多肽类物质分析检测方法的研究进展

Vol.34No.11Nov.2009

·6·

ShanghaiChemicalIndustry

摘要在蛋白质组学研究中，多肽类物质的分析测定是非常重要和活跃的研究领域，从中可以发现和利用其重要的生物活性组分，是目前新药物研发的关键。近年来，随着新仪器和检测技术的开发，国内外在研究多肽的分析检测方法上取得了较大进展。就目前国内外多肽类物质分析测定的最新方法和进展情况加以概述。

关键词多肽分析高效液相色谱毛细管电泳质谱

中图分类号TQ4.7

多肽是一种由56个天然氨基酸以不同组成和

排列方式构成的聚合物，当氨基酸残基在20个以下时称为寡肽，超过20个氨基酸残基则称为多肽，当聚合的氨基酸多于50个时，常称为蛋白质。通常在不严格区分的情况下，寡肽和多肽都称为多肽。

多肽广泛存在于自然界中，并对人体有着重要的生理作用。近年来，随着生命科学研究的蓬勃发展，有关多肽的研究进展也日新月异。多肽已在免疫功能、信息传导、细胞分泌、前体信号、疾病发生及治疗等方面显示出了神奇的研究应用价值。在对多肽的结构与功能研究过程中，必然会涉及多肽的测定。目前，多肽的测定主要包括结构的测定（即测定多肽的氨基酸组成、含量）及多肽测序（即组成多肽的氨。本文就目前国内外多肽类物质分基酸的连接次序）析测定的最新方法和进展情况加以概述。

技术和检测仪器不断涌现，对于多肽，无论是在其结

目前，高构测定还是测序方面均取得了巨大的进展。

效液相色谱（HPLC）、毛细管电泳（CE）、质谱（MS）及其联用技术已成为多肽测定的主要手段，并正得到越来越广泛的应用。2.1高效液相色谱（HPLC）及其联用技术

HPLC最早出现于20世纪60年代，因其具有分离效率高、分离速度快等优点，一经面世便迅速解决了当时大量不适于利用气相色谱（GC）进行分析

分析。特别是自70年代中期以后，电的物质的分离、

子和计算机技术应用于液相色谱仪，大大提高了仪

器的自动化水平和分析精度，加速了HPLC的发展。近年来随着生物工程和生命科学的迅速发展，为HPLC分析技术提出了更多、更新的分离、分析要特别是微柱液求，大大促进了这一技术的迅速发展。相色谱、液相色谱的出现和电喷雾质谱与液相

色谱的联用，为生物大分子（如蛋白质、多肽等）的分析鉴定提供了强有力的工具。

吕艳等[2]采用异硫氰酸苯酯柱前衍生、反相高效液相色谱、外标法定量的方法分析了多肽中18种氨基酸组成，并以各种氨基酸的峰面积为纵坐标，氨基酸标液的质量浓度（mg/L）为横坐标，进行线性回归。除了半胱氨酸外，其他氨基酸R2值均大于0.99，从而建立了一种分析多肽组成的定量测定方法。王贤纯等[3]采用反相高效液相色谱与串联质谱（RPLC-MS/MS）对化学合成的九肽（Tyr-Val-Asn-Val-Asn-Met-Gly-Leu-Lys）产物进行检测，经串联质谱鉴定表明，其主要成分为目标九肽，副产物包括两种九肽衍生物：一种为其中的酪氨酸氧化生成，另一种为其

1多肽测定的传统方法

传统的多肽结构测定方法是采用柱前或柱后衍生的氨基酸分析方法测定多肽水解后得到的各种氨

基酸及其含量，以确定其组成；同时，还可根据氨基酸的数目计算多肽含量。

经典的多肽测序方法有N-末端序列测定的化学方法（Edman降解法）和C-末端酶解方法两种[1]，分别是利用不同的物质与多肽的N-端氨基或C-端羧基反应生成相应的氨基酸。并将这一反应重复循环，测定多肽中的氨基酸排列顺序。

