紫杉醇对照品（纯度大于９５％），自制。 １．２．２仪器 固相萃取柱（Ｃｌ ８填料，１Ｏ ｍ），大连依利特公司；ＧＦ２５４ 硅胶板，青岛海洋化工厂；粗孔硅胶（１００—２００目），青岛海洋 化工厂；层析氧化铝（２００～３００目），上海谊恒工贸有限公司； 毛细管等。 １．２．３试剂 乙腈（色谱纯），台州市大明医药化工有限公司；乙酸乙酯 完全分离困难很大，因此更有效地分离紫杉醇及其类似物，对 基础研究和实际应用有着极其重要的意义，有关紫杉醇的提取 作者简介：金洪顺（１９７６一），男，工程师，主要从事药物研究与应用。 通讯作者：蒋世春。 第４２卷第１０期 金洪顺，等：从红豆杉中提取紫杉醇的工艺研究 ８９ （试剂级），浙江建德建业有机化工有限公司；甲醇（分析纯）， 台州市友邦化学有限公司；乙醇（试剂级），台州市友邦化学有 限公司；石油醚（试剂级），常州新区永联化工有限公司；三氯 甲烷（试剂级），临安青山化工试剂厂；二氯甲烷（试剂级），宁 波市乐嘉化工有限公司；乙酸铵缓冲液（试剂级），国药集团化 学试剂有限公司；纯化水，自制。 １．４．１．４氧化铝柱层析 ＣＨ ＯＨ、ＣＨＣ１ 用分子筛脱水，层析用氧化铝１９０ ｑＣ真空 干燥６ ｈ后，用脱水ＣＨＣ１ 浸泡，超声波脱气５ ｒａｉｎ，装成 １５ ｍｍ ｘ２６０ ｍｍ的层析柱。清洗柱后上样，用ＣＨＣＩ 洗去未被 吸附的杂质，再用１％（‘Ｐ）的ＣＨ ＯＨ、ＣＨＣ１ 淋洗，最后用５％ 的ＣＨ ＯＨ溶液洗脱出紫杉醇，ＨＰＬＣ测定其纯度。柱层析过程 在常温常压下操作。 １．４．１．５制备薄层层析 用ＧＦ２５４硅胶自制１００ ｍｍ×２００ ｍｍ层析薄板，１０５℃活 化０．５ ｈ，样品用ＣＨ ＯＨ溶解，配成１０ ｍｇ／ｍＬ的溶液。毛细 １．３试液的制备 １．３．１标准品溶液制备 准确称取紫杉醇（ｆａｘｏ１）标准品（纯度≥９７％）５．Ｏ０ ｍｇ， 加入５．Ｏ０ ｍＬ甲醇定容，配制成１．Ｏ０ ｍｇ／ｍＬ的标准溶液液， 管点样，成线状，每板点样量在２ ｍｇ左右。在对照板中点标准 用外标法定量计算紫杉醇的含量，贴好标识，贮藏于２—８ ｏＣ 冰箱内备用。ＨＰＬＣ检测图谱见图１。 １．３．２供试样品制备 采集新鲜的红豆杉枝叶，清水洗净，于６５℃烘箱内干燥 至恒重，用粉碎机粉碎，过筛。准确称取过筛后的样品５ ｇ，置 ５０ ｍＬ广口具塞三角瓶内。加入乙醇５０ ｍＬ，超声萃取３０ ｍｉｎ，取 上清液，沉淀再加５０ ｍＬ乙醇，超声萃取３０ ｒａｉｎ，合并两次上 清液，过滤除渣，滤液于３０℃减压浓缩蒸干，得浸膏用５０ ｍＬ 甲醇溶解。加入石油醚（体积比１：１），于６０—９０℃振荡 ３０ ｒａｉｎ，脱脂。萃取余液用三氯甲烷（体积比２：１）振荡 ３０ ｒａｉｎ，褪色。再将萃取余液减压浓缩蒸干（３０℃），用１２．５ ｍＬ 甲醇溶解于量瓶中，制备液经０．４５ ｍ过滤器过滤，得浸膏滤 液，ＨＰＬＣ外标法测定紫杉醇含量，均分５等份，作好标识， 备用。