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艾蒿提取物中激素分析及其在有机水稻上的应用效果

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维普资讯 http://www.cqvip.com 安徽农业科学,Journal ofAnhui Agri.Sci.2008,36(11):4570—4572 责任编辑刘月娟责任校对马君叶 艾蒿提取物中激素分析及其在有机水稻上的应用效果 虞梅,高桂枝,苑姗姗,韩锋,姚磊(南京信息_丁程大学环境科学与工程系,江苏南京21oo44) 摘要[目的】分析艾蒿提取物的特点。[方法】以艾蒿为原料,对艾蒿的石油醚提取物中所含植物激素、总黄酮、游离氨基酸、蛋白质以 及微量元素的含量进行了定量分析,并将该提取物应用于有机水稻生产。[结果]3ooml 1%艾蒿石油醚提取物中,含有GA,286.1 g/ml, 3-IAA 121 Ixg/ml,ABA 29.5 xIg/ml,总黄酮270.72 Ixg/ml,游离氨基酸130.3 g/ml,蛋白质1 012.06 g/ml。在有机水稻秧苗期、孕穗期、 始穗期各喷施100mg/L该提取物1次,可以增产15.6%,总营养指标提高10.34%,对水稻螟虫、稻飞虱无明显作用,有机水稻糙米中 无GA3残留。【结论1艾蒿含有多种促生成分,含量比较均衡 关键词艾蒿提取物;植物激素;微量元素;产量;营养 中图分类号¥511 文献标识码A 文章编号0517—6611(2008)11-04570—03 Analysis of Piant Hormone from Artemisia and its Appiication in Organic Rice Production YUMei etal(Department ofEnvironmental Science andEngineering,NanjingInformationEngineeringCollege,Nanjing,Jiangsu 210044) Abstract [Objectivel The characteristics of the extraction from Artemisia were analyzed.『Method1 A quantitative analysis on plant hormone, totoJ flavone,free amino acidsmia,protein and trace element was made.The extraction was applied to the production of organic rice.[Result1 The extractionfromA rtemisiain petroleum ether at 1%by volume of300ml contained 286.1 ml GA3,121 g/ml 3-IAA,29.5 g/ml ABA,270.72 xIg/ml total lfavone,130.3 Ixg/ml free amino acids,1 012.06 Ixg/ml protein.Spraying the extraction rfom A rtemisia in petroleum ether at 100 mg/L on leaf bade three times inseedling stage,booting stage and first heading time of organic rice,the yield increased 21.43%,total nutritive index increased 10.34%.The extraction didn’t have any noticeable effect on rice stem borer and rice plant hopper.There was no residue of GA1 in brown rice at harvest time.[Conclusion1 There iS lots of growth-promoting composition in A rtemisia.Its content iS balanced relatively Keywords ExtractionfromA rtemis 0;P1nat hormone;Trace elements;Yield;Nutrition 艾蒿(Anemisi。argyi Lem.et Vent)为菊科蒿属多年生草 色谱条件:色谱柱Hypersil ODS Cl8(250 minx4.6 mm,5 本植物,在我国分布广泛,是一种廉价的杀虫植物…。已有研 m);流动相为甲醇:水:0.6%乙酸50:5:45;流速1.0 ml/min; 究表明,艾蒿的不同溶剂提取物对蚜虫、朱砂叶螨、鳞翅目 柱温室温;进样量20 tzl;检测波长254 nm。标准曲线的制作 幼虫等都有一定的杀虫作用 ,对夜蛾幼虫也有一定防治 部分参照GB15955.1995方法。准确称取GA 、34AA、ABA、 效果嗍。