2多肽测定方法的新进展

随着科学技术发展的日新月异，各种新的测试

第一作者简介：杜晓宁女

1955年生

教授级高工

从事同位素化学与仪器分析

第11期

杜晓宁等：多肽类物质分析检测方法的研究进展

·7·

中的蛋氨酸氧化生成。四川大学杨寒朔等[4]运用

nano-UPLC-TOF-MS方法首次对斑马鱼早期胚胎中小分子多肽通量进行了检测，证实斑马鱼胚胎中确实存在着小分子多肽，大部分多肽的相对分子质量集中在800～1400范围内，估计为10氨基酸左右的多肽，为进一步鉴定和研究斑马鱼胚胎中的小分子多肽奠定了理论和方法学基础。在国外，EsquivelB等[5]采用HPLC法在CrownpakCR（+）柱上对几种二肽及三肽对映异构体进行了成功分离及分析检测。Baggerman用液相色谱－飞行时间质谱鉴定了果蝇中枢神经系统中的28个小分子多肽，其

l1个从未被纯化出来，8个为第一次发现的神经中，肽[6]，并证明一种多肽NVGTIARDFQ-LPIPNamide在中枢神经系统各发育阶段的表达情况[7]。Krusa等[8]用RPLC对大豆蛋白进行了纯化和定量分析，Chertov等[9]对T－淋巴细胞趋化因子进行了RPLC纯化分析。Wen等[10]报道了促黄体生成激素释放激素（LHRH）在负鼠5个不同部位、新鲜和冷冻的肠粘膜匀浆内的代谢情况，代谢物经RP-HPLC分析，从色谱图上可观察到LHRH色谱峰逐渐降低，同时伴随着碎片峰逐渐增大，从而推断不同部位肠粘膜匀浆对其代谢差异。2.2毛细管电泳（CE）及其联用技术

毛细管电泳是以高压电场为驱动力，以毛细管为分离通道，依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。根据其分离模式的不同，毛细管电泳又可细分为毛细管区带电泳（CZE）、毛细管凝胶电泳（CGE）、阵列毛细管电泳（CAE）、芯片式毛细管电泳（CCE）等多种类型。由于毛细管电泳溶质区带体积小，对于检测器的灵敏度要求很高，所以通常采用柱上检测。用于毛细管电泳的检测器有紫外、荧光、电化学、质谱、拉曼光谱检测器等。目前已成功实现商品化的毛细管联用检测器有紫外、荧光和质谱检测器。

林嵘等[11]应用毛细管区带电泳，对反相C18制备、分离生物活性酪蛋白磷酸肽的结果进行了分析，以检测HPLC制备分离的效果，并对HPLC的条件进行了进一步调整。姚洪军等[12]提取了经DOC-PAGE分离的豌豆光系统（I一种由大约11~14个多肽组成的多亚复合物），采用毛细管凝胶电泳方法，以1%的葡聚糖为毛细管凝胶线性高分子筛分基

0.5%乙基纤维素，0.1%SDS为磷酸盐缓冲液添质，

加剂，在35min内进行了较好地分离。所得的色谱

图基线平稳、分离度较高。为进一步利用毛细管电泳技术进行蛋白复合物多肽的分离奠定了良好的基础。C.Desportes等[13]报道用液相色谱从葡萄酒中分离肽，并用毛细管电泳对分离的肽进行纯度分析，毛

25nM的磷酸缓冲液、pH=2.5、细管的操作条件为：

30kV、20℃。崔波等[14]还曾报道通过毛细管区带电泳，不断改变缓冲液的pH值，使其分布于等电点以上和以下，以迁移率对pH值作图，当迁移率为零时的pH值即为蛋白质或肽的等电点。陈均志等[15]以100mmol/L的Tris/HCl（pH-8.5）+0.1%SDS+0.1%PEO为缓冲液，运行电压10kV，采用高效毛细管电泳（HPCE）无胶筛分方式（MEKC）对微波复合酶法大豆蛋白水解物中的多肽成功地进行了分离和检测；同时，对分离的机理作了较为深入的探讨，并对实验中出现的现象作了讨论。熊少祥等[16]使用毛细管电泳－激光诱导荧光－增强型电荷耦合器件）系统，用异硫氰酸荧光素（FTTC）柱（CE-LIF-ICCD

