四川医学2013年1月第34卷(第1期)Sichuan Medical Journal,2013,VoL 34,No.1 ●基金论文● 论著 应用乌司他丁治疗严重多发伤血清IL-6、IL-8、IL-10、 TNF-0【的表达及临床意义 陈宁波△,曾 杰,李艳,,陈仿,刘 建,胡卫建 (四川省人民医院急救中心外科,四川成都610072) 【摘要】 目的探讨应用乌司他丁治疗严重多发伤血清IL_6、lL-8、IL.10、TNF. 的表达及临床意义。方法 选取 我院就诊的严重多发伤患者8O例,分为治疗组4o例(应用鸟司他丁治疗)和对照组4O例(未用鸟司他丁治疗)。分别于 发痛就诊后第0.5、l、2、3、5、7d静脉取血。测定两组血清IL-6、IL-8、IL-10、TNF一仪的变化,比较二者之间的差异。结果 多 发伤患者IL-6、IL.8、IL.10、TNF.d的含量在伤后即升高,第1—3天达峰值后开始下降。IL-6、IL-8、TNF- 的含量在应用 鸟司他丁治疗后在早期时段均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。鸟司他丁能促进抗炎因子lL-1O的产生,与对 照组差异有统计学意义(P<O.01)。结论 乌司他丁早期即能降低促炎因子IL-6、IL・8、TNF— 的产生和促进抗炎因子 IL.10的产生,抑制多发伤患者的炎症反应,提高其抢救成功率。 【关键词】 乌司他丁;多发伤;细胞因子 【中图分类号】R 541 【文献标识码】A 【文章编号】1004-0501(2013)01-0001-04 The expression and clinical signiifcance of IL-6、IL-8、IL・10 and TNF・n in severe multiple injuries after Ulinastatin treatment.CHEN Ning-bo,ZENG Jie,LI Yan,et a1.The People 5 Hospital ofSichuan,Chengdu,Sichuan 610072,China 【Abstract】Objective fo investigate the expression and clinical signiifcance of IL-6、IL一8、IL-10 and TNF— in severe multiple injuries after Ulinastatin treatment.Methods 80 cases of severe multiple injuries were divided into treatment group(40 cases with Ulinastatin treatment)and control group(40 cases with no Ulinastatin treatment).The level of 1L-6、IL-8、IL-10 and TNF- in veno・blood selalm were detected when the 0.5、l、2、3、5、7 days after trauma,Compare the difference between the two groups.Results The level of 1L一6、IL-8、IL一10 and TNF・ increased immediately after trauma,and the peak value Was a- chieved at l一3days.The level of these cytokines in treatment group were lower than those in control group at prophase.there was statistical singiifcance in two groups(P<0.01).Ulinastatin call promote the level of anti-inflammatory IL-10 at prophase.there WaS statistical significance in two gorups(P<O.01).Conclusion Ulinastatin can reduce the the level ofIL一6、IL-8、and I'NF一仅 (proinflammatory factor),but it can promote the level of 1L-10(anti-ilfnammatory factor).Ulinasta tin can inhibit the inflammatory reaction of severe multiple injuries and improve the achievement ratio. 【Key worsd】 Ulinastatin;multiple injury;cytokine 多发伤是指同一致伤因素导致两个或两个以上解 症反应中扮演了重要角色…。