94 _IJIIc"}I 杂忠2(1l7 I( 53卷) 10 j9 马铃薯糖苷生物碱粗提品对小鼠体重 及免疫功能的影响 何玉华 ,秦贵信 ,白明昧 (1.。 林农、 大学动物科学技术学院,,Jig长夼1301 18;2. 林农、 I科技 院动物科技学院.t 林 家1 32109 3. 林存市双 智岭‘Jf处斋牧iY t [k,- 站,r 。林K释I 30607) 摘要:为了更好的了解马铃薯糖苷生物碱的毒性作用,对马铃薯的皮和芽进行提取,利用其捉取的“一肺碱、 一书肺 碱的混合物x ̄t4,鼠进行灌胃。观测提取物对小鼠体重、死亡率、免疫器官指数、血清免疫球蛋白的影响 试验结果表【』I】, 铃薯糖苷生物碱中的 一茄碱(0【一solanine)和d一卡茄碱( —cha(・on!lie)对小鼠有一定的毒 作用,能够抑制小鼠体弧的 增长,不同浓度的马铃薯糖苷生物碱使小鼠免疫器官指数降低,IgA,lgM含 升高,300 rag/kg体重马铃薯糖仔乍物铖 现 的对生长的抑制和对免疫功能的毒性最大,与对照组相比差异显著(P<0.05),并对小鼠有敛多E作川 关键词:糖苷生物碱;小鼠;体重;免疫功能 中图分类号:¥858.91 文献标志码:A 文章编号..0599—6005(2017)10一()()94 04 Effects of crude extract of potato glucoside alkaloid on body weight and immune function in mice HE Yu.hua。・ .QIN Gui.xin .BAI Ming—nlei f I.College of Animal S iem・e anti Technology.Jilin Agri(・uhural University。Chang(‘hun 1301 1 8.China;2.Jilin Agiit’uhtml St・iem IJ al1tI Te(・hnology Department of Alifmal Science and Te(-hnology.Zuojia 132109,China:3.Jilin ovin( t CIlang(’hu City Shnangyang I)istri(-t Sheling Street 0fli( of’animal husbandry and vet ritory sttatio,1.CIlang(!hull 1 30607,China) Abstract:In or(1er to get a better understanding of the toxic efl ̄(:ts of’the gly( ̄oside alkah)ids,lh Il‘)1ato ski)1 IIlllI hIJ(Is wrrP Px— h-acle(1 all(1 the extrat:ts were USe(1 in mice.The etf"eets of extraels Oll}1E)dy weight.1llOI’talitv.inlmtlf/e Ol’gan index HII(I sel’LI!II iIIIIII Ll— l1I)globulin were ot)selwed. rhe test results showed that solanine(alplla—solauiue)alI(1 alpl1 l( }1a‘’()nine(al1)ha 一(’hn【’lll1 『lr)()f1 1)o— tat()glyeoalkah)ids had toxic effect Oil mi(!e.Mouse weight growlh WLIS inhil)ited.add Ihe difDrenl(‘tJIleellh’ations ol 1)Ola[o gly<‘1)alka— loi(Is lead to the lle( ̄rease of’immulle organ index of mice. the eotlterlt of lgA and lgM was!net’egtsed,al1({the inhibition ol lhe owll1 ol’mice a11(1 the toxicity to immune function were the largest in 300 rag/kg.which WtIS