・检验与临床・ ２０１２年１月第５Ｏ卷第２期 呼吸道合胞病毒性毛细支气管炎中嗜酸性粒细胞 趋化因子的作用和临床意义 袁潮铜 （浙江省湖州市中医院儿内科，浙江湖州３１３０００） 【摘要】目的探讨嗜酸性粒细胞趋化因子在呼吸道合胞病毒性（ＲＳＶ）毛细支气管炎患儿血、痰中的临床意义。方法选 取来我院就诊的毛细支气管炎患儿４８例作为观察组，将观察组患儿按病情程度分为轻、中度和重度毛细支气管炎 两组，其中轻、中度组３２例，重度组１６例，对照组的研究对象为我院１８例无喘息病毒性肺炎患儿。观察组及对照组 患儿血清和痰中的Ｅｏｔａｘｉｎ水平测定采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验。结果对治疗前后的轻、中度组及其重度 组患儿的血Ｅｏｔａｘｉｎ水平进行比较，差异有统计学意义（Ｐ＜０．０１）；与轻、中度组患儿血清和痰液中的Ｅｏｔａｘｉｎ水平比 较，肺炎组患儿差异具有统计学意义（Ｐ＜０．０１）；血清中的Ｅｏｔａｘｉｎ水平在轻、中度组和重度组中无显著性差异（Ｐ＞ ０．０５）；与轻、中度组痰中Ｅｏｔａｘｉｎ水平比较，重度组无统计学意义（Ｐ＞０．０５）。而与恢复期血清中的Ｅｏｔａｘｉｎ水平比较， 肺炎组具有统计学意义（ｔ９＜０．０５）。结论血清和痰中Ｅｏｔａｘｉｎ水平在毛细支气管患儿中会显著偏高，因此Ｅｏｔａｘｉｎ是 毛细支气管发病的一个重要因素。 ［关键词】嗜酸性粒细胞趋化因子；毛细支气管炎；呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）；趋化因子；无喘息病毒性肺炎；双抗体夹 心酶联免疫吸附试验 ［中图分类号】Ｒ７２５．６ 、 【文献标识码】Ｂ ［文章编号】１６７３—９７０１（２０１２）０２—００６８—０２ Ｔｈｅ ｒｏｌｅ ａｎｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌ ｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃ ｆａｃｔｏｒ ｉｎ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｓｙｎｃｙｔｉａｌ ｖｉｒｕｓ ｂｒｏｎｃｈｉｏｌｉｔｉｓ ＹＵＡＮ Ｃｈａｏｇａｎｇ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ，Ｈｕｚｈｏｕ Ｃｉｔｙ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ ＴＣＭ，Ｈｕｚｈｏｕ ３ １ ３０００，Ｃｈｉｎａ 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅ ｏｆ ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌ ｃｈｅｍｏｋｉｎｅｓ ｉｎ ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｓｙｎｅｙｔｉａｌ ｖｉｒｕｓ（ＲＳＶ） ｂｒｏｎｃｈｉｏｌｉｔｉｓ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｈａｉｒ ｃｅｌｌｓ ｏｆ ｂｌｏｏｄ ａｎｄ ｓｐｕｔｕｍ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ａｌｌ ｏｆ ４８ ｃａｓｅｓ ｗｉｔｈ ｂｒｏｎｃｈｉｏｌｉｔｉｓ ｉｎ ｏｕｒ ｈｏｓｐｉｔａｌ ａｓ ｏｂｓｅｒｖａｔｉｏｎ ｇｒｏｕｐ，ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｓｅｖｅｒｉｔｙ ｔｈｅｙ ｗｅｒｅ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏ ｍｉｌｄ，ｍｏｄｅｒａｔｅ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｓｅｖｅｒｅ ｂｒｏｎｃｈｉｏｌｉｔｉｓ ｇｒｏｕｐ，ｍｉｌｄ ｔｏ ｍｏｄｅｒａｔｅ ｇｒｏｕｐ ｈａｄ ３２ ｃａｓｅｓ，ｓｅｖｅｒｅ ｇｒｏｕｐ ｈａｄ １６ ｃａｓｅｓ．