肿瘤坏死因子-α对微循环障碍大鼠心功能的影响

:/doi１０．３９６９．issn．１００５－１７４０．２０２０．０１．００１j

C　２○０２０　CHINESEJOURNALOFMICROCIRCULATION

肿瘤坏死因子Ｇα对微循环障碍大鼠心功能的影响∗

　　栾绍华　张　磊　杨　超　韩爱子　刘津军

()中图分类号]文献标识码]文章编号]　　[　R５４２．２＋２　　[　A　　[　１００５－１７４０２０２００１－０００１－０４

３　　【摘要】０只SD大鼠随机分为模型组和对照组　目的:观察微循环障碍大鼠心功能的变化,探讨肿瘤坏死因子,每组各１５只.模型组用自体微血栓法致大鼠冠脉微血管堵塞Ｇα(TNFＧα)对其心功能的影响,

造成微循.方法:环障碍.采用冠脉压力温度测量导丝检测冠脉微循环阻力指数(脉心室内插管法评估大鼠左室收缩压(两组大鼠以上各指标的差异.将造模成功的LVSP)１和左室舒张末压４只微循环障碍大鼠按照(LIVMERD)P,)心T,E脏NLFI超ＧSαA声检检测血清中测左室短轴的含量分为高炎组TN缩FＧ短(α率的含量(FS),,颈比动较＝７)和低炎组(＜１７０pg/ml,n＝７),比较两组大鼠心功能的差异.结果:与对照组比较,模型组大鼠I≥M１R７０明显增加pg/ml,nT(P＜０．０５NFＧα的含量较对照组显著增加),FS明显降低(P＜０．０５(P)＜,L０V．０S５P显著降低().高炎组P＜０．０１FS和LVSP),较低炎组均明显降低而LVEDP显著升高(P＜０．０１(P＜０．０５或)

;P模＜型０．０组１

血),清LVEDP显著升高(P＜０．０５而关键词】　微循环障碍);.心功能结论:冠状微循环障碍大鼠心功能受损与;肿瘤坏死因子Ｇα

TNFＧα水平升高有关.

【EffectofTumorNecrosisFactorＧαonCardiacFunctioninRatswithMicrocirculationDisturbLDeUpAa【rNSAtbmstehrnaactoＧtoh】fCua　Oba,j

rZedctiHiovlAeoN:gTyGLoo,Hebaisen,rdYvaAenCNtheeGCefnftrhalHao,oHsAp

itNalA,iＧHzia,ance

nLdIaUJn０i５n６Ｇj０u０n２,ChinaeefdfeicnttsoomftumornecrosisfactorＧα(TNFＧα)onceacrtdsiaocfmfuniccrtioocinricnulraattiosnd．Misetohrodder:soThncirtayrSdiDracaftuswnctieorenaranndedoxmpllyord

eivtidhＧetsistoblocokdetlhegrcoourponaanrdycbolontordolvegsrsoeulspo,fwriatths１,５carautssinignemaicchrogcirrocuupla．tiTohnemdistoudreblagnrcoeu．pCuosreodnaaurtyolporeg

sosuusmreiacnrdotthermop

mebraoＧＧsuuhroemrtaexaissusrehomretnetguidewiresw)erweusedtodetectcoronarymicrocircul,ationresistanceindex(IMR),leftventricularEsDedPt)o,eTvNalFuＧaαtencoleinfnttvgrenteatinentrsi(cFerulSuamrsawyassmsmtoliecbasueaslruoerodbeddbpyryecsaEsrLudIriSeacuA．(LltTVrahSsePo１)un４adnmdlanicreofdcarotidarteryventricularintubationwasctvirceunlatrtiicoundlareisonrddderiraasttsoliscucpcreessssfuurlley(m

