Ｔ日ＥＡＴ工ＢＥ论著Ｊ ［二Ｈ工ＮＡ ＨＥＡＬ ＴＵ工Ｎ口Ｕ目Ｔ口Ｙ 自身免疫性肝病相关抗体检测及其临床意义研究 戴吉平 湖南省怀化市辰溪县博爱医院检验科，湖南怀化４１９５００ 【摘要】目的分析研究自身免疫性肝病相关抗体检测以及临床效果。方法分析我院随机抽取的２０１ １年８月一２０１３年０８月 期间６００例自身免疫性肝病相关抗体检测的患者，随机分成两组，分别为实验组与对照组，每组平均３００例患者。对照组进 行常规检测，其中实验组进行间接免疫荧光法以及ＥＬＩＳＡ检测法。观察两组检测法的检测情况并进行分析。结果两组患者 在进行自身抗体检测后，实验组抗体检测效果明显优于对照组，其中，实验组自身抗体检测有效率为９３．０％，检测无效率为 ７．０％，ＡＩＬＤ检测中有ＡＮＡ ４６例、ＡＮＣＡ ６４例、ＳＭＡ ３４例、抗ＭＰＯ抗体８２例以及ＡＭＡ ７６例；对照组中自身抗体检测有 效率为７８．０％，检测无效率为２２．Ｏ％，ＡＩＬＤ检测中有ＡＮＡ３４例、ＡＮＣＡ５２例、ＳＭＡ２９例、抗ＭＰＯ抗体７６例以及ＡＭＡ７０ 例。结论注重对自身免疫性肝病相关抗体进行检测，有利于对肝病进行检出、诊断、鉴别诊断以及临床分析等，有利于提高 自身免疫性肝病的鉴别诊断以及指导治疗效果，具有重要的临床意义。 【关键词】自身免疫性肝病；抗体检测；临床意义 【中图分类号】Ｒ５７５ 【文献标识码】Ａ 【文章编号】１６７２—５６５４（２０１４）０６（ａ）一００５１—０２ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｉｎ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ＤＡＩ Ｊｉｐｉｎｇ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｈｕｎａｎ ｐｒｏｖｉｎｃｅ Ｈｕａｉｈｕａ ｃｉｔｙ Ｃｈｅｎｘｉ ｃｏｕｎｔｙ ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｈｕｎａｎ ４１９５００，Ｃｈｉｎａ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ Ａｎａｌｙｚｉｎｇ ｔｈｅ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｒｅｌａｔｅｄ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｅｆｆｅｃｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｆｒｏｍ ａ ｒａｎ— ｄｏｍ ｓａｍｐｌｅ ｏｆ ｄｕｒｉｎｇ Ａｕｇｕｓｔ ２０１ １ ｔｏ Ａｕｇｕｓｔ ２０１３，６００．ｃａｓｅｓ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｒｅｌａｔｅｄ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｄｅｔｅｃ— ｔｉｏｎ，ｗｅｒｅ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ，ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎ ａｖｅｒａｇｅ ｏｆ ３００ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｉｎ ｅａｃｈ ｇｒｏｕｐ．Ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｆｏｒ ｒｅｇｕｌａｒ ｔｅｓｔｉｎｇ，ｏｆ ｗｈｉｃｈ ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ＥＬＩＳＡ ｔｅｓｔ．