海峡药学2010年第22卷第7期HPLC法测定致康胶囊中大黄酸!大黄素和大黄酚的含量李志梅(浙江省温州市药品检验所温州325028)摘要:目的建立高效液相色同时浏定致康胶t中大黄酸!大黄素!大黄阶含t的方法\"方法色语柱:安捷伦Ecl币,xD压Cl\"柱(250mx4.6mm,s,m);流动相:-精#水一冰姗酸(60:40:1);流速:z.omL#min一-;检浏波长:437nm\"结果大黄酸平均回收率为95.26%,R劝为1.79%,大黄素平均回收率为99.19%.RsD为1.02%,大黄阶平均回收率为99.48%,RSD为01.85%\"结论该方法简便!灵教!准确,可作为致康胶t的质全技制方法\"关镇词:高效液相色讲;大黄酸;大黄紊;大黄阶;致康胶爱中图分类号:即27.2文献标识码:A文章编号:2006一3765(20101一07一0102一02 Determinstionofrhein,emodinandehrysoPhanolinZhikangCaPsulesbyHPLCL1Zhi一mei(WenzhouInstitueforDrugControlWenzhou325028,China)ABSTRACT:OBJECrIVEToestablishanHPIJCmethodforthedeterminationofcontentsofrhein,emodinand h巧scophanolinZhikang\"apsules.METHoDslengthwas9eb437nm.RESUL铭ThegilentEelipsoXDB一Cls柱(250mmX4.6mm,5拜m)wasArhein.emodinandehrysophanolwas98.26,99.19,used.Themobilephasewasaeetonitrile一water-aeeti\"aeid(60:40:z),flowratel.omL#min一-,andth\"wave-veragerecaoveryrateof.48andRSDwas1.79%,1.02%,1.85%.CONCLUSIONThemethodissimPle,aeeurate,sensitiveandean usedtocontrolthequalityofZhikangeaPsule.KEYWORDS:HPIC;rhein;em诫n;ehrySOphanol;Zhikangcapsules. 致康胶囊收载于(国家中成药标准汇编)内科气血津液分册,是由大黄!黄连!三七!龙血竭等14味药等药材组成的中药复方制剂\"具有清热凉血,化寮止血的功效\"用于呕血!35e;流速为1.0mL#min一.,进样量10拜L;检测波长437nm\"在上述色谱条件下,色谱峰分离良好,且阴性样品溶液无干扰(见图l)\"崩漏及便血等(7\"标准中只对大黄素的含量进行控制,研究l表明大黄酚!大黄素!芦荟大黄素!大黄酸和大黄素甲醚是大黄的主要活性成分闭,为了更好地控制药品质量,本文采用万于IC法测定大黄酸!大黄素和大黄酚这3种葱酿类化合物的含量,为致康胶囊的质量控制提供参考依据\"1仪器与试药glAeni-1t20高效液相色谱仪(具二极管阵列检测器);METTLERX夕05DU百万分之一夭平\"大黄酸对照品(中国二2.2对照品溶液的制备精密称取置五氧化二磷减压干燥器中干燥12h的大黄酸!大黄素!大黄酚对照品,加甲醇制成含大黄酸10陀#药品生物制品检定所,批号:0757一200206);大黄素对照品(中国药品生物制品检定所,批号:110756一200110);大黄酚对照品(批号:110796一200716,中国药品生物制品检定所);乙睛为色谱纯,水为超纯水,其他试剂均为分析纯\"致康胶囊(西安千禾药业有限责任公司生产三批,规格:每粒装0.39)\"2方法与结果乙二!二大黄酚的HPLc图r一Ln-!大黄素10陷#mL一.!大黄酚20滩#mL一-的混合 2.1~色谱条件安捷伦Eclip二xD压Cl\"柱(250rmnx4.6图l致康胶.中大黄酸!大黄素!溶液,即得\",5拌m)\"流动相为乙睛一水一冰醋酸(60:40:1);柱温:2.3供试品溶液的制备A致康胶囊;B阴性对照品;C.对取本品内容物,研细,取0!4照品;1.大黄素;2.大黄酸;3.大g,精密称定,置索氏提取器黄酚中,加甲醇适量,加热提取作者简介:李志梅.