乌司他丁(UTI)是从健 剖部位的损伤,严重多发伤(severe multiple injuries)是 康男性尿中提取精制的一种糖蛋白,含143个氨基酸, 指由单一致伤因素所造成的多解剖部位的严重损伤, 其分解产物也具有很强的抑制水解蛋白酶的作用一J。 常伴有大出血、休克和严重的生理功能紊乱,重者危及 本课题重在研究乌司他丁治疗严重多发伤后,炎症 生命。其严重程度则视其ISS值(损伤严重度评分)而 子IL-l5、IL.8、IL-10、TNF. 的变化规律,探讨乌司他丁 定,凡ISS>16者定义为严重多发伤。随着社会的进 对严重多发伤的治疗作用。 步,严重多发伤越来越呈现增高之势。由于严重多发 伤病死率高,目前还没有一种很好的方法能减低其病 1资料与方法 死率。近年来发现多种免疫物质在多发伤机体应激炎 1.1一般资料:选取我院急救中心2009—2011年收 【基金项目】四川省卫生厅科研项目(编号:090484) A通讯作者 ・2・ 四川医学2013年1月第34卷(第1期)SichuanMedical Journal,2013,Vo1.34,No.1 测量OD 。值。以标准品浓度作横坐标,OD值作纵 治的严重多发伤患者8O例,随机分为两组。其ISS值 、作,均>16。乌司他丁治疗组40例,男l4例,女16例,年 龄21—82岁,平均90.5岁;对照组40例,男24例,女 坐标,绘制标准曲线。通过标本的OD值在标准曲线 上查出其浓度。 1.3 仪器:美国BIO—RAD公司的CODA全自动酶 16例,年龄25—75岁,平均30.7岁。全程使用乌司他 丁80万U静脉滴注1次/d。分别于发病就诊后第 标仪。 0.5、1、2、3、5、7d静脉取血,及时分离血清后置-40。c 保存备用。对照组4O例,除常规治疗手段外,未使用 乌司他丁治疗。 1.2测定方法:IL-6、IL-8、IL.10、TNF. 含量测定采用 双抗夹心酶联免疫吸附测定法(ELISA法),试剂均由 深圳欣博盛科技有限公司提供,严格按试剂说明书操 I.4统计学方法:数值用( ±s)表示,数值统计均采 用SPSS11.5软件计算,多组比较采用单因素方差分析 的方法。P<0.05为差异有统计学意义。 2结果 2.1血清IL-l5含量变化:见表l。 ( ±s) 表1血清IL_6含量变化3讨论 程 J。已确认对全身炎症反应综合征过程有重要影响 的促炎症细胞因子主要有TNF-仅、IL-1、IL-6和IL.8 多发伤是指单一因素造成的2个或2个以上解剖 等,此外还有下调炎症反应的抗炎症细胞因子如IL. 1O-4 J。部位的损伤,其严重程度则视其ISS值(损伤严重度评 分)而定,凡ISS>16者定义为严重多发伤。其伤情普 遍都很严重、休克发生率很高、易出现严重低氧血症和 发生感染、病死率高。严重多发伤病死率高,救治难度 大,患者很容易出现MODS。为什么严重多发伤很易 出现MODS呢?目前学界公认为一旦发生严重多发 这些细胞因子的作用左右着多发伤患者SIRS 和MODS的发展方向。 TNF. 主要由巨噬细胞产生,是诱导MODS时炎 症细胞反应中的最初介质,是炎性介质连锁反应中最 早的启动因子。它主要通过以下几点诱导炎症反应: 诱导IL—I、IL-6和IL一8等多种炎性因子产生,同时炎性 伤,就会发生一系列失控性炎症反应,机体释放一系列 炎性介质,导致序贯性发生的全身炎症反应综合征 (SIRS),进一步发生脓毒症及MODS,这是一个动态过 因子又反作用于巨噬细胞,使单核一巨噬细胞产生更多 的TNF.仅,通过“扳机样作用”触发了炎症介质“瀑布 样级联反应”对重要脏器造成毒性损害;TNF一0【还可以 四川医学2013年1月第34卷(第1期)Sichuan Medical Journal,2013,VoL 34,No.1 ・3・ 使毛细血管通透性增加,导致局部组织缺血和血栓形 低灌注和酸中毒;④有效地控制血糖,减少胰岛素使用 时间;⑤抑制机体过度的炎症反应,阻止炎症递质如肿 瘤坏死因了一0【(TNF- )、白细胞介素.1(IL.1),IL-6、 成;TNF-Ot也可直接引起组织细胞GR(糖皮质激素受 体)表达下调,低GR的组织细胞(如巨噬细胞)继而 可产生更多的炎性介质。血清中TNF. 的浓度与炎症 反应程度呈正相关。 IL-6主要由单核细胞在IL.1、TNF.0【等诱导下产 生,也可由激活的巨噬细胞、内皮细胞、成纤维细胞等 IL-8、前列腺素等的释放,防止多器官功能障碍综合征 的发生。 本研究主要研究了发生严重多发伤后参与炎症反 应的主要炎性介质的变化规律,以及应用乌司他丁治 产生。它是多发伤炎症反应中刺激急性反应蛋白合成 的主要因子l5 J。目前认为IL-6的大量释放是一个危险 信号,IL-6含量的增多,与创伤患者的死亡密切相关; 创伤后患者的血浆中IL-6水平显著升高,则往往发展 为MODS。有文献报道IL-6浓度可作为组织损伤的判 断依据,创伤后早期血清IL-6含量可作为判定多发伤 患者预后的一个重要参考指标。 