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氨基氮含量测定法

来源:华佗小知识
1. 目的:对抗生素的中间体进行氨基氮的测定来进行生产的控制。

2. 范围:车间化验室

3. 责任:车间QC化验室化验员与技术人员

4. 化验原理:含有NH4+的化合物[(NH4)2 SO4]与甲醛作用,以

等量关系产生H2SO4,以标准碱液滴定能换算出(NH4)2 SO4

含量。5. 程序:

5.1 样品测试:吸取发酵过滤液2ml于100ml三角烧瓶中,加入10ml蒸馏水,然后加入甲基红指示剂三滴,0.15mol/L硫酸试剂一滴,以0.02mol/L氢氧化钠标准溶液滴至红色消失,而呈棕黄色,再加入18%中性甲醛试剂2ml及酚酞指示剂4-5滴,后用0.02mol/L氢氧化钠标准溶液滴至呈红色终点。5.2 氨基氮的计算:

mol/L×V×0.014

氨基氮mg/100ml=———————— ×100% 2

公式中:V:指滴定所用的氢氧化钠标准溶液体积(毫升) mol/L:指氢氧化钠标准溶液浓度

6. 注意事项:

6.1 滴定所用的甲醛每天使用前调节至中性。6.2 终点观察最好用白色背景。

6.3 发酵后期如果滤液颜色太深,可适量多加一些水使终点清晰。7. 试剂配制。

7.1 18%甲醛试剂:用500ml浓甲醛加蒸馏水稀释至1000ml即可,若有黄色沉淀,应过滤后使用,使用前用酚酞指示剂滴定至中性(本品应易发生聚合作用而结块沉淀,故不应存放于冷冻环境)。

7.2 0.02mol/L氢氧化钠,由质检科配制。

7.3 甲基红指示剂:取甲基红0.1克加100ml酒精混合均匀即可(变色范围

为PH4.2-6.2,由红色至黄色)。

7.4 酚酞指示剂:取酚酞1g加100酒精,混合溶解即可(变色范围PH8.3-10.0,由无色至红色)。

7.5 0.15mol/L硫酸溶液:取4.2ml,C.P浓硫酸缓缓注入加蒸馏水的试剂瓶中,定量至500ml,即可。

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