郭志燕，等：幽门螺杆菌ＵｒｅＢ亚单位重组蛋白免疫剂量、途径的研究 ３０１ ｎｏｇｅｎｉｃｉｔｙ［Ｊ］．Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ，１９９０，２４（４）：２５３－２６０． 免疫效果的影响［Ｊ］．细胞与分子免疫学杂志，２０１１，２７（１Ｏ）， ［１４］郝彦玲，李平，何彦平，等．ＨＩＶ一１ ＤＮＡ疫苗的免疫效价及其 １０８６．１０８９． 与免疫剂量的相关性［Ｊ］．中国生物制品学杂志，２０１２，２５ ［１７］韩小艳，张彦霞，张存辉，等．免疫途径和佐剂对蛋白疫苗免 （８）：９４８－９５１． 疫效果的影响［Ｊ］．中国病原生物学杂志，２０１４，９（８）， ［１５］李英信，李红花，李芳芳，等．不同免疫途径对制备抗血清影 ６９１—６９８． 响的探讨［Ｊ］．现代预防医学，２０１０，３７（６）：１１０６—１１０７． ［１８］楚琰，吴兴安．ＤＮＡ疫苗及其免疫途径的研究进展［Ｊ］．中国 ［１６］温婵，高志云，蓝佳明，等．免疫途径和佐剂对ＣＶＢ３ＶＰ１蛋白 医药生物技术，２０１０，５（５）：２８５３８８． Ｓｔｕｄｙ ｏｎ Ｉｍｍｕｎｅ Ｄｏｓｅ ａｎｄ Ｉｍｍｕｎｅ Ａｐｐｒｏａｃｈ ｏｆ Ｈｅｆｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｅｙｌｏ￣ ＵｒｅＢ Ｓｕｂｕｎｉｔ Ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ Ｐｒｏｔｅｉｎ ＧＵＯ Ｚｈｉ—ｙａｎ，ＷＥＮＧ Ｌｉａｎｇ ，ＰＥＮＧ Ｃｈａｏ，ＬＩ Ｙａ—ｓｅｎ，ＹＡＮ Ｄｏｎｇ—ｍｉｎｇ，ＦＥＮＧ Ｄｉｎｇ—ｌｏｎｇ，ＹＡＯ Ｇｕｏ—ｈｕａ，ＺＯＵ Ｘｕｅ （Ｗｕｈｕ Ｋａｎｇ Ｗｅｉｓｈｅｎｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏ．，ＬＴＤ，Ｗｕｈｕ ２４１０００，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ Ｔｏ ｐｒｅｐａｒｅ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｅｒｕｍ ｏｆ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｕｒｅａｓｅＢ ｓｕｂｕｎｉｔ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ｔｏ ｄｉｓｃｕｓｓ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｅ ｅｆｆｅｃｔ ｉｎ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｏｓｅｓ ａｎｄ ｂｙ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｒｏｕｔｅｓ，ｔｈｅ ｈｉｇｈｌｙ ｐｕｒｉｆｉｅｄ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｕｒｅａｓｅＢ ｓｕｂｕｎｉｔ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ ｗａｓ ｕｓｅｄ ｔＯ ｉｍｍｕｎｅ ｒａｂｂｉｔ ｔｈｒｏｕｇｈ ｔｈｒｅｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｄｏｓｅｓ ａｎｄ ｂｙ ｔｈｒｅｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｒｏｕｔｅｓ．Ｔｈｅ ａｎｔｉｓｅｒｕｍ ｔｉｔｅｒｓ ｗｅｒｅ ｅｖａｌｕａｔｅｄ ｂｙ ｄｏｕｂｌｅ ｉｍｍｕｎｏｄ— ｉｆｕｓｉｏｎ ｉｎ ａｇａｒ ｇｅ１．Ｔｈｅ ｄｏｓｅ ｏｆ １ ｍｓ／ｍＬ ｃｏｕｌｄ ｐｒｅｓｅｎｔ ｂｅｔｔｅｒ ｅｆｆｅｃｔ ｔｈａｎ ｔｈｅ ｄｏｓｅ ｏｆ ０．５ｍｓ／ｍＬ ｉｎ ｔｈｉｓ ｒｅｓｅａｒｃｈ，ｗｈｉｌｅ ｔｈｅ ｄｏｓｅ ｏｆ ５ ｍｓ／ｍＬ ｃａｕｓｅｄ ｉｍｍｕｎｅ ｔｏｌｅｒａｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｒａｂｂｉｔｓ．Ｔｈｅ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｉｎｔｒａｄｅｒｍａｌ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｒ ｌｅｖｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｉｎｔｒｍｕｓｃｕｌａｒ ｏｒ ｔｈｅ ｉｎｔｒａｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ ａｄｍｉｎｉｓｔｒａｔｉｏｎ．Ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｉｍｍｕｎｅ ｓｅｎｌｍ ｏｆ ｔｈｅ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｕｒｅａｓｅＢ ｓｕｂｕｎｉｔ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ ａｎｄ ｆｕｒｔｈｅｒ ｅｘｐｏｌｒｅｄ ｔｈｅ ａｎｔｉｓｅｒｕｍ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｔｈｅ ｏｐｔｉｍａｌ ｉｍｍｕｎｅ ｄｏｓｅ ａｎｄ ｉｍｍｕｎｅ ｒｏｕｔｅ，ｗｈｉｃｈ ｃｏｕｌｄ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ｆｏｕｎｄａｔｉｏｎ ｆｏｒ ｔｈｅ ｒｅｓｅａｒｃｈ ａｎｄ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ ｕｒｅａｓｅＢ ｓｕｂｕｎｉｔ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｖａｃｃｉｎｅ ｉｎ ｔｈｅ ｆｕｔｕｒｅ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ，ＵｒｅＢ ｓｕｂｕｎｉｔ ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ｐｒｏｔｅｉｎ，Ｉｍｍｕｎｅ ｄｏｓｅ，Ｉｍｍｕｎｅ ｒｏｕｔｅ，Ｉｍｍｕｎｅ ｓｅｒｕｍ ・信 息・ ２０１５—４６免疫诱导生物技术制备广谱抗菌素的方法 本发明公开了一种免疫诱导生物技术制备广谱抗菌素的方 法。本发明免疫诱导生物技术合成制备广谱抗菌素的方法利用了家蚕具有超强的免疫蛋白合成能力，通过天然五龄蚕中 部丝腺高量合成丝胶蛋白抗菌肽，在后部丝腺合成丝素蛋白抗菌肽，以生物高活性剂对丝蛋白基因进行，以固相或液 相生物技术合成、扩增，制得广谱抗菌素。本发明方法生物技术合成路线简便易学，生产成本低廉，产率可控度高，防病害 能力高达８０％～９５％以上，且成果易转化、便于产业化生产；采用本发明方法制备得到的抗菌肽在农用时拌土，栽前浸根， 对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌或枯草杆菌、青枯病等病原菌、枯萎镰刀菌引起的感染，具有较强的抗菌作用及高效、广谱 的抗菌优势。 ２０１５—４７ 以连接后筛选为基础的定向基因重组技术发明涉及生物技术领域一种新的基因重组技术。在传统的非 定向基因重组技术基础上，定向重组载体和反向连接的定向目的基因之间形成的新的酶切位点，而正向连接的目的基因和 定向重组载体之间不能形成相应的酶切位点。利用相应的性核酸内切酶对错误连接形成的酶切位点进行处理，使反 向连接的目的基因难以进入宿主细胞或者进入细胞后难以克隆扩增，从而达到定向克隆的目的。该技术是在传统技术基 础上进行的改造，具有技术简单，周期短，费用低，操作简单等优点，适合实验室表达研究和大规模的基因表达操作。 ２０１５—４８一种用生物技术从烟叶中提取尼古丁的方法本发明涉及一种用生物技术从烟叶中提取尼古丁的方法， 其特征在于：用生物技术从烟叶中提取尼古丁的方法具体步骤如下：（１）检测：先对待加工的烟叶进行尼古丁含量检测； （２）制备生物液；（３）兑制浸泡液；（４）浸泡：当浸泡后的烟叶中尼古丁含量降至优质烟叶中尼古丁含量标准时，将浸泡液中 的烟叶捞出、烘干。分离后的发酵玉米秸秆渣粉碎，用作生产饲料或生物肥料。本发明可使劣质的烟叶变为优质烟叶用于 生产优质香烟。经提取后的尼古丁可作为生产医药和生物农药原料。生产生物液的残渣可用于加工制成饲料和生物肥 料。整个生产过程中无垃圾产生，不污染环境，具有：工艺简单、投资少、见效快、经济效益显著的特点。