Ｏｂｓｅｒｖｉｎｇ ｔｈｅ ｉｎｓｐｅｃｔｉｏｎ ｓｉｔｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ｔｅｓｔ ａｎｄ ａｎａｌｙｓｉｓ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ ｏｆ ｐａｔｉｅｎｔｓ ａｆｔｅｒ ｔｈｅ ｄｅ— ｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ，ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｅｆｆｅｃｔ ｉｓ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｂｅｔｔｅｒ ｔｈａｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ．Ａｍｏｎｇ ｔｈｅｍ，ｔｈｅ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｇｒｏｕｐ ａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ ９３．Ｏ％，ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ｅｆｉｆｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ７．Ｏ％，Ｔｈｅｒｅ ａｒｅ ４６ ｃａｓｅｓ ｏｆ ＡＮＡ，６４ ｃａｓ— ｅ８ ｏｆ ＡＮＣＡ，３４ ｃａｓｅｓ ｏｆ ＳＭＡ，ＭＰＯ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｉｎ ８２ ｃａｓｅｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ７６ ｃａｓｅｓ ｏｆ ＡＭＡ ｉｎ ｔｈｅ ＡＩＬＤ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ；Ａｕｔｏａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ ｄｅｔｅｃ． ｔｉｏｎ ｒａｔｅ ｗａｓ ７８．０％ｉｎ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｎｇ ｅｆｉｆｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ２２．０％，Ｔｈｅｒｅ ａｒｅ ３４ ｃａｓｅｓ ｏｆ ＡＮＡ，５２ ｃａｓｅｓ ｏｆ ＡＮＣＡ，２９ ｃａｓｅｓ ｏｆ ＳＭＡ，ＭＰＯ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｉｎ ７６ ｃａｓｅｓ，ａｎｄ ｔｈｅ ７０ ｃａｓｅｓ ｏｆ ＡＭＡ ｉｎ ｔｈｅ ＡＩＬＤ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｎｏｔｉｃｅ ｏｆ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ｒｅｌａｔｅｄ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ，ｃｏｎｄｕｃｉｖｅ ｔｏ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｏｆ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ，ｄｉａｇｎｏｓｉｓ，ｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ，ｅｔｃ．， Ｔｏ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅ ａｎｄ ｇｕｉｄｅ ｔｈｅ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｅｆｆｅｃｔ，ｈａｓ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ． 【Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ】Ａｕｔｏｉｍｍｕｎｅ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅｓ；Ａｎｔｉｂｏｄｙ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ；Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ 我国近几年来，肝病患者不断增加，多数肝病患者由于治疗 抗髓过氧化物酶抗体（抗ＭＰＯ）等同。笔者研究分析我院随机抽取 效果低以及病因不明等因素影响，造成患者的病情加重，给患者 的２０１１年８月＿２０１３年８月期间６００例自身免疫性肝病相关 带来巨大的痛苦 。其中自身免疫性肝病的发病率越来越高。自 抗体检测的患者，观察其检测效果，相关报道如下。 身免疫性肝病是一种病因不明的慢性肝脏疾病．是患者自身免疫 １资料与方法 系统对肝细胞和胆管坏死以及肝脏引起的炎症进行攻击，其极易 １．１一般资料 与其他类肝脏疾病混淆。容易造成误诊或漏诊的情况 。一般自 分析我院随机抽取的２０１１年８月一２ｏ１３年８月期间６００ 身免疫性肝病分为原发性胆汁性肝硬化、自身免疫性肝炎以及原 例自身免疫性肝病相关抗体检测的患者，进行随机分成两组，分 发性硬化性胆管炎等１５］。自身免疫性肝病在诊断的过程中，需要对 别为实验组与对照组，对照组进行常规检测，其中实验组进行间 人体内部存在的抗体进行检测，以便更好的鉴别诊断。目前已知 接免疫荧光法以及ＥＬＩＳＡ检测法。其中实验组有３００例患者，女 的自身免疫Ｉ生肝病相关抗体有平滑肌抗体（ＳＭＡ）、抗核抗体（ＡＮＡ）、 性１６９例，男性１３１例，年龄段为２１～６２岁，平均年龄为４３．１６岁， 核周性抗中性粒细胞胞质抗体（ＡＮＣＡ）、抗线粒体抗体（ＡＭＡ）、 其中原发性胆汁性肝硬化患者有５６例，自身免疫性肝炎患者有８６ 中国卫生产业 ５１ Ｉ Ｔ￣ＥＡＴＥＳＥ论著 巴Ｈ工ＮＡ ＨＥＡＬ ＴＨ工Ｎ０ＵＢＴ只Ｙ 例以及原发性硬化性胆管炎患者７３例；对照组中有３００例，女性 表１两组患者自身抗体检测效果（％） １４８例，男性１５２例，年龄段为２０～６５岁，平均年龄为４６．３４岁，其 中原发性胆汁性肝硬化患者有６２例．自身免疫性肝炎患者有７９ 例以及原发性硬化性胆管炎患者８４例。两组患者性别、年龄、病 症等一般资料无显著性差异，具有可比性。 １．２方法 注：ｘ ：５．７６８９，Ｐ＝０．０２１３。 但时常会将自身免疫性肝病误诊为其他类肝炎或肝硬 仪器和试剂：间接免疫荧光试剂盒（由天津市灏洋生物制品 明显差异，尤其是误诊为病毒性肝炎 。随着医学的不断发展，越 科技有限责任公司生产）：试剂由山西医科大学第一医院病理科提 化等病症，在临床以及实验室中 供的二甲苯、酒精、苏木素，戈舍瑞林溶液（由Ａｓｔｒａ？Ｚｅｎｅｃａ？ＵＫ？ 来越多的医学工作者关注自身抗体的检测， ８ｌ。注重对 Ｌｉｍｉｔｅｄ生产，批准文号：Ｈ２０１Ｍ０４４７）。酶联免疫仪器由英国Ｄｒｅｗ 对于自身免疫性肝病相关抗体检测进行新的项目运用ｆＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ公司提供，由Ｄｒｅｗ Ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ公司提供检验试剂盒，所有 操作严格按照试剂盒说明书进行。 两组患者均进行常规的检查，检查肝脏功能是否正常运行，对 照组进行常规方法检测。实验组运用间接免疫荧光法以及ＥＬ１ＳＡ 检测法进行检测，用Ｈｅｐ一２细胞及猴肝作为抗原，主要检测抗核 抗体，在生物薄片上覆盖中性粒细胞，例如甲醛、乙醇等的复合 片，进行检测核周性抗中性粒细胞胞质抗体，将大鼠肾的冰冻组 织进行切片，保存在４ ｏＣ的温度下备用。将生物载片恢复到常温 的时候，将血清稀释，分别记录每一种稀释情况，再将生物载片盖 在加样板的凹槽里，放置３０ ｍｉｎ后进行冲洗，再进行检测。严格 按照相关规定进行操作。在检测抗ＭＰＯ抗体的时候，要运用到 ＥＬＩＳＡ检测法，将样品稀释，根据加样方案在相应的微孔中添加 稀释血清，在常温中放置３０ ｍｉｎ，冲洗三次加样板，再进行添加酶 标抗体后放在常温中３０ ａｒｉｎ后冲洗三次加样板。添加底物进行 观察，５ ｍｉｎ后禁止添加液体，用５００ ｎｍ波长进行颜色对比，并计 算结果。 １．３检测标准 显效：患者的自身抗体检测率较高，尤其是针对ＡＮＡ、ＡＮＣＡ、 ＳＭＡ、抗ＭＰＯ抗体、ＡＭＡ抗体的检测，其检测效果明显。