sign!fit‘autly diffei‘enl ft"t¨1l that oi lhe(!olltroi group(P<0.05),and caused the death of mice. Key words:Glycoside alkaloids;Mouse;Weight;Immunity C0rresp0nding author:QIN Gui—xin 我 将 动马铃薯主粮化战略,预计2020年 Bat1p 等在l9 llt:fd初 ‘次发脱r _7J铃 f 有生物碱、 主要址以茄啶为糖fj: 构成的赫碱 取1卡)5 碱,共if‘6乖}:13一肺碱币¨ 一 } 碱址d—Jj} 碱- 糖的部分水解广:物;p—tkli碱羽I^y一 -+圳ti-铖址 d一卡茄碱 特的部分水解产物 铃僻 产、储运_不1I加I 过 …I以及受剑机械或化 、 : 伤、 50%以J 的码铃薯将作为主粮消费,屿铃薯或成第 四主粮 ,屿铃薯淀粉 、马铃薯茎、叶等副产品作 为饲料的丌发也将会成为非常规饲料开发的一项 币=要研究『人J窬 然『『1『,这 马铃薯副广 Fit’t lIJ‘能含一 仃 物质 光照及物理拟伤后,会 致糖 , 物碱的迅速 收自f5I1j9J:2()l 7()2 l】 坝『lI:“I fI:”农卡1J领域 家科披汁划 题 成、累积 有关资料报道, 5铃磐淀粉 If “一… nine、 一( ̄hac(ilthle总 为0.047 4 fug/1()() ‘ Or_一 i碱(d—solallille)l乖n O/_一卜 h城(O/.一(・I1d(1I】一 (20l 2BA1)39B03);, 林农、I 科技 院艰点 科项I ll, 农院/、 (20I5) X022 ] f1 卉简介:fii』1i (1978一).1殳,剐教授, ,从 Jf动物t 养 nine)足码铃磐精甘 卜物碱的卡 肜 , ;l ,0铃 薯总糖什牛物碱的95%,比例取决t r 利t类, 或t-5 铃薯解剖部化,・般比例为1:2到1:7、 ・股成熟 J }f 1. ' f内数 :雨I研究I f1:.I —maiI:87434854l@({ I.(・Olll 通 ̄Itfl: :朵 Il^1.价,l・:一mail: jgx@ibm du(I1 的, 铃薯 糖 物碱含量1~1o rag/100 g,最 人人增加, 化后,将试验 干l1对照纰小鼠分圳进行削," l: 腹腔,取…J】m 、脾脏、胸腺,剁除脂肪组织和结缔 组织,称 }j 霞艟;(3)迅速采取肝脏、肾脏和肿脏 小趟过20 111g/100 g,发芽或变绿『f1f JI,达500 tn 100 g,女fl果超过安余 准, 易引起,Ji 发 :所以小 验将马铃磐歧、 叶】粗提的 进行称重.取脾Jt/i!、胸腺放¨j 仃仃尘婵盐水的甲【II1. 中,洗净后川滤纸吸f,剔除结缔组织干¨脂肪 称 湿重,分)=;lJ汁3 :脾脏指数和胸腺指数 1.4.3测定指标及方法 卜物碱 一 碱、 一 茄碱的混合物X.J4,鼠进仃 淞¨,观测其刈‘小鼠的体 、l夕匕I、:牢、免疫器宵指 数、 清免疫球 濉 剂量与 的影响,探讨 铃薯糖廿生物 仙赴埘小鼠的毒性作』I J,研究码铃 皮、芽提取物的 之lhJfl,j关系,为 铃蜉及其副产 I^ (1)体承测:l :每隔7 tl 1L 8时饲i喂前埘小鼠 进行称重,共称f 3用,把小鼠放存烧杯L}t进仃称 作为l"d料的 发奥定J 础。 1材料与方法 1.1 f]J铃薯糖 物碱卡fl捉品的制箭取发芽的 t 铃 数个,把,5铃 削皮(2~3 IIIIII),之后收集 歧、爿 的新鲜样- 称取40 g 铃 皮、芽的新鲜 ?} 样品,髓Jj 500 mI 的 lJ氐烧瓶『fl,加入乙醇一 乙峻 合液(体 比为100:30),6-磁/『J搅拌器巾搅 扑l5 Inill,过滤收集滤液、样r 将 放人索氏脂胁 捉 中,训1 水浴 温度至6()cj【:~65 ,抽捉I6 h,将滤液减压旋转…收至浸膏状,川5%硫酸将残 物溶解、过滤滤液中加入浓氨水州节pH ff[为 …~Il,冷冻、离心 C淀用l%浓 的氨水进行洗 涤, 刮洗涤液滞消,取沉淀进仃f:燥,即得到,0铃 f1=生物碱机提。 ^ 马铃磐 f i物碱的、卡【【捉 l川i i 有 一娟碱 仪一卡茄碱等 他的糖 物碱 1.2 试验动物4川龄清沽级雄 小鼠48只.