苦杏仁－苦杏仁苷的测定-高效液相色谱法

苦杏仁－苦杏仁苷的测定-高效液相色谱法

1范围

本方法采用高效液相色谱法测定杏仁中苦杏仁苷的含量。

本方法适用于蔷薇科植物杏PrunusarmeniacaL.或山杏PrunusarmeniacaL.var.ansuMaxim.的干燥种子。2原理

供试品于索氏提取器中，甲醇回流，取滤液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，紫外检测器检测苦杏仁苷的吸收值，计算出其含量。3试剂（除特殊注明外均为分析纯试剂）

3.2乙腈（色谱醇）3.3水为双蒸水

5试样制备

5.1对照品溶液的制备

精密称取苦杏仁苷对照品1.mg，用甲醇溶解并稀释至2.0mL，得0.82mg/mL的对照品溶液。

5.2供试品溶液的制备

称取各种干燥的杏仁适量，精密称定，粉碎，分别用甲醇浸泡0.5h，用索氏提取器提取2.5h，滤过，定容至100mL，用微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。6操作步骤6.1标准曲线的建立

精密量取苦杏仁苷对照品溶液0.5，1，2，3，4，5，10，15µL，依法进样测定，以峰面积Y对进样量X作图，得工作曲线，回归方程为Y=299.9X-50.01，在0.41～12.30μg成良好的线性关系

6.2供试品的测定

3.4苦杏仁苷对照品（中国药品生物制品检定所）4仪器及设备4.1仪器

4.1.1高效液相色谱仪4.1.2化学工作站

4.1.3色谱柱：YWG-C18(4.6mm×250mm，10µm)4.2色谱条件

4.2.1流动相：甲醇+水+乙腈=25+70+54.2.2流速：0.6mL/min4.2.3柱温：30℃

4.2.4检测波长：225nm

3.1甲醇（色谱醇）

国中分析网8精密度：

精密吸取对照品溶液10µL，重复进样10次，其峰面积测量值的相对标准偏差为1.48%。

9参考文献

甄攀.HPLC测定几种杏仁中苦杏仁苷的含量.中草药，2003，34（12）：1144－1145．

精密吸取上述供试品溶液10µL注入高效液相色谱仪，依法测定苦杏仁苷的响应值，计算出其含量。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。7结果计算

7.1供试品浓度计算

将供试品的峰面积带入对照品的线性回归方程y=a+bx进行计算：Cx=(Ax–a)/b

7.2供试品百分含量计算

Wx=(TCxVx/W)×100%式中：y=a+bx― 为对照品的线性回归方程；y ― 为AR；x ― 为CR；a ― 为截距；b ― 斜率；

Ax―为供试品的峰面积；AR―为对照品的峰面积；

CR―为对照品的浓度（mg/mL）；Cx―为供试品的浓度（mg/mL）；Vx ― 为供试品体积（mL）；T ― 为供试品稀释倍数；W ―为供试品称样重量（mg）；Wx―为供试品百分含量(%)。

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