LoVdＧＧteiloendwgreoruepdoif＞vided１i７n０tpot/wmolgarnoduapsloawccionrfdlianmgmtaotitohneTgroNuFＧαf＜cont１e７n０t,w/imthl．aRbeosuulntdsa:rIyMofR１i７n０tphgem/mlod,ealhig

hinflammaＧnrouassiＧtwifaiscasnitglnyifiinccarnetalyserdedcuogcmepdar(ePdw＜０it．h０１th)e,aconndLtrolVEgrDoPwupa(Pp＜o０．０５ssignifica)n,ptlFgySwincraesassiegdnif(iPca＜n０tly．０１regpw)d．ucCeodmp

(P＜０．０５aredwith)t,heLcVoSgnPＧbri＜ootls０hFgrose．v０e５Sur)apelin,ynhdLtheigVsphSeiPwrumnflaemrTeNmasiFＧtigonαnifciontentincreasedsignificantly(P＜０．０gcraonutlpyg．rCedonuicclegudnsiifo(P＜０．０５orP＜０．０１icna:ntHlyearretlaftuendcttiootnhienr)５lea,)．Comparedwithlowinflammationgroup,vteswwhillofieLtthcVheoinrEfoDlnPwaamryasmam

tisocignificantlyincreased(Prryocf

iarcctuolrTatioNndFＧiαst．urbance【Keyw

iomrdasi】re　Md,iacnrdoctihricsuldaatomraydeiissorsder;Cardiacfunction;TumornecrosisfactorＧα[∗[基金项目]作者单位]　　邯郸市科学技术研究与发展计划项目(邯郸市中心医院心内三科,１８２３２０８０３８ZC)

邯郸本文２０１９Ｇ０９Ｇ０５收到,２０１９Ｇ１２Ｇ１０修回

０５６００２

微循环学杂志０２０年第３０卷第１期基础与实验　▶

２２

　栾绍华,张　磊,杨　超,等　

　　心肌梗死是严重威胁人类健康的重大疾病之一,研究表明其发病原因可能与远端血管栓塞、血小板聚集引起的无复流、机械阻塞微循环,或因局部对

１－４]

.尽管目前心肌栓塞引起的微血管痉挛等有关[

器导丝的压力一致,并校正同一位置的温度信号./将压力导丝头端放至血管远端至少２确定好３处(,位置后,不再移动)按照屏幕提示,用５ml注射器当温度感受器检测到温度的变化时,记录第一条温;经指引导管内弹丸式快速注射室温生理盐水３ml度曲线;当盐水距离导丝头端３cm处的温度感受器时,记录第二条温度曲线,两条温度曲线触发的时间差即为平均传导时间,记作Tmn.重复３次,取平均,定充血状态,注射室温生理盐水３把温暖的液体ml从指引导管内冲出,按照屏幕提示快速注射３ml室值.然后将１５－２０mg罂粟碱注入冠脉内达最大稳

梗死疗效得到极大改善,但是仍有相当一部分患者

５]

.心肌梗死的防治研究仍出现进行性心功能损害[

必不可少.已有研究提出炎性标志物,特别是肿瘤()坏死因子是造成心肌缺血坏死后收缩功ＧαTNFＧα

６,７]

.本研究使用自体微血栓法能损害的重要原因[

８]

,构建冠脉微循环障碍大鼠模型[观察大鼠微循环

障碍后心功能的改变,并探讨其机制是否与TNFＧα有关.

温生理盐水,重复测３次,从而得到最大充血状态下,的平均传导时间(同时可测得远端冠状动脉hTmn)检测:在行I１．３．２　左室短轴缩短率(FS)MR检测MiroUltrasound影像系统对大鼠心脏结构和功能/.将超声探测头置于实验大鼠扫描速度１００mms胸骨前,二维超声清晰显现左室短轴切面,在乳头肌水平用M型超声记录左心室的运动曲线,测量舒张(,/LVIDs)FS＝(LVIDd－LVIDs)LVIDd×末期左室内径(LVIDd)和收缩末期左室内径.根据公式计算I.压力(PMR值(＝PhTmn)d)d×

１　材料与方法１．１　实验动物与分组

,模式动物研究所,月龄２个月,体重２随５０－３００g).将模型组大机均分为模型组和对照组(n均＝１５/)鼠按照T和NFＧα的含量分为高炎组(≥１７０mlpg１．２　动物模型制备/).低炎组(＜１７０mlpg