１８ ｃａｓｅｓ ｏｆ ｖｉｒａｌ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｗｉｔｈｏｕｔ ｗｈｅｅｚｉｎｇ ｉｎ ｏｕｒ ｈｏｓｐｉｔａｌ ａｓ ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ．Ｔｗｏ ｇｒｏｕｐｓ Ｅｏｔａｘｉｎ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ａｎｄ ｓｐｕｔｕｍ ｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ ｂｙ ｄｏｕｂｌｅ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｓａｎｄｗｉｃｈ ｅｎｚｙｍｅ—ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｂｅｆｏｒｅ ａｎｄ ａｆｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｏｆ ｍｉｌｄ ｔｏ ｍｏｄｅｒａｔｅ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｓｅｖｅｒｅ ｇｒｏｕｐ ｏｆ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｗｉｔｈ ｂｌｏｏｄ Ｅｏｔａｘｉｎ ｌｅｖｅｌｓ，ｔｈｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｗａｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ（Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）．ｗｉｔｈ ｍｉｌｄ ｔｏ ｍｏｄｅｒａｔｅ ｒｇｏｕｐｓ ｉｎ ｔｈｅ ｓｅｒｕｍ ａｎｄ ｓｐｕｔｕｍ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ Ｅｏｔａｘｉｎ ｃｏｍｐａｒｅ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ ｇｒｏｕｐ ｏｆ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｗｉｔｈ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ ｆＰ之０．０ １）．Ｓｅｒｕｍ Ｅｏｔａｘｉｎ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｍｉｌｄ ｔｏ ｍｏｄｅｒａｔｅ ｇｒｏｕｐ ａｎｄ ｓｅｖｅｒｅ ｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｒｅ ｗａｓ ｎｏ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＞０．０５），ｗｉｔｈ ｍｉｌｄ ｔｏ ｍｏｄｅｒａｔｅ ｇｒｏｕｐ ｗｈｅｎ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｔｏ ｓｐｕｔｕｍ Ｅｏｔａｘｉｎ ｓｅｖｅｒｅ ｇｒｏｕｐ ｗａｓ ｎｏ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｅｒｅｎｃｅ（ｐ－￣ｏ．ｏｓ）．Ｔｈｅ Ｅｏｔａｘｉｎ ａｎｄ ｃｏｎｖａｌｅｓｃｅｎｔ ｓｅｒｕｍ ｌｅｖｅｌｓ ｏｆ ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎ， ｔｈｅ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ ｒｏｕｐ ｇｗｉｔｈ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ ｆＰ＜０．