交流藏鸡致及奏湖南病质省常沙粒德市门基澧蒋县菌因卫动国物卫耐检生监药测督所性探分析415500揍析摘要院为对藏鸡致病性沙门菌耐药性进行研究袁对其质粒耐药基因状况进行分析袁主要利用琼脂纸片扩散及PCR扩散技术等方式对14株藏鸡进行检测遥通过结果得出袁阿莫西林尧复方新诺明尧四环素等耐药性较为严重袁对于头孢尧丁胺卡那较为敏感袁并且在菌株方面呈多重耐药性遥关键词院藏鸡曰致命性沙门菌曰耐药性曰耐药基因1试验材料与方法1.1菌株与药敏纸片本次试验中所使用的菌株源于山南市隆子县隆子镇新巴村袁从中选取14株致病性沙门菌遥由山南试验室提供大肠杆菌遥本次试验的主要应用试剂为MH肉汤培养基等MH遥琼脂培养基主要应用到的药敏尧LB及36中国畜禽种业2018.3纸AMK尧片为头孢唑啉尧CFP尧链霉1.2多西环素药物敏感性试验尧SPT等遥素尧本次试验主要采用琼脂纸片扩散方式对藏鸡致病性沙门菌进行药物敏感性试验袁将大肠杆菌作为质控菌株遥在引物设计与合成方面袁根据相关文献资料中记载袁采用相应设计方式袁将沙门菌耐药基因引物扩展到20种袁并且由山南桑日县实验中心负责合成遥1.3PCR扩增分析将PCR扩增产物与10g/L的琼脂糖融合之后袁通过凝胶成像仪对其进行观察袁确定其为耐药基因阳性菌株遥从试验样本中随机抽取PCR进行检测产物的试剂回收后送至相关单位2株袁然后将袁将最终检测结果与耐药基因序列进行对比分析遥2试验过程为了对藏鸡致病性沙门菌的耐药性进行分析袁主要采用PCR扩增技术对其进行耐药表型及质粒耐药基因进行检测袁通过药敏试验尧质粒基因试验等方式获得最终结果遥2.1药敏试验将14株藏鸡致病性沙门菌与抗菌药物进行试验袁分离株对85.71%含量的78.57%氨芐诺明尧的阿莫西林西林耐药性42.86%的四环素等袁71.43%最强袁遥的复方新然后是全部菌株对于头孢唑啉尧丁胺卡那敏感袁在13株分离菌当中袁对3类以上药物耐药的情况称之为是多重耐药袁在本次试验中发现袁其比例为92.86%遥2.2质粒耐药基因试验将14株藏鸡致病性沙门菌进行质粒耐药基因试验袁从分离株中检测出其具有blaXOA尧blaDHA尧blaCMY-2等blaACC尧11种质粒耐药基因基因遥将blaFOX尧袁并没有检测出acc(6爷)blaSHV-Ib-cr与等质粒耐药blaTEM与产物进行测定后袁检测结果显示袁其扩增序列与耐药物基因序列相对比袁在同源性方面达到99%遥3试验结果在耐药表型与质粒耐药基因之间的相关性方面袁将14株藏鸡致病性沙门菌耐药表型与基因进行试验袁在所有分离株当中袁除了其中1株没有表现出耐药表型Ib-cr重耐药性外袁袁其他袁并且具有acc(6爷)-且有超过两种质粒耐药基13株有4耀8株具有多因遥近年来袁藏鸡中沙门菌的耐药性问题成为相关行业中关注的重点话题袁对养殖场构成严重威胁袁造成较大的经济损失遥通过上述试验研究得出袁阿莫西林尧四环素尧多西环素等药物具有较强耐药性遥其中袁阿莫西林耐药率为78.15%袁中介率为14.29%袁敏感.29%袁率为7.14%中介率为曰四21.43%袁环素的耐敏感率为药率为14.29%曰中介率为多西环素耐药率为28.57%袁敏感率为42.86%袁28.57%曰头7.41%袁孢哌酮敏感率为的耐药率为0袁中虽然头孢介率为哌酮不具备耐药性袁92.86%曰但其中介率较高袁这将意味着在药物压力下袁分离菌将会向耐药菌发生转变袁进而致使耐药率上升遥另外袁大部分菌株都具备多重耐药性袁对超过3类抗菌药物呈现出耐药反应袁这也充分说明试验中养鸡场的致病性沙门菌多重耐药现象较为严重pC遥茁酶进行介导时当同一质粒对袁将被称为是超广谱ESBLs及Am鄄生素药物具有耐药作用内酰胺酶袁此类细菌将对所有类型抗遥在本次试验当中袁有.57%的菌株中被检测出携带有上述两种基因袁据此可以推测出袁这两种基因很可能存在于同一种质粒中袁并且能共同参与到内酰胺酶的耐药机制中遥4结束语综上所述袁藏鸡致病性沙门菌问题将对养殖场运营产生重大影响袁因此袁对此方面展开试验调查显得十分必要遥在本次试验得到57.25%的质粒耐药基因袁通过试验检测后能得出袁当阳性基因接合之后袁大多数得到供体菌的相应抗性表型袁这将意味着对上述药物进行介导的耐药基因可能与质粒处于不同的细菌中袁并且将以较高的频率发生水平转移遥