ＨＰＬＣ检测图谱见图２。 １．３．３对照品贮备液制备 精密称取紫杉醇对照品ｎ ００４ ｇ，置２０ ｍＬ容量瓶中，用甲醇 溶解并定容，摇匀标识待用。用外标法定量计算紫杉醇的含量。 １．４实验方法 １．４．１分离方法 １．４．１．１液一液萃取 取浸膏滤液，加ＣＨ２Ｃ１２（浸膏／ＣＨ２Ｃ１２的重量比为１：５０）， 充分溶解，再加入与ＣＨ：Ｃ１：等量的纯化水，充分混合后静置 分层，取有机相，弃水相。有机相再加纯化水萃取，重复三 次。将洗涤后的有机相减压浓缩蒸出ＣＨ：Ｃ１：，所得固相浓缩物 溶解于甲醇中，用ＨＰＬＣ作定性定量分析紫衫醇含量。 １．４．１．２固相萃取 固相萃取过程包括四步骤，即固定相活化、样品上柱、淋 洗、样品的洗脱。流速稳定控制在５—８ ｍＬ／ｍｉｎ。 固定相活化：取乙酸乙酯１０ ｍＬ加入柱中，抽空。依次加 入甲醇１０ ｍＬ和０．０１ ｍｏｌ／Ｌ（ｐＨ＝５．０）的乙酸铵缓冲液１０ ｍＬ （乙酸铵水溶液），将液面维持在胶层上１—２ ｍｍ。 上样及淋洗：将样品溶于８０％一９０％的甲醇乙酸铵溶液 中，取０．５ ｍＬ加入柱中，抽空。依次用０．０１ ｍｏｌ／Ｌ的乙酸铵 溶液１０ ｍＬ、５０％的甲醇乙酸铵溶液淋洗，抽空。 紫杉醇的洗脱：在淋洗好的柱子中加入８０％的甲醇乙酸铵 溶液１０ ｍＬ，收集洗脱液，减压蒸干。从洗脱液蒸干所得的固 体物中取样，溶解于甲醇，作ＨＰＬＣ定性定量分析。 １．４．１．３硅胶柱层析 硅胶用ＣＨＣ１ 浸泡，超声波脱气５ ｒａｉｎ，重力沉降法装柱 （１５ ｍｍ Ｘ２６０ ｍｍ），用ＣＨＣ１ 充分洗出硅胶中的杂质至柱床透 明。样品溶解于ＣＨＣ１ 后上柱，再用ＣＨＣ１ 充分洗去未被吸附 的杂质，然后用３：９７（ｖ／Ｖ）的ＣＨ，ＯＨ：ＣＨＣ１ 进一步洗脱， 收集洗脱峰，ＨＰＬＣ测定紫杉醇的纯度。柱层析过程在常温常 压下操作。 品和样品，用氯仿一甲醇（９５：５）展开，２５４ ｎｍ紫外光下确 定紫杉醇的Ｒ 值。切割并收集制备板上的紫杉醇带，用 ＣＨ ＯＨ洗脱下硅胶上吸附的紫杉醇，ＨＰＬＣ测定其纯度。 １．４．１．６超临界萃取法 超临界流体技术（ＳＰＦ） 。。引入紫杉醇的提取纯化技术可以 减少含氯有机溶剂的使用，ＳＰＦ最常用的溶剂是二氧化碳，它 本身无毒且易从提取物中分离，是一种环保、安全的新技术。 但由于ＳＰＦ用于初提阶段成本过高，目前难以进行大规模实 践。 １．４．２紫杉醇的定量定性分析” 采用ＨＰＬＣ对紫杉醇作定性定量分析：４．６ ｌｎｍ×２５０ ｍｍ 的Ｃ 柱，检测波长为２２７ ｎｍ，等梯度洗脱，流动相为甲醇一 乙腈一水（２０：３２：４８），流速１．０ ｍＬ／ｍｉｎ，以紫杉醇标准品 为对照，外标法作定量分析。 ２ 实验结果 ２．１ 各种实验方法优缺点分析 ２．１．１液一液萃取 以１：１的二氯甲烷一水对浸膏液一液萃取，紫杉醇富集 到有机相。实验中发现，有机相与水相的分层速度慢，并有乳 化现象。