笔者以艾蒿为原料,对艾蒿的石油醚提取物中所含 标样0.079 2 g于100 ml棕色容量瓶中,用甲醇溶液(色谱 植物激素、总黄酮、游离氨基酸、蛋白质以及锰、铜、铁、铅等 纯,相对密度为0.792)溶解并定容,将3种试剂都配制成 微量元素的含量进行了定量分析,并研究了该提取物1%水 1 000 g/ml溶液,然后分别将GA 、3-IAA、ABA 3种试剂配 剂应用于有机水稻的效果。 制成系列浓度梯度的标准混合溶液,待测。 1材料与方法 将上述配制好的系列浓度梯度的标准混合溶液,按所 1.1样品的制备取鲜艾蒿粉碎石油醚浸提浓缩得固体。 选择的色谱条件进样20 l,获得不同质量浓度时GA 、3一 称取固体3 g,制成1%水液,加入60 ml正己烷,充分振荡, IAA、ABA的峰面积。将制备好的实际样品从低浓度到高浓 分出有机层,水层重复上述操作,直至有机层透明澄清为 度依次进行测定,根据测定结果换算成原样中各植物激素 止,分离有机层和水层。将水层倒入分液漏斗中,加入等体 的含量。 积的三氯甲烷萃取,重复上述操作,直至下层有机层无绿色 1.3.2总黄酮含量的测定。分别取3 m1有机层和水层试样 为止,得到150 ml水层试样溶液。合并有机层,用旋转蒸发 溶液于2只10 ml刻度试管中,分别加入无水乙醇2 ml和 仪浓缩至干,再用色谱纯甲醇溶解,得到150 ml有机层试 5%NaNO 溶液0.3 ml,摇匀,放置6 min,再分别加入4% 样溶液。 NaOH溶液4 ml,用蒸馏水稀释至10 ml,放置15~20 min,以 1.2有机水稻药效试验试验地点设在南京思源有机农 3 ml蒸馏水代替样品做同样处理作为空白,用1 em比色皿 场水稻田。试验设2个处理:①清水对照;②喷洒100mg/ml 在波长510 nm下测定吸光度。 艾蒿提取物。每个试验小区面积1 333 m2 6次重复,分别在 1.3.3游离氨基酸含量的测定。采用茚三酮法[61。分别取1 有机水稻秧苗期、孕穗期、始穗期喷洒,每小区定5个点,考 ml有机层和水层试样溶液,稀释10倍,取1 ml稀释液于20 察苗情动态、成穗和产量以及病虫害发生情况。 ml刻度试管中(重复2次),依次加入无氨蒸馏水1 ml、水合 1.3测定指标及方法 茚三酮3 ml、0.1%抗坏血酸0.1 ml,混匀,置沸水浴中加热 1.3.1植物激素含量的测定[51。采用外标峰面积法。由于植 15 min,取出后用冷水迅速冷却10~20 min,再用60%乙醇 物激素主要存在于有机层中,因此,只对有机层进行植物激 定容至20 ml,混匀,以1 ml蒸馏水作空白试验,用1 em比 素含量的测定。分别取1、5、10 ml有机层试样溶液,用0.45 色皿在570 nm波长下分别测定吸光度。 ¨m孔径的生物滤膜过滤3次,用甲醇定容,待测。 1.3.4蛋白质含量的测定。采用考马斯亮蓝G-250法问。分 别取1 ml有机层和水层试样溶液,各加5 ml考马斯亮蓝试 基金项目 江苏省高校高新技术产业发展基金(No.JH03036);南京信 息工程大学基金(Y616 o 剂(5倍稀释液),盖塞摇匀,2 min后用1 cm比色皿在595 作者简介虞梅(1983一),女,江苏南京人,硕士研究生,研究方向:天 nm波长处分别测定吸光度。 然产物。 1.3.5有机稻米中GA 残留的测定。称取样品,在研钵中研 收稿日期2008.12.12 维普资讯 http://www.cqvip.com 维普资讯 http://www.cqvip.com 安徽农业科学 2008生 艾蒿提取物在有机水稻使用后,无GA。残留污染。 出口创汇方面前景较好。 表5有机水稻糙米中GA 含量统计结果 参考文献 Table 5 The statistics of GAs content in organic brown rice [1]张锐,晁开,刘锦霞.利用植物次生代谢产物开发生物农药【J1.甘肃 理 GA 浓度 平巧否虿 科学学报,1998,10(3):82—84. Treatment GA3 concentration//mg/L AverageGA3con tent inf1ee,、,//[2】黄天芳.治虫植物与植物农药【Jl_生物学通报,1997,32(8):19. (CK)48.792 0.488 ② 35.363 0.474 [3】涂晓云,廖满英.植物农药与植物保护嘲,江西植保,2002,25(2): 61—62. 3结论 ・ [4】张玲春,李国清,王科峰.艾蒿粗提物和几种淋洗物对甜菜夜蛾幼虫 的作用『J1.农药,2003,42(5):42—44. 艾蒿中含有多种促生成分,含量比较均衡,在生产中能 [5】谢君,张义正.植物内源激素的反相高效液相色谱法测定【J1.分析测 有效利用多种成分的共同作用,从而达到提高产量和质量 试学报,2001,20(1):60—62. 效果,避免单一激素的残留污染,在有效植物生育、促 【6J王晶英,敖红,张杰,等.植物生理生化实验技术与原理『‘Ⅵ1.哈尔滨: 东北林业大学出版社,2003:2-24. 进作物抗逆性改善等方面具有一定的潜力,对调节作物生 [7J谢君.高效液相色谱测定多种植物内源激素方法研究【J1_四川农业 理生化代谢有一定作用。艾蒿原料资源广泛且丰富,可满足 大学学报,1997(15):297—299. 生产所需。在中国人口不断增加、土地资源不断减少和环境 [8J HEDDEN P.Modern methods for the quantitative analysis of plant hormones[J].Plant Mol Biol,1993,44:7—29. 