体 (2(1±2)g,山 ‘ 林人学实验动物¨t心提供在夸 汕l1【条件下常规饲养1川,适应环境.川J 试验 1.3 试验仪器 1 一1 8B—C 高速离心饥 (常州 合仪器 );FM004N fU了分析天平(I 海 、卜 科学仪器钉 公 习);ACB一4A1超净:L作台 ( 心离科技有限公・d)I/J、鼠灌W装 、手术剪、_『. 术 J、2 L注射 等动物解剖 械 1.4试验方法 1.4.1 试验设汁将48只4 龄雄 小鼠随机分 为5 ,每组l2 ,一1I:巾A组为刈‘J!({ ,饲喂 础II 粮 C、D、E为试验绀,(37.5 ll1 kg体重・t1绀、75 Il1 kg体重・(I组、l50 m kg体重・tI 、300 IIl kg 体 -(I组) 1.4.2 咀液采集fl I织样本采样 (1)于21 I J}I ,I t先对所有小鼠称 ,何组取4 !小鼠 球采 ¨IL,采取的血液,窜濉放置4 I1后,放入4 冰箱过 仪.第2天2 000 r/min离心10 lllilI,I及I取上消液, J 一20 保 ;(2)采用颈椎脱 的力‘法将小鼠处 畦,并i 求讯 ,精确到o.ol (2) 『I 指数: nn 指数(IT1 /g)=肝脏 /体 匝;脾脏指数(…g/g)=脾脏币=/体重;胸腺指数 (mg/g)=胸腺弧/体重 (3)1(i1.{lIf免疫球蛋白:lg( 、lgA、lgM的测定 采 用lg( 、lgA、IgM f』{=剂盒(免疫比浊法),购 南京建 成牛物工 研究所 1.5数抓分析 数据J、 川SAS8.1统 软件进行 处 ,两 n1J比较用,检验,符 问比较用A ()VA 方法 试验 用平均值±怀准误表示,采¨j SPSS20.0软什进行分析 2结果与分析 2.1 -5铃 }”ffj:牛物碱籼捉M刈_/j、鼠体重的影响 从表1 IIJ‘ .濉注1 5铃 祧f1=,fi物碱粗提 , 验 第1刷,各组小鼠体重虽然均 f 升趋势,各绀之问 筹异均不 (,,>o.05), 址随着灌注剂 的增 加,增 牢降低;第2剧丹始,A 、B组、(:绀体 呈上升趋势,D 、E组体重下降,D组、E纰与A 、 B纰、C 比后 著(, <o.05);第3周,A绀、l{ 组、体雨‘ :7t 趋势,C组、D绀、I 组体重F降,I) 、 纰I=j A组、B 、C组相kL);--? 著(P<o.05),试 验结束后1)绀怵i宦降低3.1%、E 降低7% 2.2马铃辫特 生物碱粗提- x.Pl,鼠免疫器 r{’指 数的影响从 2可知,灌 }铃薯糖fj:牛物触 提品后,胸腺指数降低,J】l纠【、E 与A组、B 、(: 绀十H比差蚌{IIj’ :(, <0.05);脾脏指数降低,C 、1) 绀、E Il A纠【、B绀、(: 1:lI比差异 兹:(,’< 0.05); 脏指数降低,C组、D纰、E组与A绀、1{ 相比篪异{ll! -(,’<0.05) 2.3 5铃 栅f1:生物铖粗捉- 刈_/J、鼠血}ffj=免疫球 蚩白的影响 从表3町知,涨 ,0铃薯糖" 物碱 粗提l{i_?I后 消【fI的lgG含谜先7t 高后降低,各绀之 I J差异 :(, >0.05),D纠【l IgG含jl}』{支f 。 ; lgA、lgM均丁1‘f ,C组、D }【、F }【 j A纠【、I{纠【十II比 差异 并(,’<0.05),E组的1gA、lgM含 最^’ 96 中14曾医杂志2017 (第53卷)第10期 Chinese Journal of V}】l¨inm’)Mrt im 注: 行数据中,肩标 {=f仆d 啦表,J÷差异不娃著(P>0.05),肩标 母完食不川表示差异 (P<0.05),下表例 表2 马铃薯糖苷生物碱粗提品对小鼠免疫器官指数的影响 (mg/g) 3讨论 细胞内外的离子平衡所致。 3.2马铃薯糖苷生物碱粗提品对小鼠免疫器官指 3.1 马铃薯糖苷生物碱粗提品对小鼠生长性能的 影响 本试验的研究结果表明,随着添加剂量的升 高,D组、E组小鼠的体最下降,D组、E组与A组、B 组、C组相比差异显著(P<0.05),试验结束后D组 体重降低3.1%、E组降低7%。季宇彬 的研究表 数的影响 本试验中,灌注马铃薯精骨,} 物碱粗提 品后,胸腺指数、脾脏、肝脏指数降低,C绀、1)绀、 组与A组、B组相比差异显著(P<0.05) 明,把茄碱通过给小鼠灌胃后得出,低剂量组(177 arg/kg体重、236 rag/kg体重)没有死亡现象,随剂 的增加(315 rag/kg体重、420 mg/kg体重、560 mg/kg体重)时,小鼠死亡数量增加,高剂量(747 降低体液免疫和细胞免疫的免疫反应活性,降低机 体抵抗能力. 