P物前衍生了亮脑啡肽、甲硫脑啡肽、血管紧张肽、

8min内进行了快速分离检测，质4种生物活性肽，

血管紧张肽的质量检出极限可达2.8×10-18mol。李响等[17]以羟丙基纤维素为筛分介质，线形聚丙烯酰胺涂层的毛细管为支持介质，采用毛细管SDS－无胶筛分电泳法（CapillarySDSnon-gelsieveelec-trophoresis，SDS-NGS）建立了小分子蛋白质和多肽药物相对分子质量测定方法，并用该方法测定了4种重组多肽药物的相对分子质量。通过实验证明该方法具有微量、快速、灵敏度高和自动化程度高等特点。浙江大学唐敏、方群[18]选择牛血清白蛋白的胰蛋白酶酶解多肽产物为试样，以异硫氰酸荧光素（FITC）标记，在微流控玻璃芯片上进行毛细管电泳分离后进行激光诱导荧光检测。该实验考察了在微流控芯片毛细管电泳体系中影响多肽分离的多种因素并通过优化组合后确定了最佳的实验条件，获得了令人满意的结果。

毛细管电泳与激光诱导荧光检测器的联用为蛋白质/多肽类样品提供了一种快速、灵敏的检测方法,在毛细管电泳检测发展史中具有里程碑式的意义,它突破了由于检测灵敏度不高所造成的瓶颈,使分析灵敏度提升近一个数量级[19]。

毛细管电泳速度快、灵敏度高，可以对样品进行定性、定量分析及分离和纯化。不仅在蛋白质和多肽

·8·

上海化工第34卷

的分析检测方面有着广泛的应用前景，而且在从离子到细胞的广大领域中都具有巨大的开发应用潜力。

2.3质谱（MS）及其联用技术

早在上世纪70年代就已经有质谱用于多肽序列分析的报道，但由于当时质谱的准确性较差，应用范围窄，因而没有进行深入研究。近年来随着电喷雾电离质谱（Electrosprayionisation,ESI）及基质辅助激光解吸质谱（Matrix-assistedlaserdesorption/ioniza-tion,MALDI）两种软电离技术的发展与完善，使质谱技术在蛋白质结构分析中的应用发生了性的飞跃。这两种分析技术使得极性肽分子的分析成为可能，检测限下降到fmol级别，可测定分子量范围则高达100000Da，同时也陆续出现了多种基于这两种质谱的蛋白测序方面的应用及研究方法。

目前，在蛋白质组学领域研究中，质谱已成为鉴定蛋白质及多肽的最重要技术平台之一。电喷雾（ESI）和基质辅助激光解吸电离（MALDI）的软电离技术，解决了生物大分子难挥发、不易气化的问题。电喷雾质谱（ESI）是运用最多的软电离技术。它利用位于一根毛细管和质谱仪进口间的电势差生成离子，在电场的作用下产生以喷雾形式存在的带电液滴，当使用干燥气或加热时，溶剂蒸发，液体体积缩小，最终生成去溶剂化离子。ESI离子源主要适用于离子性、极性化合物,它能够产生带有多个电荷的阳离子或阴离子而不是碎片离子,从而大大降低质荷比,使质荷比（m/z）降低到多数质量分析仪器都可以检测的范围,极大地扩展了分子量的分析范围,离子的真实分子质量也可以根据质荷比及电荷数算出,低化学噪音,容易获得碎片离子信息,利于进行串联质谱检测,它还可以方便地与多种质量分析器联合使用。以上优点对于极性较大、相对分子质量较大的多肽药物来说是非常有利的[20]。

复旦大学贾韦韬等[21]利用MALDI-TOF/TOFMS和ESI-MS/MS对一种含有多达28个氨基酸的复杂合成多肽成功进行了全序列测定。通过调节激光强度、碰撞诱导解离（CID）能量等质谱参数以及依据不同序列分析软件，获得了涵盖所有b型和y型碎片离子的串级质谱图。结果显示这种方法可以有效地解决出denovo测序方法遇到的谱峰过于复杂导致运算死机等问题。通过讨论如何对含有超过20个氨基酸片断的多肽进行合格串级质谱实验，为蛋白

质组学肽段序列测定提供了新的方法和思路。中山

大学张珍英等[22]考察了基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱（Matrixassistedlaserdesorption/ionizationtime-of-flightmassspectrometry，MALDI-TOFMS）测定多肽和蛋白质混合物的可行性。实验结果表明MALDI-TOFMS能快速地同时提供多肽和蛋白质混合物中各组分的准确相对分子质量。对于相对分子质量较小的多肽混合物，采用反射模式，多肽组分分子离子峰[M+H]+的各同位素峰清楚地区别开来，达到了基线分离水平。对于5种相对分子质量在1046.54~631.00范围内的多肽和蛋白质混合物，采

