44湖北农业科学 HUBEI AGRICULTURAL SCIENCES No14,2003
艾蒿提取物的生物活性研究
赵 春,李水清
(湖北农学院环境工程系,湖北荆州 434025)
摘要:采用室内毒力测定法,试验了以水、丙酮、乙醇、氯仿、乙醚为溶剂的艾蒿提取物及艾蒿精油对菜青虫的杀虫活性。结果表明,乙醇提取物和精油具有较高的生物活性。其中,乙醇提取物主要表现为触杀活性,精油主要表现为胃毒和拒食活性。关键词:艾蒿;提取物;菜青虫;生物活性
中图分类号:S48213+9 文献标识码:A
文章编号:0439-8114(2003)04-0044-03
大量使用化学农药使环境污染日益严重,而植
物源农药因其具有在环境中易降解消失、靶标专一、对人畜和非靶生物相对安全的特点而受到国内外学者的高度重视[1],并取得了一些可喜的进展[2~
[5]
4]
提取物及精油以丙酮稀释成5g#L
-1
,用微量点滴
器将试液点滴于菜青虫的前胸背片,每虫点滴1Ll,以丙酮为对照。处理后的菜青虫置于铺有吸水纸的培养皿中,每皿接虫20头,重复4次。24h后检查试虫死亡情况,计算死亡率、校正死亡率
[8]
。
王小艺等认为植物提取物直接应用要比将有效成分提纯加工后应用更有前景。关于艾蒿提取物杀虫活性的研究尚未见报道。笔者选用水、丙酮、乙醇、氯仿和乙醚为溶剂对艾蒿叶进行浸提,并制得了艾蒿精油,试验了艾蒿不同溶剂提取物和艾蒿精油对菜青虫的杀虫活性,现将试验结果报道如下。
。
2)拒食及胃毒毒力测定 采用小叶碟添加法[6]。用打孔器打制直径为2cm的圆形叶碟若干,浸取药液后晾干,置铺有吸水纸的培养皿中,每皿放入叶碟40片,接入饥饿2h的试虫20头,重复4次。设丙酮对照。24h后将残存叶片取出,调查叶碟取食情况及菜青虫死亡情况。计算死亡率、校正死亡率、取食指数及拒食率。叶片分级标准:零级(无取食痕迹)、Ñ级(零星取食)、Ò级(有明显取食缺刻)、Ó级(取食面积约占1/3)、Ô级(取食面积约占1/2)、Õ级(叶片仅留下少量残渣)。
3)熏蒸毒力测定 参照魏红梅等的三角瓶熏蒸法
[9]
1 材料与方法
111 试验材料及处理
1)试验材料及来源 艾蒿(ArtemisiaargyiLvl1etVant),采自湖北农学院周边,洗去泥土,风干取叶,粉碎,过40目筛备用。
2)试验材料的处理 称取50g艾蒿叶粉末,以300ml溶剂浸提3d,每天振荡数次,溶剂分别为水、丙酮、乙醇、氯仿和乙醚。3d后过滤,将滤液减压蒸馏浓缩得水提取物(A)、丙酮提取物(B)、乙醇提取物(C)、氯仿提取物(D)、乙醚提取物(E)。另取50g艾蒿叶粉末,水蒸汽蒸馏浓缩得精油(F)。将各溶剂提取物和精油在4e温度下保存112 供试昆虫
菜青虫(PierisrapaeL1),从大田甘蓝叶上采集低龄幼虫,经室内饲养后挑选整齐一致的5龄初期幼虫(体长12~20mm,头壳宽2mm)供试。113 试验方法
1)触杀毒力测定 采用点滴法
收稿日期:2003-02-24
基金项目:湖北农学院科研基金项目
作者简介:赵 春(1970~),女,湖北松滋人,讲师
[7]
[6]
。往250ml三角瓶中放入适量叶片,接入试虫
20头,在内口粘好8cm@1cm滤纸条,向滤纸条上滴加5g1L-1艾蒿提取物和精油的丙酮溶液2ml,迅速塞紧橡皮塞。将三角瓶置室温下,24h后调查试虫死亡情况,各处理重复3次。设丙酮对照。
4)系列浓度试验 将乙醇提取物和精油配制成1100、5100、10100、20100、50100g#L-15个浓度的丙酮溶液。试验乙醇提取物各浓度的触杀活性和精油各浓度的拒食胃毒及熏蒸活性。方法同上。
5)计算方法
死亡率/%=试虫死亡数A试虫总数@100校正死亡率/%=[处理组死亡率/%-对照组死亡率/%]A[100-对照组死亡率/%]@100
取食指数/%=[2(为害级别@各级叶碟总数)]A[总叶碟数@最高级别@参试总虫数]@100
拒食率/%=[对照组取食指数/%-处理组取。
。将各溶剂
湖北农业科学 HUBEI AGRICULTURAL SCIENCES No14,2003
食指数/%]A对照组取食指数/%@100
表1 触杀活性试验结果
45
2 结果与分析
211 触杀毒力测定结果
由表1可知,艾蒿的各种溶剂提取物及精油对菜青虫均有一定的杀虫活性,尤以艾蒿的乙醇提取物对菜青虫的杀灭作用最强,其校正死亡率达571%。乙醇提取物的系列浓度试验见表2。212 拒食及胃毒毒力试验结果
由表3可知,艾蒿精油具有较强的拒食及胃毒活性,其系列浓度试验结果见表4。
处理ABCDEF
丙酮(CK)
供试虫数/头
80808080808080
24h后死亡虫数/头
2844483628404
死亡率/%3510055100601004510035100501005100
校正死亡率
/%3115852163571421113115847137
表2 乙醇提取物系列浓度触杀活性试验结果
浓度C/g#L-1
11005100101002010050100CK回归模型相关系数LC50/g#L-1
y=217363+018323x
019797512458log(C@100)(x)
210000216990310000313010316990
试虫数/头808080808080
24h后死亡数
/头20425054620