３０只SPF清洁级SD雄性大鼠购自南京大学

后隔天,使用加拿大VisualSonics公司Vevo７７０,进行超声检测,探头频率１探测深度２７．５MHzcm,

８]

根据文献[自体血栓栓塞法建模,取已过一周

,适应期S剪尾、取血约１待血液体外D雄性大鼠,ml３０m大小均匀的颗粒状悬液备用.模型组大鼠常μ/,规麻醉(腹腔注射)后接１％戊巴比妥钠５０mkgg小动物呼吸机辅助呼吸.经左侧胸壁第２肋间逐层开胸,撕开心包,暴露主动脉根部.用动脉夹夹住升)主动脉,用胰岛素注射器(分两次将０．０．５ml２ml自体血栓颗粒注入主动脉根部,压１０s后松开钳夹,迫止血后关胸复苏.术后给予青霉素(肌８００００U,注３天)预防感染.对照组用等量生理盐水替代自凝血颗粒悬液,其余步骤相同.模型组除１只大鼠在造模２天后死亡外,其余大鼠２周后经冠状动脉１．３　观察指标和方法

微循环阻力指数(检测显示均造模成功.IMR),自凝后用无菌玻璃研磨器研磨５使其成为约min

１００％.

在行F进１．３．３　血流动力学检测:S检测后当天,行血流动力学相关的心功能检测.大鼠用１０％水/)合氯醛(腹腔注射麻醉后仰卧位固定,颈部３mlkg备皮,正中纵行切开一个２暴露右颈总cm的切口,动脉;实行颈动脉心室内插管:将PE５０导管插管到左心室,导管的另一端与压力换能器相连,用BLＧ

成都泰盟)连续记录数据３４２０S型机能实验系统(０,脱机分析心功能参数,包括:左室收缩压min(.和左室收缩末压(LVSP)LVEDP)

在进行血流动力学１．３．４　血清TNFＧα含量检测:/)检测同时,待１麻醉腹腔注射０％水合氯醛(３mlkg,/后,心尖部针刺抽取血液约５离心３０ml００rmin×

两组动物均于造模后２周１．３．１　大鼠IMR检测:

[]

检测I静脉注射５０MR.参考文献９,００－１００００U

,分离血清,保存于－８１５min０℃冰箱备用.根据含量检测.严格按试剂盒说明书步骤操作,使用酶标仪记录４５０nm处的吸光度值.

肝素,经６－７F指引导管冠脉内注入甘油２００,再经指引导管推送０．－３０００１４英寸的软压力gμ导丝到冠脉口,使测定的压力与顶端带有温度感受

微循环学杂志２０２０年第３０卷第１期,K进行TELISA试剂盒(Biovision１０５２Ｇ１００)NFＧα

１．４　统计学处理

基础与实验　▶

　肿瘤坏死因子Ｇα对微循环障碍大鼠心功能的影响　

３

StudentＧt检验.P＜０．０５表示差异有统计学意义.２　结　果

２．１　两组大鼠一般状态及IMR变化

用均数±标准差(表示,两组间数据比较用x􀭺±s)

采用SPSS２０．０统计分析软件.所有计量数据

１０,１１]

.研究报道,之一[冠脉微循环障碍是心肌梗死

１２]

.因此,的重要死亡原因[针对微循环障碍所引起

的心功能损伤对于最终防治心肌梗死具有至关重要的意义.

本研究运用自体血栓法建造大鼠冠脉微循环模型,探讨微循环障碍对心功能损伤的作用,以及其可能机制是否与炎性因子TNFＧα有关.IMR是近年

]１３,１４

,来用来评价微循环障碍较新颖的指标[本文

大鼠身体逐渐恢复.此过程中两组大鼠的一般状态无明显差别:体形均由偏瘦到恢复正常、毛发均由无光泽到有光泽、行动均由迟缓到正常.２周后模型).１５．６７±３．２１,t＝４．２１,P＜０．０５

２．２　两组大鼠心泵功能变化

组IMR指数较对照组明显增加(３２．２１±４．１７vs

与对照组比较,模型组大鼠FS明显降低(P＜

模型组中有一只大鼠在造模２天后死亡,其余

中,造模２周后模型组IMR指数较对照组明显增加,而两组大鼠体形、毛发、行动等一般情况无显著差异,提示造模成功.