MALDI-TOFMS同样能够检测到用线性检测模式，

各组分的分子离子。周跃明等[23]提出了利用电喷雾飞行时间质谱法进行多肽疏水性测定的快速方法，并对疏水性不同的多种多肽进行了测定，所获得的

结果与经典色谱法获得的结果一致。该方法不但具有普遍的适用性，同时还具有测量速度快、适合大批量样品分析等诸多特点。白进发等[24]利用电喷雾多极串联质谱对3种合成多肽进行了系统的鉴定和分析研究。该方法首先通过全扫描模式测定多肽的分子量，然后选择[M+H]+或[M+2H]2+离子通过串联质谱（MS/MS）得到碎片离子，采用Y离子和b离子互补的方法即可测定多肽序列。利用文献数据对这种方法进行验证后表明，该方法简便、快速、实用。石磊等[25]采用先将蛋白质酶解成多肽的方法在多肽水平上鉴定和研究蛋白质，增强了鉴定的可信度,也能更好地鉴定蛋白质翻译后的修饰位点，并结合HPLC方法利用配有Nano-spray技术的高分辨傅立叶变换离子回旋共振串联质谱FT-ICR-MS（MS/MS或MSn），母离子的活化采取碰撞激发解离（CAD）的方式,借助先进的Mascot软件数据库进行质谱分析,获得了骨桥蛋白OPN相关多肽片段GDSVVYGLR和多肽QNLLAPQTLPSK片段的结构信息,并分析了其裂解机理。对于深入认识类风湿关节炎RA的发病机理和研发新的药物必将提供一定的理论基础。2.4同位素标记技术

随着同位素标记技术的运用，使得常规的各种分析检测技术又跃上了一个新的台阶。中国计量科学研究院的武利庆等[26]利用Leu-Phe作为模型肽，建立了水解后同位素稀释质谱测定多肽含量的方法。在实验中优化了酸水解的时间，采用高效液相色谱法和质谱法证明模型肽已完全水解。水解后的氨

第11期

杜晓宁等：多肽类物质分析检测方法的研究进展

·9·

基酸经过HPLC分离，质谱检测采用选择离子监测

模式，分别检测苯丙氨酸（m/z=165）和标记苯丙氨酸（m/z=174）的离子。根据苯丙氨酸的含量计算模型肽的含量，并评定了测定结果的不确定度。在国外，

15

Kawulka等[27]也采用13C、N标记化合物NMR的新技术测定了一种分离自一种细菌Bacillussubtilis中新的抗微生物多肽SubtilosinA的结构。

随着后基因组计划的到来，蛋白质组研究成为生命科学的最前沿。在用核磁共振（NMR）研究蛋白质结构以及定量蛋白质组学方面，稳定性同位素

1315C、N（2H、）标记的多肽和蛋白质都大有用武之地，使其成为蛋白质组学领域不可或缺的重要工具。用NMR方法研究蛋白质在溶液中的构象，需要采用稳定性同位素标记的战略以确定原子间的距离和角度。稳定性同位素标记的多肽和蛋白质也可用于NMR的仪器校准。蛋白质组学研究中的定量质谱分析可以采用稳定性同位素标记的战略，使用天然的和含稳定性同位素的标签试剂分别对肽片段进行标记，并可以进行相对定量；利用稳定性同位素（2H、1315C、N）标记的培养基和氨基酸使细胞产生相应标记的蛋白质，再用MS分析，能比较数百种蛋白质的表达水平；对蛋白混合物中一种目标蛋白进行绝对定量分析时，使用蛋白酶将其水解成多肽片段，利用稳定性同位素标记的合成肽作为内标，经MS分析后能以每细胞分子数衡量蛋白质的表达。同时，对于多肽和蛋白质类药物的代谢研究也可以采用稳定性同位素标记的方法跟踪药物在体内的吸收、分布和转化，进行药代动力学的机理研究。通过合成磺苯基异硫氰酸（SPTIC）的稳定同位素类试剂13C-SPITC，与常规的12C-SPITC试剂一起进行蛋白质标记，不仅有利于肽段从头测序，而且无论使用MAL-DI-TOF/TOF还是RPLC-ESI-MS/MS，对标准蛋白的相对定量都得到了理想的效果[28-29]。2.5其他检测技术