液一液萃取的紫杉醇回收率为９６．１％，紫杉醇含量从 ０．６３％提高到１．２３％，液一液萃取的缺点在于产生的废水较 多。紫杉醇标准对照品的ＨＰＬＣ标准图谱见图１，样品处理前 ＨＰＬＣ图谱见图２，经液一液萃取后的ＨＰＬＣ图谱见图３。 ３００ ２５０ ２００ ｌ５Ｏ ｌＯ０ ５０ ０ 图１标准品对照图谱 Ｆｉｇ．１ Ｓｔａｎｄａｒｄ ｓａｍｐｌｅ ＨＰＬＣ ４Ｏ ３０ ｛２０ ｌＯ ０ ０ ｌ０ ２０ ３０ ４０ ５０ ｍｉｎ 图２浸膏原液ＨＰＬＣ图谱 Ｆｉｇ．２ Ｅｘｔｒａｃｔ ｓａｍｐｌｅ ＨＰＬＣ 广州化工 ２０１４年５月 紫杉醇在氧化铝柱上的保留和分离与硅胶柱层析大致相 同。用最佳流动相和高活性（即含水量低）的吸附剂分离芳烃异 Ａ ＝ Ｒ 构体，氧化铝柱往往要比硅胶效果好得多。用５％的甲醇洗脱，ＩＩ． 可将大部分紫杉醇洗出。实验表明，氧化铝还能使糖基化的紫 杉醇转化为紫杉醇，从而增加了紫杉醇的总量，使紫杉醇的回 一一 ＝ Ｊ一 图３液一液萃取ＨＰＬＣ检测图谱 Ｆｉｇ．３ Ｌｉｑｕｉｄ—ｌｉｑｕｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ＨＰＬＣ 收率可达１３８．５％，纯化倍数达４Ｏ．５倍，大大提高红豆杉的资 ＿ｆ２ 呻 ｌ｝ 源利用率。ＨＰＬＣ检测图谱见图６。 ２．１．５制备薄层层析 舳 ¨¨¨＿ｌ一 硅胶薄层层析（ＴＬＣ）原理与硅胶柱层析原理一致。ＴＬＣ可 将样品分离出１１条以上的色带，紫杉醇带在薄板的中部（Ｒ 芎Ｎ 二 ２．１．２固相萃取 用５０％的ＣＨ ＯＨ洗涤，紫杉醇不会被洗下，而浓度加大 ０．５），呈现紫红色。应用ＴＬＣ纯化紫杉醇，一步可将紫杉醇含 量从０．６３％提高到１３．９％，回收率为９９．７％。ＨＰＬＣ检测图谱 到８０％，即可将紫杉醇从萃取柱洗脱。样品经一步固相萃取， 紫杉醇浓度可提高８．９倍，回收率为１００％。与液一液萃取相 比较，固相萃取的优点体现在快速、简单、便于自动化。同 时，固相萃取的分离效率明显高于液一液萃取。ＨＰＬＣ检测图 谱见图４。 ３ ２ ２ 量ｌ ｌ 图４固相萃取ＨＰＬＣ检测图谱 Ｆｉｇ．４ Ｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ＨＰＬＣ ２．１．３硅胶柱层析 紫杉醇在硅胶柱上的保留较强，用ＣＨＣ１，淋洗时，紫杉醇 不被洗出。而用３％（‘Ｐ）的ＣＨ，一ＯＨ：ＣＨＣ１，洗脱，可分离出 两个峰。ＨＰＬＣ分析表明，其中的第二个峰，即为紫杉醇。实 验中还发现，在层析流动相中添加０．０５％水时，分离出的紫杉 醇纯度有所提高，分离速度也能显著加快。经硅胶柱层析，能 获得纯化２２．３倍，纯度为１４．０５％的紫杉醇，回收率为 ９８．６％。ＨＰＬＣ检测图谱见图５。 鋈 图５硅胶层析ＨＰＬＣ检测图谱 Ｆｉｇ．５ Ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ＨＰＬＣ ２．