HEPES buffer 缓冲溶液的配制方法
HEPES分子量为238.31,化学名:4-羟乙基哌嗪乙磺酸,分子式: C8H18N2O4S。
HEPES常用于生物缓冲剂,pH值缓冲范围:6.8-8.2,用在生化诊断试剂盒、DNA/RNA提取试剂盒及 PCR诊断试剂盒里。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用 终浓度为10-50mmol/L。
关于HEPES 缓冲溶液的配制, 不同的文献资料有不同的说法。 根据用途, 一种是单纯的HEPES+NaOH, 另一种是HEPES+盐。各种配制方法总结如下: 一、500ml 1 M HEPES, pH = 7.0 Stock solution的配制
119.15 g HEPES 溶解在400ml蒸馏水中,加0.5~1M 的NaOH水溶液调节至少所需pH(HEPES的有效 pH 范围是6.8~8.2),然后用蒸馏水定容至500ml,于4摄氏度保存。 二、加少量盐的HEPES Buffer配方(500ml)
HEPES 6.5g、NaCl 8.0g、Na2HPO4.7H2O 0.198g、用0.5M NaOH 水溶液调节pH值,最后定容。 三、2×HEPES缓冲盐溶液的配制
将1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g Na2HPO4.2H2O、0.2g葡聚糖(glucan or dextran)和1g HEPES溶 解在90ml的蒸馏水,用0.5M NaOH调节至所需pH值,再用蒸馏水定容至100ml即可。