近几年来，生命科学和生物技术的迅猛发展，蛋白质组学方面的研究方兴未艾，使得多肽的成分多样性和结构复杂性达到了过去无法想像的程度。为了能够实现更为方便、快捷、准确和高效的分析测量，人们又不断开发出了一些最新的检测方法与手段，并正逐步推向市场。随着仪器硬件接口技术和联用方法的不断完善，最新出现的HPLC-MS-NMR方法就是联用集合

了HPLC-MS与HPLC-NMR这两种联用技术的优

点，使得在线获得更多的多肽产物样品的结构信息成为可能。Louden等[30]以D2O为流动相在线联用HPLC-UV-IR-HNMR-MS技术分离分析了Sile-neotites，Silenenutans，Silenefrivaldiskyana的提取物中的20种蜕皮激素和蜕皮类固醇。Bringmann等[31]在线联用HPLC-CD-NMR-MS/MS技术分离分析了热带滕蔓植物Habropetalumdawei提取物中的异喹啉叶绿素衍生物和萘基异喹啉生物碱。Hansen等[32]在线联用HPLC-MS-NMR技术分离分析了植物HypericumperforatumL.提取物中的萘二蒽酮、类黄酮和其他成分。此外，流动注射分析（FlowInjectionAnalysis，FIA）作为近20年发展起来的一种新分析方法，也被结合运用到传统的多肽检测方法中。林峰[33]等将流动注射分析技术运用到Bradford蛋白质测定法中，研制开发出了一种测定黄酒蛋白质的新技术，可直接测定黄酒中蛋白质的含量和分子量分布，并得到蛋白质含量与分子量分布的曲线谱图，从而成功实现对黄酒品质的监控和预测。

3结语

今天，通过运用以上提到的几种多肽分析检测方法，人们已经成功实现了多肽分析的自动化，并为临床病理、预防学等蛋白质化学领域的研究提医药、

供了强有力的手段。但即便如此，许多蛋白多肽类药物的结构解析仍然是充满挑战的复杂过程，目前所使用的分析技术仍远不能令人满意。

随着蛋白质组学在基因组学基础上的进一步发展，将来一定会有越来越多的新技术、新方法在这个领域得到应用，这也必将为蛋白质组学的研究带来一次又一次飞跃，从而推动整个蛋白质组学的向前发展。

参考文献：[1][2][3]

)下册）[M].北京:高等教胡宏纹.有机化学（第二版（育出版社,1990-10:667-670.

吕艳,冯风琴.反相高效液相色谱定量分析多肽中的氨基酸组成[J].浙江农业科学,2006,2：211-213.王贤纯,陈平,梁.液相色谱-串联质谱分析化学合成多肽及其主要副产物[J].中国生物化学与分子生物学报,2003,19（5）：576-581.[4]

杨寒朔,汤明海.纳升超高效液相色谱-飞行时间质谱检测斑马鱼胚胎中小分子多肽的初步研究[J].四川大,2007,38:1033-1036.学学报（医学版）（6）

10··

上海化工第34卷

[5]ChristophCzerwenka，WolfgangLindner．Stereoselectivepeptideanalysis[J]．AnalBioanalChem,2005，382：599-638．

6:3-9.（6）

[20]王静,关勇彪.多肽类药物体内分析方法[J].中国临床

:1309-1314.药理学与治疗学,2008,13（11）[21]贾韦韬,陆豪杰.含有28个氨基酸的复杂多肽的串级

质谱全序列分析研究[J].化学学报,2007,65(3):177-183.

[22]张珍英,邓慧敏.MALDI-TOFMS测定多肽和蛋白质

,混合物的可行性研究[J].中山大学学报（自然科学版）2002,41(6):122-124.

[23]周跃明,王伟萍.多肽分子疏水性的电喷雾飞行时间质

谱法快速测定[J].生物化学与生物物理进展,2006,33(10):942-947.

[24]白进发,刘志强.合成多肽的电喷雾质谱研究[J].分析

化学,2005,33(5):661-6.

[25]石磊,王韶,刘晓梅.骨桥蛋白中多肽片段的分析[J].

:50-52.分析测试学报,2008,27（增刊）

[26]武利庆,王晶.同位素稀释质谱法测定多肽含量[J].化

学分析计量,2007,16(2):20-23.