FS、LVSP、LVEDP是检测心功能的重要指标,

本研究发现模型组与对照组相比,FS和LVSP均显著降低,而L表明冠脉微循环障碍VEDP显著升高,

[５]可严重损害心功能.这与P和Vetra等１asilevicj１６]等[研究发现一致.而冠脉微循环障碍引起心功

),,而L０．０５LVSP显著降低(P＜０．０１)VEDP显

),著升高(见表１.P＜０．０１

)表１　两组大鼠心泵功能比较(x􀭺±s能受损的机制尚不清楚.

心血管疾病是一种炎症相关性疾病,不同炎性因子在心血管疾病的发展中起关键作用.先前的研究已证实,炎性因子是该病的潜在机制,它可作为预

１７,１８]

.重测标志物用以防治心血管并发症的靶标[

１９,２０]

.因此,密切相关[本研究比较了两组大鼠

组　别对照组模型组

n１５１４

FS４２．７４±４．８３

４．５３

１)

６１．２２±３．２３１１１．２３±４．４５

７２．３０±６．４５

８．７４

)L)LVSP(mmHVEDP(mmHgg

２)

４２．３１±４．６７

１３．２３

１９．８３±２．３５

２)

t值

１)２)注:与对照组比较,P＜０．０５,P＜０．０１

要的是,TNFＧα被报道与心肌梗死和微循环障碍均发现与对照组比较,模型组大鼠血清TNFＧα含量,

TNFＧα含量显著升高.提示TNFＧα可能参与了冠脉微循环障碍引起的心功能受损这一病理过程.

为了明确炎性因子TNFＧα与微循环障碍大鼠

２．３　两组大鼠血清TNFＧα含量变化

与对照组比较,模型组大鼠血清TNFＧα的含量２．４　血清TNFＧα与心肌微循环障碍大鼠心功能变化的关系

,均明显降低(而LP＜０．０５或P＜０．０１)VEDP较).低炎组显著升高(P＜０．０５

)表３　高炎组与低炎组大鼠心泵功能比较(x􀭺±s//显著升高(６３．４９±５．４３mlvs２８３．００±９．４４pgpg

,).mlt＝５．７３,P＜０．０１

模型组大鼠中,高炎组FS和LVSP较低炎组

心功能损伤的关系,本研究进一步将模型组按TNFＧα含量分为高炎组和低炎组.结果发现与低

炎组比较,高炎组大鼠F而S和LVSP均明显降低,

LVEDP明显升高.提示炎性因子TNFＧα可加重微循环障碍大鼠的心功能损伤.这与Benneta

２１]等[的研究结果一致.

综上,本研究发现冠脉微循环障碍大鼠心功能严重受损,并且这种损伤与炎性因子TNFＧα水平升高有关.为了进一步验证该结论,本实验组下一步,将利用s深入探讨沉默炎性因iRNA干扰TNFＧα子T为NFＧα对冠脉微循环障碍大鼠心功能的影响,心肌梗死的防治提供重要的实验与理论支撑.

本文第一作者简介:

组　别低炎组高炎组

n７７

FS２８．４７±４．７９

６．２４５１．３２±３．４３

１)

)L)LVSP(mmHVEDP(mmHgg９４．５３±５．４５

１０．４８

２)

５３．９２±４．５６５２．１１±５．２４

４．５９

３３．７２±３．４４

１)

t值

１)２)注:与低炎组比较,P＜０．０５,P＜０．０１

◀

３　讨　论

心肌梗死是目前严重危害患者生命的重要疾病

微循环学杂志２０２０年第３０卷第１期栾绍华(１９８６—),女,汉族,硕士研究生,研究方向:冠心病、高血压、心律失常

基础与实验　▶

４

　栾绍华,张　磊,杨　超,等　

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