０５）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｅｏｔａｘｉｎ ｌｅｖｅｌｓ ｉｎ ｓｅｒｕｍ ａｎｄ ｓｐｕｔｕｍ ｉｎ ｃｈｉｌｄｒｅｎ ｗｉｔｈ ｂｒｏｎｃｈｉｌ ａｃａｐｉｌｌａｒｙ ｗｉｌｌ ｂｅ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｈｉｇｈｅｒ，ＳＯ ｔｈｅ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｂｒｏｎｃｈｉａｌ ｃａｐｉｌｌａｒｙ Ｅｏｔａｘｉｎ ｉｓ ａｎ ｉｍｐｏｒｔａｎｔ ｆａｃｔｏｒ． ｅｙ ｗｏｒｄｓ］Ｅｏｓｉｎｏｐｈｉｌ ｃｈｅｍｏｔａｃｔｉｃ ｆａｃｔｏｒ（Ｅｏｔａｘｉ ｎ）；Ｂｒｏｎｃｈｉｏｌｉｔｉｓ；Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ ｓｙｎｅｙｔｉａｌ ｖｉｕｓ（ｒＲＳ Ｖｉｒａｌ ｐｎｅｕｍｏｎｉａ ｗｉｔｈｏｕｔ ｗｈｅｅｚｉｎｇ；Ｄｏｕｂｌｅ——ａｎｔｉｂｏｄｙ ｓａｎｄｗｉｃｈ ｅｎｚｙｍｅ——ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ 呼吸道感染性疾病中毛细支气管炎是最常见的一种．它 １对象与方法 １．１研究对象 多发生在２岁以下的婴幼儿群体中，主要的临床表现为呼吸 急促、咳嗽和喘憋等，呼吸道合胞病毒多为其病原体。有关研 究报道，毛细支气管炎发病过程的重要介质是嗜酸性粒细胞 趋化因子。为了研究嗜酸性粒细胞趋化因子在毛细支气管炎 选取自２０１０年１月～２０１１年２月来我院就诊的毛细支 气管炎患儿４８例作为观察组，其诊断标准参照参考文献『１１， 所有的病例均在患病后３ ｄ内就诊，且其在２周内没有使用 过类固醇激素。将观察组患儿按病情程度分为轻、中度组和 重度毛细支气管炎两组。其中轻、中度毛细支气管炎患儿３２ 发病机制中的作用，笔者对来我院就诊的毛细支气管炎患儿 及其无喘息病毒性肺炎患儿的血清及其痰中的Ｅｏｔａｘｉｎ水平 进行检测及比较，现报道如下。 ６８中国现代医生ＣＨＩＮＡ ＭＯＤＥＲＮ ＤＯＣＴＯＲ 例，其Ｌｏｗｅｌｌ评分均在１０分以下，男２０例，女１２例，年龄最 ２０１２年１月第５０卷第２期 一 一一 一 一 ・检验与临床・ 小４６ ｄ，最大１８个月，平均年龄（５．６￣３．５）个月。重度患儿１６ 表１ 三组间血和痰液中Ｅｏｔａｘｉｎ水平比较（ ±ｓ，ｐｇ／ｍｋ） 例，其Ｌｏｗｅｌｌ评分均高于１０分，男１０例，女６例，年龄最小 ４５ ｄ，最大ｌ７个月，平均年龄（５．５￣３．７）个月。恢复组的患者 均为经过５ １２ ｄ的治疗后病情缓解的观察组患儿，结果见 表１中的观察组患儿治疗后的数值，其发热及喘息症状消 失，当肺部听诊无哮呜音及湿性哕音时留取诱导痰吸出物。 同时选取我院１８例无喘息病毒性肺炎患儿作为对照组，其 中男１２例．女６例，年龄最小４４ ｄ，最大为１６个月，平均年 龄为（５．４￣３．８）个月。所有的研究对象均没有喘息史，也具有 正常的家族史，对于患有先天性心脏病及其慢性肺部疾病的 患儿排除研究范围。 １．２方法 研究中使用的超声雾化器为医用面罩式，直接吸人 ０．９％ＮａＣ１，保持１ Ｌ／ｍｉｎ的流量，诱导的时间为２０～３０ ｍｉｎ． 引流在雾化完毕后进行，引流的体位为拍背体位。对患儿 采取常规的口腔护理措施，吸痰的压力调节在５０～１００ ｍｍ Ｈｇ 范围内，其使用的一次性吸痰管连接有痰培养容器并对使 用的吸痰管的型号进行选择。将插入口或者鼻腔中的吸痰管 在阻断负压以后左右旋转。以保证吸出的痰液流人无菌培 养容器。痰液要在２ ｈ内进行处理，向适合体积的痰液中加 入０．１％的二硫苏糖醇（ＤＴＴ），体积约为所取痰液体积的４倍， 后涡旋器涡旋１５ Ｓ。摇床摇１５ ｍｉｎ，向其中加入磷酸盐缓 冲液，体积比１：１，震荡５ ｍｉｎ后进行离心，时间１０ ｍｉｎ，７９０转／ ａｒｉｎ，吸取上清液对其中的可溶性物质的浓度进行检测。 １．３ Ｅｏｔａｘｉｎ水平测定 上清液保存于一２０ｑＣ冰箱内．所使用的检测仪器为 ＥＶＯＬＩＳ酶标仪，由美国ＢＩＯ—ＲＡＤ公司生产，所使用的检测 方法为ＥＬＩＳＡ法。血清中的Ｅｏｔａｘｉｎ水平测定也要离心，置 于一２０ｏＣ冰箱中待测。 １．４统计学方法 数据处理使用的软件为ＳＰＳＳ１１．