[27]KawulkaK,SprulesT,McKayRT,etal．Structureof

subtilosinA,anantimicrobialpeptidefromBacillussubtilislinking

with

unusual

posttranslational

to

modifications

of

cysteine

sulfurs

alpha-carbons

[6]BaggermanG,CerstiaensA,DeLoofA,eta1.

PeptidomicsofthelarvalDrosophilamelanogastercentralnervoussystem[J].BiolChem,2002,277(43):40368-40374.[7]

VerleyenP,BaggermanG,WiehartU,eta1．Expres-sionofanovelneuropeptide．NVGTLARDFQLPIP-NamideinthelarvalandadultbrainofDrosophilamelanogaster[J]．Neurochem,2004,88(2):311-319．[8]

KrusaM,TorreM，MarinaML．Areversed-phasehigh-performance1iquidchmtomagraphicmethcxtforthedeterminationofsoyabeanproteinsinbovinemilks[J]．Ana1．Chem,2000,72(8):1814-18l8．[9]

ChertovO,MichielDF，XuL，eta1．Identificationofdefensin-1,defensin-2，andCAP37/azuroddinasT-cellchemoattraetantproteinsreleasedfrominterleukin-8-stimulatedneutrophils[J]．J．Bio1．Chem,1996,271(6):2935-2940.

[10]WenJY,LedgerR,McLeedBJ,etal．Enzymatic

degradationofluteinizinghormonereleasinghormone(LHRH)bymucosalhomogenatesfromtheintestineofthecommonbrushtailpossum(Tri-chosurusvulpecula)[J]．LifeSci.，2002，71(25)：3019-3030.

[11]林嵘,周杏琴.毛细管电泳在HPLC制备分离酪蛋白磷

酸肽中的应用[J].国外分析仪器,2003,3:41-43.[12]姚洪军,张汝民.豌豆光系统I多肽HPCE分离特性的

研究[J].内蒙古农业大学学报,2006,27(1):38-42.[13]CDesportes．Liquidchromatographicfractionationof

smallpeptidesfromwine[J]．JournalofChromatographyA,2000,3:281－291．

[14]崔波,程云辉.毛细管电泳在多肽分离和检测中的应用

[J].食品与机械.2004,20(3):45-48.

[15]陈均志,张海平.高效毛细管电泳－紫外检测法分离测

定微波复合酶法大豆蛋白水解物中的多肽[J].分析检测,2005,26(8):163-165.

[16]熊少祥.高效毛细管电泳－激光诱导荧光检测生物活

性肽的研究[J].分析测试学报,1999,18(5):1-4.[17]李响,饶春明.毛细管SDS无胶筛分电泳测定小分子

多肽相对分子质量[J].中国生物制品学,2007,20(2):122-124.

[18]唐敏,方群.激光诱导荧光检测微流控芯片毛细管电泳

分离多肽的研究[J].高等学校化学学报,2004,25:185-186.

[19]马丽敏,蓝闽波.蛋白质/多肽的毛细管电泳激光诱导

荧光检测分析方法发展[J].生命科学仪器,2008,

phenylalanineandthreonine2003,125(16)：4726-4727.

[J]．J.Am.Chem.Soc.,

[28]LeeYH,HanH,ChangSB,etal.Isotope-coded

N-terminalsulfonationofpeptidesallowsquantivativeproteomicanalysiswithincreaseddenovopeptidesequencingcapability[J].RapidCommunMassSpectrum,2004,18(24):3019-3027.

[29]GuillaumeE,PanchaudA,AffolterM,etal.Differentially

isotope-codedN-terminalproteinsulphonation:combiningproteinidentificationandquantification[J].Proteomics,2006,6(8):2338-2349.

[30]LoudenD,HandleyA,LafontR,etal．HPLCanalysis

ofEcdysteroidsinplantextractsusingsuperheateddeuteriumoxidewithmultipleon-linespectroscopicanalysis

(UV,IR,H-1NMR,andMS)[J]．AnalyticalG,

Tasler

S,

Endress

H,

et

al．

Chemistry,2002,74(1):288-294．[31]Bringmann

Murrastifoline-F:firsttotalsynthesis,atropo-enantiomerresolution,andstereoanalysisofanaxiallychiralN,C-coupledbiarylalkaloid.2001,123(12):2703-2711．[32]Hansen

SH,

JensenliquidofA

G,

Cornett

C,

et

al.

