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脑脊液及尿蛋白定量方法的比较

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脑脊液及尿蛋白定量方法的比较

摘要:目的:探讨磺基水杨酸-硫酸钠浊度法和邻苯三酚红钼络合显色法两种脑脊液及尿蛋白定量方法的效果。方法:以100份脑脊液标本和100份尿液标本为研究对象:每一份标本分别用磺基水杨酸-硫酸钠浊度法和邻苯三酚红钼络合显色法进行蛋白定量测定:分析两种检测方法的灵敏度~稳定性。结果:两种尿蛋白检查均具有一定相关性和重复性:差异无统计学意义。结论:邻苯三酚红钼络合显色法的检测结果与磺基水杨酸-硫酸钠浊度法的检测结果差异无统计学意义:但邻苯三酚红钼络合显色法的灵敏度高:试剂具有较好稳定性:方便操作。

关键词:脑脊液; 尿蛋白; 定量测定; 磺基水杨酸-硫酸钠浊度法; 邻苯三酚红钼络合显色法

【中图分类号】r446.14【文献标识码】a【文章编号】1674-7526(2012)08-0086-01 1资料与方法

1.1一般资料:100份脑脊液标本来自本院神经内科住院患者,其中男57例,女43例,年龄23~76岁,平均56.7岁;100份尿标本来自门诊及住院患者,其中男52例,女48例,年龄22~78岁,为随机尿,2h内送检。

1.2试剂与仪器:络合法的试剂由保定长城有限公司提供,浊度法试剂的配制参考 全国临床检验操作规程,试剂i用87.5g硫酸钠加去离子水溶解至1l,试剂i用150.0g5-磺基水杨酸加去离子

水溶解至1l备用~络合法的仪器为o-1ympus 2700自动生化分析仪。

1.3检测方法:将100份脑脊液标本和100份尿液标本分别用浊度法和络合法进行蛋白定量测定[1],严格按照 全国临床检验操作规程 的操作步骤及试剂盒提供的步骤进行操作,分别进行线形试验、重复性试验、回收试验及相关性试验。

1.3.1线形试验:分别选取10份不同浓度的脑脊液标本及尿液标本,用两种方法进行测定,观察两种测定方法的线性范围。 1.3.2重复性试验:选取一份总蛋白量为50g/l的尿液或脑脊液标本作为标准液,用叠氮钠生理盐水稀释成0.5g/l和1.5g/l两种浓度,分别用两种方法进行检测,测定两种方法的重复性。 1.3.3回收试验:将已知蛋白定量值的尿液和脑脊液各5份,按照9=1的比例分别加入重复性试验中的1.5g/l标准液和双蒸水中,用两种方法分别对10份标本测定3次,统计其平均回收率。 1.4统计学方法:将100份脑脊液标本和100份尿液标本分别用两种方法进行测定,计算两种方法的每份结果之间的相关系数和回归方程,进行配对:检验。 2结果

2.1线形试验:两种方法的线性范围分别为:络合法0.05~2.50g/l,浊度法为0.1~16.0g/l,浊度法的线性范围较大,但是低于0.1g/l的范围无法进行测定~络合法的灵敏度较高。 2.2重复性试验:见表1。经统计学分析,两种方法的重复性差

异无统计学意义(p>0.05),但络合法的重复性高于浊度法 3讨论

浊度法和络合法是蛋白定量测定的两种常用方法~脑脊液中蛋白含量反映的是血脑屏障对血浆蛋白的通透性,尿液中蛋白定量反映的是肾小球对蛋白质的滤过率,可用来评价肾脏功能~浊度法是测定脑脊液及尿蛋白定量使用较为普遍的方法,具有成本低、灵敏度高的优点[2],并且操作不需要大型仪器,被广泛应用于小型医院~由于仅有灵敏度而无特异度,导致假阳性的发生率较高,并且检测需要大量的标本,约600ml以上,脑脊液属较难采取的标本,标本量大不利于临床应用;络合法标本用量少,需要5卜l左右,并且可用于全自动生化分析仪检测,操作简便,灵敏度~精密度及可重复性等检验质量指标均有待临床验证[3],弥补了浊度法的缺点,因此近年来在临床应用较多~作者通过应用两种方法分别对100份脑脊液和尿液进行蛋白定量测定,发现两种检测方法相关性良好,均具有很好的重复性和较高灵敏度,差异无统计学意义~但是结果显示,络合法的灵敏度~重复性~回收率均高于浊度法,并且络合法可用全自动生化仪检测,操作简便,利于临床广泛使用,故络合法是一种很好的蛋白定量检测方法~在实际应用中还应注意严格按照试剂说明书进行操作,加强对检测标本的质量控制,减少干扰因素对检测结果的影响;同时定期对仪器进行使用状态的检测,使用质量较好的试剂,减少仪器和试剂因素对结果的影响,加强实验室质量控制,提高检测质量,提供准确且精确的检验结果,

以更好地为临床服务。 参考文献

[1]任晓红.两种脑脊液及尿蛋白定量方法的比较[j].中国中医药现代远程教育,2010,8(8):91

[2]张会芬.改良的磺基水杨酸-硫酸钠比浊法测定脑脊液蛋白的实验室评价[j].检验医学,2011,26(5):343-345

[3]席金瓯,王维鹏.邻苯三酚红钼络合法测定脑脊液蛋白效果评价[j].实用医学杂志,2008,24(16):27-28

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