中药复方研究中指纹图谱的应用
本文综述了中药复方研究的新思路以及指纹图谱在中药复方研究中的作用。为中药复方的开发，研究以及指纹图谱用于质量控制方面的研究提供借鉴。
标签：中药；指纹图谱 指纹图谱作为中药质量控制的一种手段正日益受到人们的重视，2000年国家药品监督管理局颁布了《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）》[1-2]；近来，有关中药指纹图谱研究屡有报道。指纹图谱的提出为解决这一难题提供了一种可能的方法。
1 中药指纹图谱的概念
中药指纹图谱系指中成药或中药材经适当处理后，采用一定的分析手段，得到的能够标定该中药特性的共有峰的图谱。每个人的指纹在微小的细节构造中各有不问。依据这些差异，通过”比对”方式，可以确定鉴别每个人的特征。中药的指纹特征也必须既具有”共性”又具有”个性”。所谓”共性”，应能体现出不同产地、不同采收期的同种药材共同具有某些特征。所谓”个性”，必须反映出该药材有别与其他任何物质；还应能反映出产地和采收期不同而造成的差异；对于中成药，则能反映出同一产品不同批次间的质量差异。差异越小，说明药材的稳定性越好。
2 中药指纹图谱在中药复方研究中的作用
传统的中药研究有两条途径。一条是从单一植物中提取一种有效成分然后可进行结构修饰等或用提取物制成新药。前者如青蒿素的发现及结构修饰所得的蒿甲醚。后者如从银杏叶中所得提取物，由多种的化合物组成。另一途径则是中药复方药物的开发研究。这是中医药的主流，在此方面，我国占有优势。但目前我国的中成药往往作为保健品而不是药品在西方国家销售，难以参与国际竞争。主要的原因是中药的基础研究不足，特别是中药作用的物质基础，作用机制不清楚是最根本的原因。由于药效的物质基础不明，传统的中药质量标准采用单一化合物或者对照药材作为参比标准，试图用这些已知的化合物控制中药质量。但是，这些方法有很大的局限性。一些未知的化合物和一些微量物质都有可能是真正的有效成分。因此，传统的中药质量控制是一种不完全的质量控制。所以，在目前有效成分不完全明确的条件下，用指纹图谱控制中药材和中成药质量有重要的意义。建立真正意义上的中药复方质量标准，关键是找到复方中的有效成分及其药效、作用机制，这可以借助指纹图谱来完成。
2.1 中药指纹图谱的初级阶段 中药指纹图谱的建立方法很多，实际工作中可根据需要选择一种或几种。色谱法中常用于建立指纹图谱的方法有薄层色谱，气相色谱，高效液相色谱和毛细管电泳。光谱法中最常用的是红外光谱。其他方法还有波谱[质谱（MS）和核磁共振谱（NMR）]，联用技术，（GC/MS，HPLC/MS，HPLC/MS/MS等），χ射线衍射分析法，分子生物学方法等。
适宜的检测方法是制定合格指纹图谱的重要环节。色谱方法和光谱、波谱方
法均可用于指纹图谱的建立，而光谱方法由于提供信息较少，同类化合物，其取代基的变化，难以在光谱中表现出来，因此采用光谱方法建立的指纹图谱，其专一性不强。应优先采用色谱方法，挥发性成分采用气相色谱法检测；非挥发性成分采用高效液相色谱法检测；对于一些成分简单，在薄层色谱上分离度较好的供试品可采用薄层扫描。而分子生物学方法等是建立指纹图谱的新方法，有极好的应用前景。联用技术是最有效的建立指纹图谱的方法，可提供大量各种信息，符合解决中药复杂体系的要求，但仪器价格昂贵，不易推广使用。目前，最常用的是HPLC法。
指纹图谱的相似度评价在指纹图谱的研究中是一个关键性问题，建议在实际应用中，应针对不同的实际问题，采用适合的相似度评价方法。
2.2 中药指纹图谱的高级阶段 高级阶段即将指纹图谱与药理结合进行研究，以及指纹图谱与药效的相关性研究。这种研究思路适于复方物质基础的研究。中药复方研究思路可归纳为四条原则：现代分离方法提取有效部分，指纹图谱定性，指标成分定量，有效部分和药效学研究相结合。开展三个化学层次和四个药理水平的研究。
三个化学层次指药物（复方、药材）、有效部分和有效成分。有效部分指复方中化学性质相似的一大类化合物，如黄酮，生物碱等。结合复方已知的药理和化学知识及药物组合理论，确定分哪几类有效部分，然后用目前的技术手段可以将复方药物提取分离成为如皂苷类、生物碱类、挥发油、黄酮类等各类有效部分。每个有效部分为化学性质相近的化合物群。有效部分的分离提取也可采用按化学成分的分子量、极性或酸碱性的大小，进行系统的分离而得。中药复方分离成若干有效部分后，结合复方君臣佐使药味的关系开展整体动物、组织器官、细胞亚细胞及分子生物学四个药理水平上的药效和作用机理研究，从而确定出君臣佐使有效部分和有效成分及其配伍规律。这样做的好处是可以获取尽可能多的信息，甚至获得色谱峰的分子结构，为复方的有效成分研究打下良好基础。
有效部分药理作用可以和单味药，复方制剂等的药理作用比较，如果发现复方比单味药好，则可比较它们的指纹图谱，看是否有新的化合物产生。如有需要，还可将有效部分再继续分离成单一的有效成分，结合该部分的药理实验，再进行四个药理水平的研究以及鉴定分子结构。这样从药味、有效部分、有效成分三个化学层次上结合四个药理水平和指纹图谱进行综合研究。是有希望说清复方的化学成分和药效、作用机理的。
结合目前资料通过药物，有效部分和有效成分的提取分离，建立指纹图谱，与药理相结合进行三个化学层次四个药理水平的研究，并结合数学的分析方法进行指纹图谱的相似度评价和建立指纹图谱与药效的相关性，既有望说清复方的物质基础，而且在此基础上，更能够进一步升华指纹图谱的研究。将指纹图谱与药理作用相关联。这样，指纹图谱不仅可控制中药的质量，更有可能通过研究达到控制一张或几张指纹图谱而控制中药复方的疗效的功能。
参考文献：
[1]国家药品监督管理局.关于印发《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）》的通知[J].中成药，2000，22（10）：671
[2]國家药品监督管理局.中药注射剂指纹图谱研究的技术要求（暂行）[J].中成药，2000，22（10）：671