High-performancestructure

elucidation

chromatographyconstituents

of

on-lineHypericum

[J]．J.Am.Chem.Soc.,

coupledtohigh-fieldNMRandmassspectrometryfor

第11期

杜晓宁等：多肽类物质分析检测方法的研究进展

11··

perforatumL.[J]．AnalyticalChemistry,1999,71(22)：5235-5241．

[33]林峰,白少勇.流动注射光度法测定黄酒中蛋白质的含

1459-量和分子量分布[J].分析化学,2007,33(10)：1461.

2009年4月收稿日期：

NewTechnologiesProgressintheAnalysisofPolypeptide

DuXiaoning

SongMingming

Abstract：Theanalysisofpolypeptideproductsisaveryimportantandactiveresearchfieldinproteomics．Theusefulbioactivecompoundsincludingallsortsofpotentialnovelmedicinescanbefoundandutilizedthroughtherelevantresearch．Withthedevelopmentofnewinstrumentsandtechnologiesinrecentyears,enormousprogressathomeandabroadhasbeenachievedinthisfield．Thearticlestatedthenewestmethodsandprogressathomeandabroadoftheanalysisofpolypeptideproducts.

Keywords：Polypeptide;Analysis;HPLC(High-PerformanceLiquid-Chromatography);CE(CapillaryElec－trophoresis);MS(Mass-Spectrometry)

󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁󰀁道康宁将携风能解决方案亮相2009中国国际风能大会暨展览会

新型硅树脂涂层产品可敷在叶片表面，形成一层高硬度、高韧度、拒

中国国际风能大会暨展览会

将于2009年10月21~23日在北是一种性能卓越可靠的防火绝缘介质，是优化寿命周期成本的高性能选择。

与此同时，道康宁还一直以消费者的身份支持风电产业的发展，2009年2月10日，道康宁宣布通过消费能源环保发电计划，签订了

h的风力电一份逾14000MW·

能采购合同。道康宁因此成为密歇

根州最大的可再生能源私人采购商之一。这些风力电能大约可使二氧化碳排放量减少1万t。通过该合同采购的电能几乎相当于道康宁位于美国密歇根州米德兰市的公司总部所需的全部用电量。道康宁总部工作人员超过1100人，这里也是道康宁技术装备精良的全球研发中心所在地。

柯同德先生还指出：“除了生产各类风电应用零部件，此举也体现了道康宁在利用可再生能源、满足用电需求方面的领先地位和一贯坚持。道康宁希望在全球范围内推行这种做法，特别是在中国。中国不仅保持着经济高速发展，也十分注重可持续发展和研发创新。”

京中国国际展览中心举办。届时，水拒冰、抗紫外线能力卓越的独特道康宁将携一系列旨在改善风力保护层。涡轮机可靠性、耐用性和性能表现（2）风机叶片粘合和密封产的材料亮相。

道康宁公司副总裁兼大中华地区总裁柯同德先生称：“道康宁的先进技术和材料可提高风力涡轮机效率和动力、降低运营和维护成本，延长正常运行时间，因此赢

制造得了全球风力涡轮机工程师、商和运营商的青睐。我们真诚希望

加强与中国科研单位、生产厂家和

品

有机硅密封剂适合极端工作

环境，在高负荷下仍具有出色的可靠性，能防止各类风机零部件故障，包括叶片、机舱、齿轮箱和塔架系统。

（3）发电机绝缘保护产品道康宁的解决方案适用于发电机定子、逆变器、控制器、传感器

机构的联系，在开发经济的、和热交换器。

高效的风能方面发挥积极作用。”（4）变浆轴承、偏航齿轮及其这是道康宁首次亮相中国国际风能大会暨展览会，体现了道康宁对中国风能市场的日益重视及高度认可。

道康宁在2C14展位上将展示：

（1）叶片复合材料增强产品

道康宁硅烷偶联剂能提燥/潮湿环境下复合材料的机械强度，延长产品使用寿命。道康宁

他齿轮润滑和保护产品

道康宁MOLYKOTE誖特种润滑剂性能可靠，符合全球众多润滑要求最为苛刻的工况。

（5）室内/室外变压器优化产品

道康宁XIAMETER誖品牌下的硅油，品质久经考验，在恶劣环境下仍能保证最佳性能。XIAM-ETER誖PMX-561变压器硅油