１．４氧化铝柱层析 图６氧化铝层析ＨＰＬＣ检测图谱 Ｆｉｇ．６ Ａｌｕｍｉｎａ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ＨＰＬＣ 和分离后的薄层色谱图如图７。 善 ０ ｌＯ ２Ｏ ３０ ４０ ５０ 图７薄层层析ＨＰＬＣ检测图谱（ａ）和分离后的薄层色谱图（ｂ） Ｆｉｇ．７ Ｔｈｉｎ ｌａｙｅｒ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ ＨＰＬＣ（ａ）ａｎｄ ＴＬＣ ａｆｔｅｒ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ（ｂ） ２．２ 各实验方法处理结果的比较 各处理方法结果比较如表１。由表１中数据可知，以氧化 铝柱层析纯化紫杉醇的效率最高。氧化铝价格便宜，能充分利 用有限的红豆杉原料，是一可行的纯化紫杉醇方法。其次是硅 胶柱层析，浸泡好的硅胶半透明，在玻璃层析柱上能观察到层 析进展情况，操作很直观。ＴＬＣ的优点是设备简单、有机溶剂 消耗很少。但ＴＬＣ处理量较小，不适合产业化生产。固相萃取 的优点，简单、便于自动化、能显著减少溶剂的用量，降低生 产成本。 表１ 各处理方法对紫杉醇纯化效果的比较 Ｔａｂｌｅ １ Ｅｆｆｅｃｔ ｉｎ ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｂｙ ｖａｒｉｏｕｓ ｍｅｔｈｏｄｓ ２．３紫杉醇初分离工艺的提出 ＨＰＬＣ分析表明，粗品经过氧化铝柱层析处理后，极性比 第４２卷第１Ｏ期 金洪顺，等：从红豆杉中提取紫杉醇的工艺研究 ９ｌ 紫杉醇弱的物质基本被除去，而极性比紫杉醇稍强的杂质用正 相柱已很难分离。仅经一步正相柱层析，样品中的成分还较复 杂，若直接上ＨＰＬＣ制备柱，必将影响ＨＰＬＣ柱的使用寿命、 进料量等。因此，有必要对样品作进一步的处理。较理想的工 艺是氧化铝正相柱层析处理后采用一步反相层析，即采用一步 化生产。氧化铝柱层析处理红豆杉浸膏，紫杉醇的回收率约达 １４０％，这使有限的红豆杉资源能得以充分的利用。然后样品 再经一次Ｃ 固相萃取分离处理后，可直接上ＨＰＬＣ制备柱。此 分离工艺提取紫杉醇的纯化倍数为６５．１，纯化倍数可达６５。 参考文献 ｌ １】 ＷａｎｉＭＣ，ｅｔ ａ１．Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，１９７１，９３：２３２５． ｆ ２］ ＣａｒｄｅｌｉｎａｌＩ ＪＨ．ＨＰＬ Ｃｓｅｐｒａｔｉｏｎｏｆ Ｔａｘｏｌａｎｄｃｅｐｈａｌｏｍａｎｎｉｎｅ．ＪＬｉｑ Ｃ 固相萃取，以除去极性比紫杉醇稍强的杂质 。 根据以上分析，准确称取过筛后的样品各２ ｇ，按“供试 样品制备”操作制备两份样品，样品先经“氧化铝柱层析”法 进行初步分离，然后再采用“固相萃取”法进行再次分离纯 化，紫杉醇的纯化倍数达６５．