山东畜牧兽医 ２０１２年第３３卷 猪病的实验室诊断技术 王新 （山东省济南清区平安兽医站２５０３０６） 邢兆苗 （山东省济南清区归德兽医站） 中图分类号：￥８５８．２８ 文献标识码：Ｂ 文章编号：１００７．１７３３（２０１２）１０．００４８．０２ １猪的血尿诊断 １．２．２测定方法取洁净棉签两根，滴以生理盐水，一 １．１尿中的潜血检查 支棉签上涂粪，另一支作对照，均置酒精灯上加温片 肾、膀胱及尿路的出血性疾病以及溶血性疾病，如 刻，以破坏可能存在的几种过氧化物酶。待冷，各加１％ 猪瘟、猪丹毒、新生仔猪溶血病等，在其尿液中均含有 联苯胺冰醋酸溶液及３％过氧化氢液各２滴，观察颜色出现 血液或血红蛋白，但若仅有少量，肉眼直接看不到，必 的快慢及深浅。 须借助化学方法来测定。常用联苯胺测定法。 １．２．３结果判定如果涂粪棉签呈蓝色，而对照棉签颜 １．１．１原理血红蛋白中的铁，具有过氧化物酶的作用， 色不变，为阳性反应；假若两支棉签均呈蓝色，为假阳 可分解过氧化氢放出氧，使联苯胺氧化呈绿色或蓝色。 性反应；若两支棉签均不变色，为阴性反应。检验结 １．１．２试剂 （１）联苯胺冰醋酸饱和液；（２）３％过氧化 果，可按以下规定记录：加试剂后立即出现深蓝或深绿 氢溶液。 色者为最强阳性反应。加试剂后初现浅蓝色，Ｏ．５ｍｉｎ内渐 １．Ｉ．３ 测定方法 取被检尿液３～５ｍｌ，置洁净试管中煮 现深蓝或深绿色者，为强阳性反应。 沸，以破坏其他可能存在的过氧化物酶。冷却后加入联 １．３粪便的显微镜检查 苯胺冰醋酸饱和液数滴，再｝ＪＩ１３％过氧化氢溶液数滴，混 本法是借助显微镜观察检查粪便中的寄生虫虫卵和 合，数秒钟后即可呈现反应。 幼虫，同时也可了解到被检猪的消化能力和胃肠道有无 １．１．４结果判定 若供检尿呈绿色或蓝色，为阳性反 炎症病变。直接涂片法：取洁净载玻片１片，先滴ｌ大滴 应，颜色的深度（绿、蓝绿、蓝色、深蓝），可表示反应的 生理盐水（若用５０％甘油水溶液更好），弭以竹签挑取被检 强弱。若５ｒａｉｎ后仍不变色，则为阴性反应。 粪便少许，与载玻片上的生理盐水混匀，涂成薄层，即 １．２粪中的潜血检查 可镜检。本法简便易行，常用于检查粪便中有无寄生的 粪便中潜血阳性，见于胃溃疡、胃穿孔及胃肠道的 蠕虫卵，由于取粪量很少，检出率较低，所以要求每个 出血性疾病。 样品多涂５～６片。若在涂片中同时见到多量的红细胞和白 １．２．１原理与试剂 与尿的潜血检查相同。 细胞，则表示肠道有炎症。 ， ， ， ，１ ｉ， ，１， ， ，ｉ １ ， ， ， ， ， ， ， ， 带的位置。荐结节阔韧带的内侧后方存在坐骨神经，腹 应饲喂纤维含量高的食物，避免便秘发生。（３）患会阴 侧存在闭孔神经和闭孔动静脉，要避免伤及血管、神经 疝的犬大多数脾气暴躁，术后应尽量使其处于安静的环 或将其缝入肌肉内。闭孔内肌的剥离：用手术刀将附着 境，避免狂叫不止，引起脱肛或会阴疝复发。 在坐骨结节上的闭孔内肌的肌膜切开，抓住切口，用骨 ４结论 膜剥离器小心将肌肉和坐骨分离。用１０＃丝线进行缝合： （１）会阴疝手术应尽早进行，此时疝环小、周围肌 先将外肛门括约肌与肛提肌、尾骨肌以及臀浅肌做ｌｃｍ的 肉尚未出现萎缩，容易修补，复发几率低。（２）会阴疝 扣状缝合：然后将预先剥离好的闭孔内肌与外肛门括约 发生时间长了会使周围肌肉萎缩，修复疝孔十分困难， 肌和浅臀肌（或荐结节阔韧带）扣状缝合。形成一个倒Ｙ字 近几年笔者采用闭孔内肌转位术进行修复，没有出现复 型，肌肉修补后将皮下组织缝合，结节缝合皮肤。该犬 发现象，可见这个手术方法是可靠的。（３）如果双侧会 疝内容物多是粪便和腹膜后脂肪，肌肉萎缩严重。同时 阴疝最好分２次修补，先修补一侧，待完全痊愈后再修补 做公犬去势术。 另外一侧，两侧同时修补复发几率高，手术时间长麻醉 ３＿３术后注意事项 （１）静脉输液补充营养，用抗生素 风险也高。（４）术后和主人沟通十分必要，避免犬狂ｎｑ， 控制感染。（２）绝食３ｄ，自由饮水，之后可喂食营养 家中不要来人造访；预后饮食控制，避免便秘发生。 膏、营养液等能量高、粪便少的食物。伤口愈合拆线后 （收稿日期：２０１２－０６－－２６） ４８ ２０１２年第ｌＯ期（总第１８９期 疾病防治 ２猪的血液常规检查 角处４个大方格（每个大方格包括１６个中方格）内的白细胞 血液常规检查的项目有多种，但是目前用于猪病诊 总数。 