IL-8是一种中性粒细胞趋化因子。IL—l。TNF和脂 多糖均能诱导单核细胞、巨噬细胞、内皮细胞、成纤维 细胞和表皮细胞等合成和分泌IL.8,它可促使SIRS早 期中性白细胞的活化及随后的中性白细胞弹性蛋白酶 的释放。IL-8主要参与免疫、代谢和炎症急性期反应 的调节,过多分泌可损伤正常细胞和组织,参与肺损 伤,与多脏器功能衰竭的发生有关。 IL一1O是一种抗原性T辅助细胞2类(Th2)因子, 具有下调Thl类细胞表达Thl类细胞因子,并拮抗 Thl类细胞因子的作用,它是维持细胞因子网络平衡 的重要负调节机制。IL.1O的表达与IL=6、IL.8、TNF. 的表达有相关性。随着创伤及炎症的发生,促炎因子 (IL-6、IL-8、TNF)反应性增高,抗炎因子(IL一10)也随 之升高,以拮抗高水平的促炎因子。 参与严重多发伤的免疫因子及炎性介质改变是多 种多样的、它们也是互相影响的。TNF-仪、IL-6、IL-8、 IL・10主要参与了这个进程。伤后动态观察患者这些 血清细胞因子水平的变化,有助于病情的评估及预后 的判断。特别是血清IL-6浓度可作为判定多发伤患者 预后的一个重要参考指标。 乌司他丁(UTI)是由Beuer和Reich于1909年首 先从男性尿液中分离纯化的一种广谱胰蛋白酶抑制 剂,含143个氨基酸,为一种糖蛋白-6 J,具有多种重要 的药理作用:①能广谱地抑制多种蛋白酶,稳定溶酶体 膜;②抑制溶酶体酶与炎症介质的释放,清除氧自由 基,改善内脏器官与细胞损伤;③改善体克时的循环状 态-7 J,保护机体免疫力和吞噬细胞功能,改善胃肠循环 疗严重多发伤后这些炎性介质的变化规律,比较二者 之间的差异。表1显示发病就诊后48h内乌司他丁治 疗组IL一6含量明显低于对照组(P<0.01),病程第一 周中,治疗组IL-l5含量高峰出现时问较对照组明显后 移。表2显示发病就诊后48h内乌司他丁治疗组IL.8 含量明显低于对照组(P<0.005),病程第一周rf1,治 疗组IL-8含量高峰出现时间较对照组明显后移。表3 显示乌司他丁治疗组患者发病就诊后2d内IL.10含量 均高于对照组(P<0.01),治疗组IL.1O含量高峰明显 后移。表4显示发病就诊后24h内乌司他丁治疗组 TNF一 含量明显低于对照组(P<0.005),提示病程第 一周中,治疗组TNF. 含量高峰出现时问较对照组明 显后移。 多发伤患者IL-6、IL.8、IL一10、TNF. 的含量在伤 后即升高,第l一3d达峰值后开始下降。IL-6、IL-8、 TNF一仅的含量在应用乌司他丁治疗后在早期时段均低 于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。乌司他丁 能促进抗炎因子IL.10的产生,与对照组差异有统计学 意义(P<0.01) 综上所述,多发伤后一些主要的免疫因子及炎性 介质参与了炎症反应这个进程。从这些炎性介质的变 化规律,可以监测多发伤的预后。在临床中应用UTI 能减轻严重多发伤患者炎性介质的释放,抑制全身过 度的炎症反应,防止严重多发伤患者MODS的发生,提 高抢救成功率。 参考文献: [1]Collison LW,Workman C.1,Kuo Tr,el a1.The inhibitory cytokine IL-35contributes to regulatory T—cell funciton[J].Nature,2007.450 (7169):566—56 [2]薛庆华.乌司他丁对体外循环术后肺损伤的保护作用[J].心血管 病学进展,2005,26(2):161—162 [3]Tsehoeke SK,Hellmuth M,Hostmann A,el a1. the earlv second hit in trauma management augments the pminflammatory immune response to multiple injuries[J].J Trauma,2007,62(6):1396—1404 ・4・ 四川医学2013年1月第34卷(第1期)Sichuan Medical Journal,2013,Vo1.34,No.I 论著 暂时性nq:f-]阻断时门体分流对大鼠肝脏能量代谢的影响 翁敏,骆助林,曾维政 ,汪涛,田伏洲,戴睿武,黄竹,程龙,王 华 (成都军区总医院消化内科,普通外科,四川成都610083) 【摘要】 目的比较暂时性肝门阻断时,门静脉分流和阻断对大鼠缺血再灌注后肝脏能量代谢的影响,为临床上减 轻肝缺血再灌注损伤选取手术方式提供参考。方法将大鼠分为假手术组、实验组和时照组3组,制作门颈静脉转流下 大鼠肝脏缺血再灌注模型,观察大鼠术后lh、6h、24h、3d及7d肝脏能量代谢变化。结果①术后各时相点对照组RCR 值和P/O均显著低于实验组,恢复正常时间对照组也晚于实验组;②实验组于术后各相应时相点肝细胞ATP含量均高于 对照组,并且恢复正常也比对照组较早。