逐步恶化的情况下,发展农业要解决的主要矛盾是既要提 [9】HORMANS S,VANONCKELEN H A,RuEDELsHEIMP.Determina- 高单位面积产量,又要保护环境。艾蒿提取物具备增产、环 tion of plant hormones by high performance liquid chromatography 【J1.J Zxpt Bot,1984,35:1832. 保的功能,符合农药发展方向和需求,在有机、绿色农业和 (上接第4558页) 2.4不同处理对桔梗总皂甙含量的影响 由表3可知,多 分枝数减少,摘蕾打顶处理对桔梗地上部生殖生长的抑制 效唑对桔梗总皂甙含量的影响最大。喷后,多效唑能明显提 作用虽不及多效唑处理,但优于对照组。 高桔梗总皂甙含量,说明多效唑可以抑制桔梗地上部生殖 2.2不同处理对桔梗地下根性状的影响由表2可知,不 生长,促进地下根营养生长的作用优于摘蕾打顶处理。 同处理桔梗地下部分的根长、根径、分权数间存在较大的差 3结论与讨论 异。其中,多效唑对桔梗地下部分影响最大,主要表现在桔 (1)试验表明,多效唑处理对桔梗地上部的生殖生长有 梗根长增长、根径增粗、分权数减少,说明多效唑促进地下 明显的抑制作用,能有效协调桔梗地上部生殖生长与地下 根生长发育的作用优于摘蕾打顶。 部营养生长的关系,具体表现为桔梗株高变矮,分枝减少, 表2不同处理对桔梗地下根性状的影响 植株健壮抗倒伏,同时促进桔梗地下根的生长发育,从而明 Table2 Effects ofdiferent treatments on traist ofroot of 显提高桔梗的产量和品质。 ————————— ———————一—— 处理 ———————竺:—1日]竺!7———!竺竺 :———————— 丁 : }— ——————————7一一  1帚 ■——一 工h施用量(2)施用多效唑控制桔梗旺长时,一 一 应掌握适宜的施用期 ’ 垃 R tl00 n e g th Rootdi很  mea ter Br,,秘双 anches 4"H 月也川里’, 以便一挥多效唑的抑制作一和增产效果。一般,/3Z. 件,夕狱 口 1 巾 fF /)TI r¨ 百J 狱木。一 双’ 应在盛花期施用多效唑,施用量为300 g/hm:。若施用期过早 9 .5多效唑Pacl0butraz0l 23.9  7 3盘。 。.43 1 67 :. 。。 戥1二L睨'胞川里 /J、戮 八,,, 云垣臌^l对桔 J伯便,土俎,土 H 1 巾lJ 鉴 : : ! : 过早或过晚,过轻或过重,起不到应有的抑制作用和增产 2.3不同处理对桔梗产量的影响 由表3可知,喷施多效 效果。 唑后,通过协调营养生长和生殖生长的关系,抑制了生殖生 参考文献 长,促进了根部生长,明显增加桔梗产量,增产百分率达47.84%; [1]高学敏.中药学[M】.北京:中国中医药出版社,2002:423—424. 摘蕾打顶对桔梗亦有增产效果,但增产效果不明显。 笛 嚣 妻 ; ; 发新技术 北京:中 表3不同处理对桔梗产量、总皂甙含量的影响 『31陕两省陕南中药产业发展领导小组办公室,陕西省科学院.陕西中 Table 3 Effects of different treatments on yield and t0tal 药材GAP栽培技术[M] E京:科学出版社,2004:179. saponins of Platycodon grandilforus f41裴润梅,李杨瑞,陈念平.多效唑对花生种子萌发及植株生长的影响 『J1.广西农业生物科学,2004(2):104—107. 『51李绍伟,任丽,李军华,等.多效唑对花生的抑制作用和增产效果研 究『J1.陕西农业科学,2005(6):45—46. f61芦金清,刘合刚,潘宏林,等.两种不同方法测定桔梗总皂甙含量的 比较[J1.湖北中医学院学报,2000(2):35—36. GB/T7714—2005 连续出版物中的析出文献的著录格式 析出文献主要责任者.析出文献题名『文献类型标志].连续出版物题名:其他题名信息,年,卷(期):页码[引用13期].获取和访问路径. 示例: 『11李晓东,张,叶瑾琳.气候学研究的若干理论问题【Jl_北京大学学报:自然科学版,1999,35(1):101-106. 『21傅刚,赵承,李佳路.大风沙过后的思考[N/OL].北京青年报,2000—04—12(14)[2005—07—121.http:/www.biyouth.corn.cn/Bqb/ 20000412/GB/4216%5EDO412B1401.htm. 『31莫少强.数字式中文全文文献格式的设计与研究[J/OL].情报学报,1999,18(4):1-612001-07—08].http:,/periodica1.wanfangdata.eom. cnlperiodicallqbxblqbxb991qbxb99041990407.htm. [41KANAMORIH.Shakingwithout quaking[J].Science,1998,279(5359):2063—2064. [51 CAPLANP.Catal0gingintemet resonreesⅢ.ThePublicAccessComputerSystemsReview,1993,4(2):61—66. 

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