中国药事２０１１年第２５卷第１Ｏ期 １Ｏ３１ ＨＰＬＣ法测定甘草酸二铵原料的含量 张轶华，姜建国，黄 静（河北省药品检验所，石家庄０５００１１） 摘要： 目的建立测定甘草酸二铵原料含量的ＨＰＬＣ法。方法选用Ａｇｉｌｅｎｔ Ｅｘｔｅｎｄ—Ｃ１８柱；流动相：乙 腈一０．０１ｍｏｌ・Ｌ－ 磷酸溶液（３８：６２）；检测波长：２５２ｎｍ；流速：１．０ｍＬ・ｒａｉｎ－ ．结果本方法的线性范围 为１２．５～１２５０￣ｇ・ｍＬ‘。，ｒ一０．９９９９；平均回收率在９９．２ 以上。结论本方法操作简便，结果准确可靠， 可用于甘草酸二铵原料的质量控制。 关键词： 甘草酸二铵；含量测定；ＨＰＬＣ 中图分类号：Ｒ９２７．２ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００２—７７７７（２０１１）１０—１０３１—０２ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｄｉａｍｍｏｎｉｕｍ Ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎａｔｅ ｂｙ ＨＰＬＣ Ｚｈａｎｇ Ｙｉｈｕａ，Ｊｉａｎｇ Ｊｉａｎｇｕｏ ａｎｄ Ｈｕａｎｇ Ｊｉｎｇ（Ｈｅｂｅｉ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ Ｄｒｕｇ Ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｓｈｉｊｉａｚｈｕａｎｇ ０５００１ １） ＡＢＳＴＲＡＣＴ： Ｏｂ ｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｍｅｔｈｏｄ ｔｏ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｄｉａｍｍｏｎｉｕｍ ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎａｔｅ ｂｙ ＨＰＬＣ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａｇｉｌｅｎｔ Ｅｘｔｅｎｄ—Ｃ１８ ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｏｆ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ一０．Ｏｌｍｏｌ・Ｌ一 ｐｈｏｓｐｈａｔｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ（３８：６２）；ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ １．０ｍＬ・ｍｉｎ－ ；ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ２５２ｎｍ． Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ １２．５～１２５０￣ｇ・ｍＬ－ ，ｒ＝０．９９９９．Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｄｉａｍｍｏｎｉｕｍ ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎａｔｅ ｗａｓ ａｂｏｖｅ ９９．２ ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉＳ ｃｏｎｖｅｎｉｅｎｔ，ａｃｃｕｒａｔｅ，ａｎｄ ｉｔ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ ｄｉａｍｍｏｎｉｕｍ ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎａｔｅ． ＫＥＹ ＷＯＲＤＳ：ｄｉａｍｍｏｎｉｕｍ Ｇ１ｙｃｙｒｒｈｉｚｉｎａｔｅ；ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ；ＨＰＬＣ 甘草酸二铵是从豆科植物甘草中分离，筛选的 主要活性成分甘草酸的二铵盐，具有非特异性抗 １仪器与试药 ＤＩＯＮＥＸ ＵＬＴＩＭＡＴＥ ３０００高效液相色谱仪 （戴安公司）。 甘草酸二铵对照品（Ｂ厂，批号：１００５０１，纯 炎、抗过敏、稳定溶酶体膜及免疫调节作用，其抗 病毒作用尤为突出。临床上被广泛用于治疗病毒性 肝炎及多种疾病和理化因素引起的肝脏损伤。