死亡率/%25100521506215067150771500100
校正死亡率
/%2510052150621506715077150
死亡机率值(y)
/%413255510627513186514538517544
表3 拒食及胃毒活性试验结果
各级叶碟数/片
处理ABCDEF丙酮(CK)
02420283620520
Ñ122848285224
Ò60365628163244
Ó365684416820
Ô81248321232
Õ208161612440
取食指数/%0158015601440151015201330178
拒食率/%2512812143159341623313357169
死亡率/%40100601006010050100551006510010100
校正死亡率
/%3313355156551541445010061111
表4 精油系列浓度拒食和胃毒活性试验结果
浓度C/g#L-111005100101002010050100丙酮(CK)回归模型相关系数AFC50/g#L-1LC50/g#L-1
log(C@100)(x)210000216990310000313010316990
024403660460
各级叶碟数/片Ñ484458365022
Ò2018336
Ó1016634416
Ô28284201436
Õ30142061040
取食指数/%015901480141014001380179
拒食率/%2513239124481104913751190
拒食机率值(y1)/%413349417259419524419850510476
死亡率/%
22150371504215065100721507150
校正死亡率
/%1612232143371846211670127
死亡机率值(y2)/%410144415444416903513097515322
y1=315296+014353xy2=2102+019283x
01959123187
019778
13166
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表5 熏蒸活性试验结果
处理ABCDEF
丙酮(CK)
213 熏蒸毒力测定结果
由表5可知,各提取物对菜青虫的熏蒸作用较弱,相比之下精油的熏蒸作用稍强,其系列浓度熏蒸作用试验结果见表6。
/头60606060606060
供试虫数死亡虫数/头6151269180
死亡率/%1010025100201001010015100301000100
校正死亡率
/%1010025100201001010015100301000100
3 讨论
1)艾蒿提取物和精油对菜青虫的生物活性主要表现在触杀、拒食和胃毒方面。本试验未将拒食和胃毒两种作用方式分开,具体的作用方式尚需深入研究。
表6 艾蒿精油熏蒸活性试验结果
浓度C/g#L-111005100101002010050100丙酮(CK)回归模型相关系数LC50/g#L-1
y=3104+014928x
01987392.11
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log(C@100)(x)
210000216990310000313010316990
试虫数/头606060606060
死亡虫数/头12171925282
死亡率/%20100281333116741167461673133
校正死亡率
/%171242518629132391183
死亡机率值(y)/%41058741353145544173418693
2)本试验只测定了艾蒿提取物和精油对菜青虫的杀虫活性,结果表明,乙醇提取物和精油的杀虫活性较高。如选择更多的试虫来测定艾蒿提取物的杀虫活性,有可能找到对艾蒿提取物更敏感的害虫。另外,在植物材料上只选用了艾蒿叶,对茎、根未作研究。
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TheinsecticidalactivitiesofArtemisiaargyiextractsonPierisrapae
ZHAOChun,LIShui-qing
(DepartmentofEnvironmentalEngineering,HubeiAgriculturalCollege,Jingzhou 434025,China)
Abstract:Theinsecticidalactivitiesofextractsofwater,acetone,ethanol,chloroform,etherandessentialoilfromArtemisiaargyileaveswerestudied1Theresultsshowedtheethanolextractandtheessentialoilhadhigherinsecticidalactivities1Themainactivityoftheformerwascontacttoxicity,butthelatterwasantifeedingandstomachtoxicity1
Keywords:Artemisiaargyi;extract;Pierisrapae;insecticidalactivities