１，紫杉醇回收率为１３５．８％，纯 度为４１．０１％。实验结果如表２。 表２工艺纯化紫杉醇结果 Ｔａｂｌｅ ２ Ｒｅｓｕｌｔ ｏｆ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒ，１９９１，１４（４）：６５９． ［３］ 方唯硕．紫杉醇的化学研究［Ｊ］．中国药学杂志，１９９４，２９（５）：２５９． ［４］ 佟晓杰，方唯硕，周金云，等．东北红豆杉枝叶化学成分的研究 ［Ｊ］．药学学报，１９９４，２９（１）：５５． ［５］愈培患，李幼萍，吴锦霞．紫杉醇的提取分离和检测方法的研究进 展［Ｊ］．中国药学杂志，１９９６，３１（７）：３９０． ［６］邱德有，李如玉，韩一凡．紫杉醇提取分离方法的研究进展［Ｊ］．中 国药学杂志，１９９６，３１（１１）：６４６． ［７］甘烦远，郑光植，彭雨萍，等．紫杉醇提取分离方法的研究［Ｊ］．色 谱．１９９６，１４（４）：３０６． ［８］ 张沿军，李铣，吴立军．东北紫杉茎皮化学成分的研究［Ｊ］．中草药， １９９６，２７（４）：２００． ［９］赵广河，张培正．紫杉醇提取纯化技术研究进展［Ｊ］．食品与发酵 工业２００８，３４（５）：１３８—１４２． ３ 结论 ［１０］王正平．天然抗癌药物——紫杉醇［Ｊ］．应用科技，２００４，３１（１）： ５６—５７． 本研究工艺主要目的是简单、快速除去紫杉醇类似物及其 它生物碱，获得初步纯化的紫杉醇工艺。综上所述，过程采用 价格低廉的氧化铝为层析介质，省略了液一液萃取步骤，简化 了分离工艺，提高了分离效率，有利于工业放大，适用于产业 ［１１］徐礼桑，刘爱茹．红豆杉中紫杉醇的高效液相色谱法测定［Ｊ］．药 学学报，１９９１，２６（７）：５３７—５３９． ［１２］张志强，王云山，田桂莲，等．固相萃取及反相层析分离提纯紫杉醇 ［Ｊ］．药物生物技术，２０００，７（３）：１５７—１６０． （上接第８２页） ［３］ 李平，吴锦华，朱能武，等．Ｆｅｎｔｏｎ法对老龄垃圾渗滤液难降解有机 毒物的削减［Ｊ］．环境工程，２０１２，３０（１）：３９—４２． ［４］ 方芳，刘国强，郭劲松，等．垃圾渗滤液中溶解性有机质研究进展 ［ｊ］．水处理技术，２００９，４：４—８． ［５］ Ｐｉｎ—ｊｉｎｇ Ｈｅ，Ｊｕｎ—ｆｅｎｇ Ｘｕｅ，Ｌｉ—ｍｉｎｇ Ｓｈａｏ，ｅｔ ａ１．Ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｏｒｇａｎｉｃ ｍａｔｔｅｒ（ＤＯＭ）ｉｎ ｒｅｃｙｃｌｅｄ ｌｅａｃｈａｔｅ ｏｆ ｂｉｏｒｅａｃｔｏｒ ｌａｎｄｆｉｌｌ［Ｊ］． Ｗａｔｅｒ Ｒｅｓｅａｒｃｈ，２００６．４Ｏ：１４６５—１４７３． ［７］ 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