蛋白质水解规律及应用
刘艳玲
一. 蛋白质水解产物的确定
蛋白质在酸性、碱性、酶等条件下发生水解,蛋白质的水解中间过程,可以生成多肽,但水解的最终产物都是氨基酸。蛋白质水解生成氨基酸大约有20余种,天然蛋白质水解的最终产物都是氨基酸。
例1. 某天然蛋白质充分水解后,能分离出有机物R,R可与等物质的量的KOH或盐酸完全反应。3.75gR可与50ml、1mol/L的NaOH完全中和,则R的结构简式为
CH2COOHA.
|NH2
B.
CH3CHCOOH|NH2
HOOCCH2CH2CHCOOH|NH2D.
解析:天然蛋白质水解产物R为氨基酸,R与KOH或HCl反应时为等物质的量完
全反应,说明R分子中有一个氨基和一个羧基。此有机物相对分子的质量过式量分析:
M3.75750.05,通
7516(NH2)45(COOH)14(CH2)
运用残基分析法,说明含有一个残基CH2,则R的结构简式为H2NCH2COOH,故选A。
二. 蛋白质水解中的断键位置
蛋白质的水解遵循“哪里来,哪里去”原则,即水从哪里生成,就从哪里加水进去,所以蛋白质水解中的断键位置,就是羧基中的碳原子和氨基中的氮原子相连的肽键。
例2. 下图表示蛋白质结构的一部分,图中A、B、C、D表示了分子中不同的键,当
蛋白质发生水解反应时,断裂的键是
解析:天然蛋白质是氨基酸通过肽键生成的高分子化合物,成键时羧基上脱去羟基,氨基上脱去氢原子,形成酰胺基结构CNH。因此蛋白质水解时应是酰胺基结构上的C-N键断裂。故选:C。
O||例3. 有一种式量为M的多肽,经水解后只得到甘氨酸,如果该多肽是链状分子,则一个这种多肽分子含有肽键数为( )
M75MM18M18A. 57 B. 75 C. 75 D. 75
解析:守恒法。设多肽分子中含有n个肽键,已知每2个氨基酸脱1分子水形成二肽,含有一个肽键,类推,含n个肽键,需要(n+1)个甘氨酸脱n个水,根据质量守恒:
M7557,故选A。
(n1)75M18n,解得:n三. 蛋白质水解后生成氨基酸分子数的确定
根据2个氨基酸脱1分子水形成二肽,含有一个肽键,3个氨基酸脱2分子水形成三肽,类推(n+1)个氨基酸脱n分子水形成多肽,含n个肽键。反之,一个链状蛋白质分子(多肽分子)水解生成n个氨基酸分子,则要消耗(n-1)个水分子。
例4. 今有一个多肽,其分子式是C55H70O19N10,已知将它水解后只得到下列四种氨基酸:
H2NCH2COOH(甘氨酸C2H5O2N)CH3CHCOOH(丙氨酸C3H7O2N)|NH2HOOCCHCH2CH2COOH(谷氨酸C5H9O4N)|NH2
(1)这个多肽是几肽?有几个肽键?
(2)该多肽水解后有几个谷氨酸?几个苯丙氨酸?
解析:(1)解此题可根据蛋白质水解规律,利用原子守恒法解答。因这几个氨基酸均只有一个氮原子,多肽的分子式中有十个氮原子,则有十个氨基酸参加反应,故为十肽。十个氨基酸之间可脱去九分子水,则有九个肽键。
(2)因十个氨基酸脱去九个水分子后,生成多肽中有70个氢原子和19个氧原子,则十个氨基酸共有70+18=88个氢原子和19+9=28个氧原子。
设该多肽中含甘氨酸、丙氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸分别为a、b、c、d个,分别由C、H、O、N原子守恒得关系式如下:
2a3b5c9d55(C)5a7b9c11d7018(H)abcd10(N)2(abd)4c199(O)
解得:a=1,b=2,c=4,d=3
故该多肽水解后有4个谷氨酸,3个苯丙氨酸。