０，计量资料的表示方法 为均数±标准差，三组间的计量资料的处理先采用方差分析， 两组间、及其治疗前后的比较采用ｔ检验，以Ｐ＜Ｏ．０５为差异 具有统计学意义。 ２结果 对治疗前后的轻、中度组及其重度组患儿的血Ｅｏｔａｘｉｎ 水平进行比较，差异有统计学意义（ｔ＝３．７３，２．５６，Ｐ＜０．０１）；与 轻、中度组患儿血清和痰液中的Ｅｏｔａｘｉｎ水平比较，肺炎组患 儿差异有统计学意义（ｔ＝２．８５，３．６１，Ｐ＜Ｏ．Ｏ１）；血清中的 Ｅｏｔａｘｉｎ水平在轻、中度组和重度组中差异无统计学意义（ｆ＝ １．０９，Ｐ＞０．０５）；与轻、中度组痰中Ｅｏｔａｘｉｎ水平比较，重度组差 异无统计学意义（ｔ＝１．２７，Ｐ＞０．０５）。而与恢复期血清中的 Ｅｏｔａｘｉｎ水平比较。肺炎组差异有统计学意义（ｔ＝２．３６，Ｐ＜ ０．０５）。见表１。 ３讨论 有报道表明．在正常呼吸道主要是上皮细胞产生 Ｅｏｔａｘｉｎ。抗原致敏后，Ｅｏｔａｘｉｎ则主要来源于巨噬细胞和嗜酸 性细胞（ＥＯＳ），此时Ｅｏｔａｘｉｎ会大量生成。Ｅｏｔａｘｉｎ受体（ＣＣＲ－３） 对Ｅｏｔａｘｉｎ的特殊功能进行介导，ＣＣＲ３是一个多形性受体， 具有遗传性，由７个跨膜区与Ｇ蛋白耦联形成。在炎症过程 中，多种前炎因子都会对Ｅｏｔａｘｉｎ的表达产生影响，如ＴＮＦ、 ＩＬ一１Ｂ。ＩＬ一４、ＩＬ一５及其ＰＭＡ都能够对Ｅｏｔａｘｉｎ的表达起到增 加的作用，ＩＬ一１３、ＩＬ～１８为最新发现的炎症因子．以上两个因 子也能够对Ｅｏｔａｘｉｎ的表达起到明显的促进作用，其中又以 ＩＬ—ｌ３对Ｅｏｔａｘｉｎ的表达所起到的诱导作用最为强烈嘲 毛支（毛细支气管炎）最基本的特征是气道慢性炎症、 气道高反应性，其主要是由炎性细胞、细胞因子和炎性介质 引起。而在毛支最基本的特征气道慢性炎症和气道高反应 中起重要的核心作用的是ＥＯＳ，其特异性的趋化因子是 Ｅｏｔａｘｉｎ，ＣＣＲ３可以与Ｅｏｔａｘｉｎ结合，可以使ＥＯＳ向炎症部位 移动起到诱导作用，激活ＥＯＳ并促使脱颗粒反应发生，许多 有活性的有毒介质存在于微粒体中，这可以使其得到释放， 导致气道上皮细胞出现损伤。从而形成气道高反应性，喘息 反复发作即为其临床表现。本研究结果表明，与对照组的血 清和痰液中Ｅｏｔａｘｉｎ水平比较，治疗前毛支组患儿水平较高。 有研究发现．与鼻咽分泌物中的Ｅｏｔａｘｉｎ水平比较，ＲＳＶ 感染的毛支患儿具有较高的水平，且其明显相关于ＴＮＦ— ａｌｐｈａ［３］。有学者发现，与非ＲＳＶ感染的毛支比较，在发病机 制中，ＲＳＶ感染的毛支的发病机制与其更为相似 。虽然现 在还不能完全阐明毛支的具体发病机制，但许多学者仍旧 认为，毛支的发生和哮喘关系密切，哮喘患者可以由毛支患 者发展而来，在国内外的对毛支患者的随访中发现其比例 更高，基本可以达到４２％～９０％。有研究中对研究对象随访 进行了１９年，其结果显示，其哮喘患病率毛支组明显高于 对照组。许多的细胞因子及其炎性物质会在哮喘发作期发 现，但在毛支中其仍旧能够被找到。其发病机制和哮喘具有 相似的地方，但是也应该注意并不是所有的毛支患者多年后 都能发展为哮喘。本研究结果发现，与对照组Ｅｏｔａｘｉｎ水平比 较．在恢复期毛支组仍然较高．两组间的差异有统计学意 义，有一部分的毛支患儿会出现反复的喘息，其非常可能是 其原因之一，提示Ｅｏｔａｘｉｎ在毛支发病机制中发挥着重要作用。 综上所述。血清和痰中Ｅｏｔａｘｉｎ水平在毛细支气管炎患儿 中会显著偏高，因此Ｅｏｔａｘｉｎ是毛细支气管发病的一个重要因素。 『参考文献１ ｆｌ１郑淑萍，李晓慧．静脉滴注痰热清佐治重症呼吸道合胞病毒性毛细支 气管炎疗效观察ｌ Ｊ１．中国当代医药，２００９，１６（２ｏ）：１９８—１９９． 『２１邵美娟，王晓微，倪莉，等．呼吸道合胞病毒毛细支气管炎患儿血清 Ｅｏｔａｘｉｎ、ＭＣＰ一１测定的ｌ临床意义Ⅲ．实用医学杂志，２００９，２５（１９）： ３２３３—３２３４． 【３】邓莉莉，肖启亮，陈叶，等．血清Ｅｏｔａｘｉｎ的变化在毛细支气管炎和哮 喘病中的作用和意义『Ｊ】．南华大学学报：医学版，２００９，３７（１）：５６—５８． ［４】易阳，钟闻燕，熊建新，等．嗜酸性粒细胞趋化因子在呼吸道合胞病毒 性毛细支气管炎中的作用和意义ｌＪｌ临床儿科杂志，２０１１，２９（２）：１３６－１３８． （收稿日期：２０１１－１０—１７） ＣＨＩＮＡ ＭＯＤＥＲＮ ＤＯＣＴＯＲ中国现代医生６９