断的项目不多，常用的有血红蛋白含量测定、红细胞计 ３细菌的分离，培养和鉴定 数、白细胞计数等。必须指出的是，血液常规检查仅仅 猪的细菌性疾病种类很多，危害不小，常见的细菌 是为Ｉ临诊诊断提供一些数据，是一种辅助诊断手段，在 病有仔猪黄痢、白痢、猪水肿病、副伤寒、猪丹毒、猪 操作时要严格遵循操作规程和注意事项，力求准确，避 肺疫、链球菌病等，其中有的疾病可以一目了然（如仔猪 免差错，同时应与临诊检查密切结合，才能得到正确的 黄痢、白痢等），易于诊断，有些疾病则一时难以确诊（如 结论。 副伤寒、猪接触传染性胸膜肺炎等），而更多的细菌病是 ２．１血红蛋白含量测定 并发或继发感染的，为了做到及时、正确地诊断猪病， 健康猪的血红蛋白值为１０．５ｇ／１ＯＯｎ￣（变动范围９．５－ 规模化的猪场有必要开展细菌的分离、培养和鉴定工 １２．０，若是血红蛋白的含量增多，见于各种原因引起的血 作，同时还可将分离出的细菌，通过抑菌试验筛选出敏 液浓缩，如剧烈的腹泻、呕吐、出大汗及某些中毒病。 感性强、疗效好的抗菌药物进行治疗。掌握了细菌学的 血红蛋白含量降低，见于仔猪贫血及各种慢性消耗性疾 检查技术，还可开展对猪舍消毒效果的测定，饮用水、 病，如慢性猪瘟、仔猪蛔虫病等 饲料中的细菌学检查等项工作。 ２．２红细胞计数 化验室开展这项工作，需要一定的设备和条件，操 红细胞计数是将一定量供检血经一定倍数稀释后， 作人员应该具备兽医微生物学的基本知识和实验室的操 计算其一定容积内的红细胞数，并换算为每立方毫米血 作技术、要求做到正确、熟练，其内容包括病料的采 液的含量，健康猪的红细胞数平均值为６００７Ｙ／ｍ ｒ变动范 集，细菌的分离培养，形态观察，生化试验和动物接种 围为５００—７００万１。红细胞增多，为血液浓缩，如脱水、出 试验等。 大汗、胸膜炎的渗出期等：红细胞减少，为各类贫血性 ４药物敏感试验 的疾病或慢性消耗性的疾病。计算按下列公式进行：每 抗菌药物在诸病防治上已得到了广泛的使用，但是 立方毫米血液内红细胞总数＝ｘ／ｇ０ｘ４ＯＯ（ｄｘ方格总数）×稀释 对某种抗菌药物长期或不合理地使用，可引起这些细菌 倍数Ｘ１０。ｘ为计数５个中方格（８０个小方格）的红细胞数。 产生耐药性。如果盲目地滥用抗菌药物，不仅造成药物 如血液稀释２００倍，为计算方便，也可将计数５个中方格 的浪费，同时也延误了治疗时机。药物敏感试验，是一 （８Ｏ个小方格）内的红细胞总数，乘以１００００，即得每立方 项药物体外抗菌作用的测定技术，通过本试验，可选用 毫米血液内的红细胞总数。 最敏感的药物进行临珍治疗，同时也可根据这一原理， ２．３白细胞计数 测定抗菌药物的质量，以防伪劣假冒产品的过期失效药 白细胞计数，对某些疾病的辅助诊断有重要的意 物进入猪场。常用的药敏感试验的方法有纸片法等三 义。多数细菌性感染和炎症，都能使白细胞增多，如猪 种，具体介绍一种：纸片法。各种抗菌药物的纸片，市 丹毒、肺炎、链球菌感染等。而一些病毒性的传染病则 场有售，是一种直径６ｍｍ的圆形小纸片，要注意密封保 能使白细胞减少，如猪瘟、流行性感冒等：某些严重疾 存，藏于阴暗干燥处，切勿受湖。注意有效期，一般不 病的后期，机体高度衰竭时，亦可见白细胞减少；长期 超６个月。 应用某种药物（如氯霉素），也可引起白细胞减少。健康猪 ４．Ｉ试验材料 白细胞的平均值为１３０００个ｍ （变动范围为Ｉ１０００～１６０００ 经分离和鉴定后的纯培养菌株，营养肉汤，琼脂平 个１。方法：（Ｉ）取清洁、干燥的小试管１支，以０．５ｍｌ吸 皿，棉拭子，镊子，酒精灯，药敏纸片若干。 管准确吸取白细胞稀释液０．３８ｍｉ，放入试管中。（２）稀释 ４．２试验步骤 血液。以血红蛋白吸管准确吸取供检血液至２０ｍ 处，用 将测定菌株接种到营养肉汤中，置３７－ｃ条件下培养 干棉球擦去管尖外壁所附的血液，立即将被检血吸入已 １２ｈ，取出备用。用无菌棉蘸取上述菌液，均匀涂于琼脂 装稀释液的试管底部，并吸取上清液反复洗净沾在吸管 平皿上。待培养基表面稍干后，用无菌镊子分别取所需 内壁上的血液数次，然后振摇试管ｌ－２ｍｉｎ。使血液与稀 的药敏纸片均匀贴在培养基的表面，轻轻压平。将培养 释液充分混合，即可成为２Ｏ倍稀释的血液。（３）充液的 皿置３７℃温箱１２￣Ｉ８ｈ后，测量各种药敏纸片抑菌圈直径 步骤和操作，同红细胞计数。（４）计数的方法与红细胞 的大小。 计数相同，但白细胞计数时用低倍显微镜即可，计数四 （收稿日期：２０１２－－０６＿２１） ４９