女(1975一)\"1998年毕业于淮南工业学院\"职称:主管药师\"从事药品检验工作\"联系电话:0577一88508611\"E一m目:肠比631@yahco.xom.cn102. StraitPharmaeeutiealJournalVol22No.72010至近无色,甲醇液(必要时适当浓缩)转移于50mL量瓶中,加回收率,结果大黄酸平均回收率为98.26%,RSD为1.79%,大黄素平均回收率为99.19%,RSD收率为99.48%,RSD2.10样品含量测定为01.85%\"分别精密称取3批样品,按/2.30项下为1.02%,大黄酚平均回甲醇至刻度.摇匀\"精密吸取上述溶液10mL,置烧瓶中,蒸 干,加lmol.L一-盐酸溶液30mL,加氯仿20mL,加热回流lh,冷却,分取氯仿层,水层再用氯仿振摇提取3次,每次10mL,合并氯仿液,蒸至近千,用甲醇定量转移至10mL量瓶中,并方法制备,按/2.10项下色谱条件进行测定\"结果(见表1)\"表13批致康胶班中大黄酸!大黄素和大黄酚的含t序号123稀释至刻度\"用微孔滤膜(0.45拜m)滤过,即得川\"2.4阴性对照溶液的制备按处方比例分别称取除大黄外其他药材适量,按致康胶囊的制备工艺制得缺大黄的阴性样 大黄酸(吨#g一1)0.1770.2070.193大黄素(吨#g一l)0.4460.4610.421大黄酚(爬#g一.)0.8420.9710.8品,照供试品溶液制备项下方法制备阴性样品溶液\"2.5线性关系的考察分别精密吸取对照品溶液(含大黄酸310.22拌g#mL一-,大黄素9.52拌g#mL一..大黄酚15.76拌g#mL一-)1!5!10!一5!20拼L,注入液相色谱仪,NJ定峰面积\"以进l样量(拼g)为x值,吸收峰面积为Y值,进行线性回归,得到回归方程为:大黄酸:Y=1122.3X一1.9514,r=0.99%;大黄素:讨论3.1根据文献,我们对色谱条件进行了筛选,考察了以甲醇一0.1%磷酸(85:巧)为流动相,检测波长:254nmt.32,结果此2条件时杂质峰较多,杂质与大黄酸的不能完全离,造成含量测定误差较大,故选流动相为乙睛一水一冰醋酸(60:40:1),检测波长为437nm(22\"3.2选用二极管阵列检测器时,须注意参比波长的选择,若选用360nm(仪器默认条件),则出现倒峰,且分离度达不到要求\"本试验选用700nm作为参比波长,获得满意峰形,分离良好\" Y=1305.6X一0.2783,r=1.0000;大黄酚:Y=1457.2X一1.0651,:=0.9995\"结果表明大黄酸在0.01022一0.2044拜g!大黄素在0.00982一0.19拌g,大黄酚在0.01876一0.37拼g呈良好的线性关系\"2.-精密度试验精密吸取对照品溶液10拜L,进样,重复5次,测定峰面积,大黄酸RSD为0.72%;大黄素RSD为1.01%;大黄酚RSD2.7稳定性试验为0.46%\"精密吸取供试品溶液10拌L,分别于0!2!本研究对致康胶囊中的有效成分大黄酸!大黄素!大黄酚建立了含量测定方法,该方法简便!灵敏!准确且专属性较强,可有效控制致康胶囊的产品质量\"参考文献 4!6!sh进样,测定峰面积,大黄酸RSD为1.15%;大黄素RSD为1.16%;大黄酚RSD为0.92%,结果表明样品溶液在sh内稳定\" 2.8重复性试验分别取同一批供试品5份,制备供试品溶液,进行测定,计算含量平均值得含大黄酸为0.207mg#g一1,RSD为2.62%;大黄素为o.461mg#g一-,Rso为1.59%;大黄酚为0.971mg.g一-,RsD好\"2.,回收率试验采取加样回收法\"取同一批已知含量的样品6份,每份约0.29,精密称定,分别各精密加入大黄酸!大11)国家药品监督管理局编.国家中成药标准汇编.内科:气血津液分册(SJ.2002:11一12.28国家药典委员会编.中国药典201[0年版.一部(S2.中国医药科技出版社,2010:22一23. 为1.08%\"结果表明方法重复性良(32高宇明,曾锐.高效液相色谱法测定胃欣舒胶囊中大黄酸!大黄素和大黄酚的含量1J2.中南药学,2009,7(4):275一276.142朱伟,丘小惠.测定大黄水提物中游离慈酿类成分的含量1J2.今日药学,2009,19(6):30一35.黄素!大黄酚对照品适量,按样品测定方法测定其含量,计算耳介{,,梁敬枉(中国药科大学),曹永孝(西安交通大学),游枫慧(福建医科大学和医院),潘杰(漳州片仔疾股份有限公司)\"__止103