其主要原因有以下两个 面:(1)马铃 薯糖苷生物碱粗提品中的Or.一茄碱不1l 一卡肺碱本 身能够降低免疫功能;(2)也有 能足仪一 铖l不1l O/.一卡茄碱通过抑制肠道中有益微乍物的增值,进 而抑制其有益代 产物的产生而降低免疫功能。 内脏器官指数通常是毒理学试验过 If ,反应 药物对动物内脏损害程度的灵敏『n『有效的一坝指 标 ,能够很好的反映试验用药x寸符个器 的影 响,尤其是反映毒性大小的一项重要的指标 脏器 指数有所增加表示脏器会有水肿、允 、增乍、肥大 等情况发牛,脏器指数下降则表示脏器有所萎缩、 发乍退行性的变化等 马铃薯特什乍物碱粗提 品中含有仅一茄碱和 一卡茄碱等精仔生物碱, 关d一茄碱和Or.一卡茄碱的研究结果表明.将 剂 mg/kg体重)3 d之内全部死亡 、试验过程当中发 现未死亡的小鼠有轻度的胃肠炎的症状,食欲下 降,出现便秘、呕吐、流涎等现象。而死亡小鼠呈现 头部肿胀、体温升高、腹泻、便血等症状。在一定程 度 卜说明马铃薯皮中的Or_一茄碱( —solanine)和 d一卡茄碱( 一chaconine)对小鼠生长发育有一定的 影响 , Baker等。。 使用强饲法将马铃薯芽的生物碱提 取物作用于仓鼠,试验结果表明,马铃薯芽的生物 碱提取物对胃肠道有一定的毒性作用,出现胃胀、 十二指肠溃疡、小肠出血、坏死。 量为100 rag/kg体重仅一茄碱或1O0 Ing/kg体 比 例为l:2.5的 一茄碱和O/.一卡茄碱混合物给予仓 鼠,导致了类似的胃肠道胀气,但并没订其他器官 的组织病理学改变 ” 生物碱还能够干扰Na 和Ca 跨细胞膜的运 输。Michalska等 研究表明, 一茄碱能够抑制大 鼠十二指肠上皮细胞细胞膜上Ca 的运输,而 一 卡茄碱则对于Na 的主动运输则起到明显的抑制效 果,且抑制的作用强于仅一茄碱。因此,胃肠道胀气 很可能因为生物碱对离子通道的影响进而影响到 3.3 马铃薯糖苷生物碱粗提品对小鼠 消免疫球 蛋白的影响 本试验中,灌注马铃磐糖 牛物碱 提品后血清中的IgG含量先升高后降低,各纰之nJJ 差异不显著(P>0.05),D组中IgG禽 最高;lgA、 Chin< sP Join’Hal of Vetet‘inar)一Me<tit・ine 中 跃杂志2017年(第53卷)笫l0期 97 lgM均升高,C组、D组、E组与A组、B组相比差异 显著(P<0.05),E组的lgA、IgM含量最高。 参考文献: [I] 何玉华,朵贵信.姜海龙,等.马铃薯淀粉渣在动物生产中的应 用研究进展[J].中国畜牧杂志.2016,53(8):73—77. [2] I:laup M Extrait f{.une lettre<le M[J].Baup aux plusietu s Nouvel— les subslalt(・Ps inA))11 I826.31(3):108—109. 血清免疫球蛋白lgG、IgA、IgM是人体内的3种 免疫球蛋白,我们又称抗体,是检查体液免疫水平 常用的方法,通常检测lgG、lgA、lgM这3类免疫球 蛋白就可以代表血清免疫球蛋白的总体水平 这3种抗体结构与功能都是不一样的。其中 lgG是主要的再次免疫反应抗体。lgM是主要的初 次免疫抗体。JgA是黏膜免疫中的主要分泌型抗 体。免疫球蛋白的主要作用是介导动物的体液免 疫,血清中抗体含量的高低在某种程度上反映了动 物机体对某些疾病的抵抗力.1 。血清免疫球蛋白 的测定是检查体液免疫水平常用的方法,通常检测 [3] (;ePLINAS P.Protein elll hment ot’potato proc。essing waste through yeast felmentaliOll l J].Biores Te(・h.2007.98:l 138一l 143. [4] 零字彬,孙晶趟,郎朗. 5铃薯中生物碱的毒理学研究进腱 [J]. 5铃兽产业 j粮食安全,2009,7:84—85. [5] 睦晓茹.尼葵素及莨若烷类生物碱的叶I毒、检测及评价研究 【D].