甘草 酸二铵其药品质量标准为国家药品标准 收载，且 度：９８．４ ），甘草酸二铵样品（３个厂家提供。Ａ 厂，批号：０９０９０１、０９０９０２、０９０９０３；Ｂ厂，胶囊 用，批号：１００２０６、１００２０７、１００２０８；注射剂用， 批号：１００３１７、１００３１８、１００３１９；Ｃ厂，批号： 试行标准较多（征集到１１家标准），例如 ＹＢＨ４０９０２００５、 ＹＢＨ１５９３２００６、 ＹＢＨ００９８２００６ 等。征集到的标准中含量测定均采用紫外～可见光 度法，以烟酰胺为对照品，测定结果乘以１．８９８， ２００８０７１９）。乙腈为色谱纯（Ｆｉｓｈｅｒ ｃｈｅｍｉｃａ１），其 余试剂均为分析纯。 ２方法与结果 该方法专属性差，测定结果无法真实反映药品的质 量。曾有文献报道测定甘草酸二铵Ｉ２ ］，但未见报 道甘草酸二铵原料的含量测定方法。为提高药品标 准，本文用高效液相色谱法，以乙腈一磷酸溶液为 流动相直接测定甘草酸二铵原料的含量，专属性 高，线性范围宽，检测限低，方法简便。适用于甘 草酸二铵原料的质量控制。 ２．１色谱条件 色谱柱：Ａｇｉｌｅｎｔ Ｅｘｔｅｎｄ—Ｃ１８柱（４．６ｍｍ× ２５０ｍｍ，５ｐｍ），流动相：乙腈一０．０１ｔｏｏｌ・Ｌ 磷酸 溶液（３８：６２），检测波长：２５２ｎｍ，流速： １．ＯｍＬ・ｍｉｎ～，进样量：２Ｏ Ｌ，柱温：３５℃。色 谱图见图１。 作者简介：张轶华，Ｔｅｌ：（０３１１）８５２１２００８—８０３８；Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｙｉｈｕａ０９１５＠１６３．ｃｏｒｎ １０３２ 二＿；＝；＝ ＝；：． ＝＃兰；；＝；＝～ 二 ａ．对照品；ｂ．样品；１．甘草酸二铵峰。 图１甘草酸二铵原料ＨＰＬＣ色谱图 ２．２ 溶液的配制 对照品溶液的配制：精密称定甘草酸二铵 １２．５ｍｇ，置２５ｍＬ量瓶中，加流动相溶解并稀释 至刻度；再精密量取５ｍＬ，置１ＯｒａＬ量瓶中，加 流动相稀释至刻度。 供试品溶液的配制：精密称定样品１２．５ｍｇ， 置２５ｍＬ量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度；再 精密量取５ｍＬ，置ｌＯｍＬ量瓶中，加流动相稀释 至刻度。 ２．３线性关系考察 精密称定甘草酸二铵对照品１２５ｍｇ，置ｌＯＯｍＩⅢ 一一 腚籼７＾； 定 能～一则 量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。逐级 稀释成浓度为０．６２５、０．５、０．２５、０．１２５、０．０６２５、鼢酰咽一 ０．Ｏ１２５ｍｇ・ｍＵ 的溶液，分别精密量取２０ Ｌ，注入 高效液相色谱仪，记录色谱图。以峰面积ｙ对浓度 Ｘ（ｔＬｇ・ｍＵ ）作线性回归，线性方程： Ｙ一８．４４２６×１０。Ｘ一９．９９９Ｘ１０。 ｒ＝＝＝１．００００ 结果表明，在１２．５～１２５０￣ｇ・ｍＵ 浓度范围内呈 良好的线性关系。 ２．４精密度与稳定性试验 取对照品溶液，连续进样５次，测得峰面积平 均值２１７２０８７，ＲＳＤ为０．４ 。 取对照品溶液，分别于１、４、８、１２、２４ｈ， 进样测定，测定峰面积平均值２１７３１５１，ＲＳＤ为 ０．８ ，说明甘草酸二铵在２４ｈ内稳定。 ２．５重复性试验 取样品（Ａ厂，批号为０９０９０１），照“２．２” 项下方法配制６份供试品溶液，精密量取２Ｏ Ｌ注 入高效液相色谱仪，记录色谱图，按外标法计算含 量，测得平均含量９２．７ ，ＲＳＤ为０．４ 。 ２．６回收率试验 精密称取样品（Ａ厂，批号：０９０９０１）约 ６．２５ｍｇ，置５０ｍＬ量瓶中，共９份。精密称定甘 草酸二铵对照品（Ｂ厂，批号：１００５０１，纯度： ９８．４ ９／６）约５、６．２５、７．５ｍｇ，各３份，置上述量 瓶中，加流动相适量使溶解，并稀释至刻度，摇 匀。按外标法计算回收率，结果见表１。 中国药事２０１１年第２５卷第１０期 表１ 回收率试验测定结果 惮一以现 删一果结一明果度一光 一溯人， 一一质品 一一一 一～ｌ Ｌ《 厂 一一一Ｂ 一 厂一一一Ｂ ３结论 本文用高效液相色谱法替代紫外可见分光光度 法测定甘草酸二铵原料的含量，方法专属性高，操 作简便，可以更好地控制药品质量。 参考文献： ［１］ 国家药品标准（新药转正标准）［ｓ］．第４７册：４７—８３． ［２］ 李菁，季怀萍．ＨＰＬＣ法测定甘草酸二铵肠溶胶囊的含量 ［Ｊ］．实用预防医学，２００７，１４（４）：１２２１—１２２２． ［３］ 徐柏颐．ＨＰＬＣ法测定甘草酸二铵制剂的含量［Ｊ］．江苏药 学与临床研究，２００５，１３（４）：１５－１６． 一量。一一