结论 暂时性肝门阻断时门体分流处理能够改善能量代谢,提高缺血再灌注后 肝脏的抗损伤能力。 【关键词】 缺血再灌注损伤;动物模型;门体分流;能量代谢 【中图分类号】 R-332 【文献标识码】 A 【文章编号】 1004-0501(2013)01-0004-03 The Protection effcet for energy metabolism of temporary portocaval shunt for the ischemia reperfusion injury in rats liver.WENG Min,LUO Zhu—lin,ZENG Wei-zheng,et a1.Chengdu General Military Hospital,Chengdu,Sichuan 610083,China 【Abstract】Objecitve A model of ischemia reperfusion injury of rat liver with portal-cervical bypass established in this experiment to compare diferent effect on rats energy metbaolism between the group of portal・cervical bypass and that of interruption of poflla vein,which provides a reference for clinical operation manner to reduce ischemia rePerfusion injury in liver surgery. Methods A model of ischemia reperfusion injury of rat liver with portla-cervical bypass established in this experiment to compare diferent effect on rats eneryg metabolism between the group of portal・cervical bypass and that of interruption of portal vein.Re・ suits The high ATP concentration,RCR and P/O at each corresPonding time—Point,and shorter recovery time in bypass group than that in interrupted group was found in this experiment.Conclusion The current results show that employing portocaval shunt method may improve energy met abolism of rat liver after operation. 【Key worsd】 ischemia/reperfusion;animal model;portocaval shunt;eneryg metabolism 肝脏手术过程中经采取肝门阻断措施防止术中过 门阻断的肝缺血再灌注模型,比较门静脉分流和阻断 多出血,由此导致的肝缺血再灌注损伤是肝脏外科重 对大鼠缺血再灌注后肝脏能量代谢的影响,试图为临 要的临床病理生理过程,影响到肝脏部分切除手术后 床上选取减轻肝门阻断后的缺血再灌注损伤的手术方 的生存率,因此在肝部分切除过程中如何采取措施,减 式提供参考,现报告如下。 轻肝脏缺血再灌注损伤具有重要意义。本研究采用肝 【基金项目】 全军 十一五”重大专项课题(编号:08Z012) △通讯作者,E.mail:zengweizheng@l63.com [4]Mkhoian GG,Ter-Pogosian ZR,Gasparian MG,et a1.Immune reac- 学,2009,29(6):25—26 tivity and cytokine status in polytrauma.Anesteziol Reanimatol,2009, [7] Ok'uhame Y,Shiraishi M,Higa T,et a1.Pxoteetive effects ofuli— 4:60—65 nas-tatin against ischemia reperfusion injury[J].J Surg Res,1999, [5]Yadav K,Zehtabehi S,Nemes PC,et a1.Early immunologic respon一 82:34—42 8es to trauma in the emergency department patients with major injuries. 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