兰州:兰州大学.20l3. [6] Baker I】C.Keelet R F.el a1.Lesions of Pot to sponfl and exla(‘ ted potato spomt alkaloid toxieily iI1 Syrian hanlslers[J].Clinit’al I'oxk-ology。1987.25(3):199-208. [7] Mi(・halska L.Nagel G.Swiniarski E。et a1.The em、PI ol’a—St). IgG、IgA、IgM这3类免疫球蛋白就可以代表血清免 疫球蛋白的总体水平。 IgG抗体激活补体,中和多种毒素,本试验中随 着马铃薯皮添加量的增多IgG先升高后降低,说明 在一定毒性范围内lgG的分泌能力能随着毒素的增 加能被激发出来,一旦超过某一毒性范围,这种分 泌能力就会下降。 IgA和IgM跟消化系统和呼吸系统的关系比较 [9] 1anine on the active calciuni trallspon in rat intestine J 1.Genetit・ Pharma ̄-olo ,1985,l6(13):69-70. [8] 筐晓茹,沈敏,刘伸.龙葵素中毒及检测的研究进展[J].中困 同法鉴定。2013.67(2)2:35-41. Per( ival( C.The influence of light upon gly(、oalkaloid and ehlom— phyll/_it-t-umulation in potato tubet ̄(Solanum to1)erosuln L.) [J1.Plant Science.1999,145(2):99~107. [10] Son Y().Kim J,Lim J C.el a1.Ripefruit of Solanom nigrurn 1 .inhilifts cell growth antl induces apoptosis in MCF一7 rells fJ],Fo<xl and Chemit-al Toxi(・ology.2003.41:1 421一l 428. [11] 张绍磊.膀胱内灌注加龙葵方预防膀胱癌复发的疗效观察 [J].现代中西医结合杂志,2008.17(3):427—428. et n,.Induction o1 apoptosis in HepG [12] Y B Ji。S Y Gao、C F Ji.密切,是黏膜免疫中的主要分泌型抗体 j,本试验 中IgA,IgM含量增加,而且在灌注试验过程中会观 察到小鼠有轻度的胃肠炎症状,肠道是病菌、毒素 2 cells bv solanine and Bel一2 pl・otein『J].Journal of Ethnophar. Ilia( olog),.2008,l 15:194—2o2. 等进入机体的第一道屏障,可能会对肠道黏膜造成 损伤,导致gA,IgM上升。 4小结 [13] 刘艳芳.糖苷生物碱的研究进展[J].赤峰!学院学报,2014,30 (1):84-85. [14] 1.,angkihle S.St・hredm’M.Stewarl D.el a1.The acute toxM— ty of high(1oses nf the glycoalkaMds.a—solanine and a一 马铃薯糖苷生物碱粗提品对小鼠有一定的毒 ('hat・onine.i i1 the Sviran Golden hamsterf J].Journal of Aig[i. 【.ohtnal anti Food Chemistlw,2008,56(I 8):8 753-8 760. 性作用,能够抑制小鼠体重的增长,不同浓度的马 铃薯糖苷生物碱使小鼠免疫器官指数降低,IgA,IgM [15] Li.lfng GAO.Liiani-ji WEN.Hao YU.Kno<,kdown of Stat3 Px— pressinn using RNAi inhihits growth of laryngeal ttlmors in vivo 含量升高,300 rag/kg体重马铃薯糖苷生物碱呈现 的对生长的抑制和对免疫功能的毒性最大,与对照 组相比差异显著(P<0.05),并对小鼠有致死作用。  .[J]. ta Pharmaeologit-a Sink a,2006;27(3):347—352. 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