有效：患 者自身抗体的检测率一般。其中ＳＭＡ的抗体检测不够明显。无 效：患者自身的抗体检测率较低，只能够检测出小部分抗体。 １．４统计学分析 本研究所涉及到的所有数据均采用ＳＰＳＳ ２１．０统计学软件进 行统计学分析，所涉及到的计量数据局采用平均数和标准差（露拯）表 示．组问比较采用组间单因素方差表示，Ｐ＜Ｏ．０５，差异具有统计学 意义。 ２结果 两组患者在进行自身抗体检测后，其中，实验组自身抗体检 测率为９３．０％，检测无效率为７．０％，ＡＩＬＤ检测中有ＡＮＡ ４６例、 ＡＮＣＡ ６４例、ＳＭＡ ３４例、抗ＭＰＯ抗体８２例以及ＡＭＡ ７６例：对 照组中自身抗体检测率为７８．Ｏ％，检测无效率为２２．Ｏ％。ＡＩＬＤ检 测中有ＡＮＡ３４例、ＡＮＣＡ５２例、ＳＭＡ２９例、抗ＭＰＯ抗体７６例以 及ＡＭＡ７０例。实验组抗体检测效果明显优于对照组．两组的效 率差异显著（Ｐ（０．０５），具有统计学意义。详情如表１所示。 ３讨论 近几年来，我国的患者越来越多，主要以病毒性肝病为主，虽 然病毒性肝病与自身免疫性肝病发病机制各不相同。治疗方式有 ５２ 中国卫生产业 自身免疫眭肝病相关抗体进行联合检测，对肝病的检出、诊断、鉴 别诊断以及临床分析具有重要意义。 本研究通过对６００例自身免疫性肝病相关抗体检测的患者 分别利用间接免疫荧光法以及ＥＬＩＳＡ检测法进行自身抗体的检 查，结果显示，实验组自身抗体检测率为９３．０％，检测无效率为 ７．０％，ＡＩＬＤ检测中有ＡＮＡ ４６例、ＡＮＣＡ ６４例、ＳＭＡ ３４例、抗 ＭＰＯ抗体８２例以及ＡＭＡ ７６例．表明间接免疫荧光法和ＥＬＩＳＡ 检测法运用于自身抗体检测中均有较高的检测率，其中自身免疫 性肝病常见的抗体包括ＡＮＡ、ＡＮＣＡ、ＳＭＡ、抗ＭＰＯ抗体。另外， 对照组中自身抗体检测率为７８．０％．检测无效率为２２．０％，ＡＩＬＤ检 测中有ＡＮＡ３４例、ＡＮＣＡ５２例、ＳＭＡ２９例、抗ＭＰＯ抗体７６例以 及ＡＭＡ７０例，表明实验组抗体检测效果明显优于对照组．这一 结果与相关文献报道的数据相吻合。因此，我们认为，间接免疫荧 光法和ＥＬＩＳＡ检测法在自身免疫性肝病相关抗体检测中具有较 高的临床应用价值。 综上所述，注重对自身免疫性肝病相关抗体进行检测，有利 于对肝病进行检出、诊断、鉴别诊断以及临床分析等，有利于提高 自身免疫性肝病的鉴别诊断以及指导治疗效果，具有重要的临床 意义。 ［参考文献】 ［１】Ｚａｍａｎｏｕ Ａ，Ｔｓｉｒｏｇｉａｎｎｉ Ａ，Ｔｅｒｚｏｇｌｏｕ Ｃ，ｅｔ ａ１．Ａｎｔｉ－ｓｍｏｏｔｈ ｍｕｓｃｌｅ ａｎｔｉｂｏｄ— ｉｅｓ（ＡＳＭＡｓ）ａｎｄ ａｎｔｉ－ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（ＡＣＴＡｓ）ｉｎ ｌｉｖｅｒ ｄｉｓｅａｓｅｓ：ａ ｃｏｍｐ￣ｓｏｎ ｏｆｃｌａｓｓｉｃａｌ ｉｎｄｉｒｅｃｔ ｉｍｍｕｎｏｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｗｉｔｈ ＥＬＩＳＡ［Ｊ｝．ＪＣｌｉｎ Ｌａｂ Ａｎａｌ，２０１２，１６（４）：１９４－２０１． ［２】万楠，秦海明，王晓晨．猴肝组织与Ｈｅｐ一２细胞联合检测抗核抗体的 临床意义 实用医技杂志，２０１０，１ １（９Ａ）：１６７５—１６７６． 【３】贾继东．自身抗体检查在自身免疫性肝病诊断中的应用ｌＪＪ．中华检验 医学杂志，２０１０，２６（４）：１２０． （４】屠小卿，仲人前，范利英，等．自身免疫性肝病患者自身抗体分析【Ｊ１．上海 医学检验杂志，２ＯＬＯ，５３（１７）：３５１—３５３． 【５］王宵伟自身免疫性肝炎与丙型肝炎遗传背景及免疫发病机制的差异【ＪＩ． 国外医学免疫学分册，２０ｌ １，６４（２３）：３４３—３４７． 【６】刘燕敏，闫惠平，汪俊韬．肝功能异常患者中自身抗体及自身免疫性 肝病的检测［Ｊ】＿中华肝脏病杂志，２０１ １，１２（６）：３６０—３６２． 【７】李唏，李永哲．原发性胆汁性肝硬化自身抗体谱研究新进展【Ｊ１＿中国实 验诊断，２０１ １，１５（５）：９４５—９４８． 【８】闫惠平．自身免疫性肝病的自身抗体检测及报告规范【Ｊ１．临床肝胆病 杂志，２０１ １，２７（１６）：５９５—５９７． （收稿日期：２０１４—０３—０５）
