、，ｏ１．３２ Ｎｏ．４ Ｏｃｔｏｂｅｒ ２０１５ 安徽工业大学学报（自然科学版） Ｊ．ｏｆＡｎｈｕｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ｎａｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅ） 第３２卷第４期 ２０１５年 ｌ０月 文章编号：１６７卜７８７２（２Ｏ１５）一０４—０３３Ｏ—Ｏ８ ［ 一１一（３，５一二氯一２一羟基一４一甲氧基苯基）亚乙氨基］ 乙酸乙酯的合成、表征与生物活性研究 丁盛，杜倩，白林山，张婷。严思。李竹琴 （安徽工业大学化学与化工学院，安徽马鞍山２４３００２） 摘要：研究新型席夫碱【（目一１一（３，５－二氯一２一羟基一４一甲氧基苯基）亚乙氨基】乙酸乙酯的合成、表征及生物活性。以乙腈为溶 剂，３，５－二氯一２一羟基一４～甲氧基苯乙酮与甘氨酸乙酯物质的量比为ｌ：３，反应温度和时间分别为２５。Ｃ和ｌ ｈ时，最大反应收率 为９０．９７％。采用ｕｖ，ＩＲ，ＬＣＭＳ， Ｈ ＮＭＲ，荧光光谱及ｘ射线单晶衍射等方法表征了产物的分子及晶体结构。紫外可见吸收 光谱表明：目标化合物的甲醇溶液在３３０ ｎｌＴｌ和４１０ ｎｒｌｆ处分别出现烯醇式和酮式亚胺互变异构吸收峰；在甲醇、Ｎ，Ｎ一二甲基甲 酰胺ｆＤＭＦ）、二氯甲烷和氯仿溶液中具有蓝紫色荧光，最佳荧光激发和发射波长分别为３３２－３７２ ａｍ和４５１－４９９ ｎｌＹｌ，且随溶剂 极性增大，荧光激发峰红移；目标化合物晶体属单斜晶系，空间群为Ｐ２。／ｃ，ＪＢ：９１。１３１（５）￣，ａ＝４．５７１ １（１８）Ａ，ｂ＝３０．３０２（１２）Ａ， Ｃ＝１０．６０２（４）Ａ， ＝１ ４６８．２（１０）Ａ ，Ｄｃ＝１．４４８×１０，ｋｇ・ｍ ，Ｚ＝４，Ｒ ＝０．０５８ ９，ｗＲ２＝０．１２３ ２；具有一定抗氧化作用，浓度为 ６２．５０ ｍｇ・Ｌ 时，对１，ｌ一二苯基一２一苦基肼（ＤＰＰＨ）自由基清除率达２７．９５％；对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有一定抑制作用， 最低抑菌浓度（ＭＩＣ）均为１．０×１０ ｍｏｌ・Ｌ～；对铜绿假单胞菌基本无抑制作用。 关键词：丹皮酚；３，５一二氯一２一羟基一４一甲氧基苯乙酮；甘氨酸乙酯盐酸盐；合成；生物活性 中图分类号：０６２１．２５ 文献标志码：Ａ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７１—７８７２．２０１５．０４．００７ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｅｔｈｙｌ［（Ｊ 一１一（３，５一 ｄｉｃｈｌｏｒｏ－２－ｈｙｄｒｏｘｙ－４－ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙ１）ｅｔｈｙｌｉｄｅｎｅ］ａｍｉｎｏａｃｅｔａｔｅ ＤＩＮＧ Ｓｈｅｎｇ，ＤＵ Ｑｉａｎ，ＢＡＩ Ｌｉｎｓｈａｎ，ＺＨＡＮＧ Ｔｉｎｇ，ＹＡＮ Ｓｉ，ＬＩ Ｚｈｕｑｉｎ （Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆＣｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ．Ａｎｈｕｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｍａ ａｎｓｈａｎ ２４３００２，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｈｅ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｉｏａｃｔｉｖｉｙ ｔｏｆ ａ ｎｅｗ Ｓｃｈｉｆ ｂａｓｅ ｅｔｈｙｌ［㈣一１一（３，５－ｄｉｃｈｌｏｒｏ一２一ｈｙ— ｄｒｏｘｙ一４一ｍｅｔｈｏｘｙｐｈｅｎｙ１）ｅｔｈｙｌｉｄｅｎｅ］ａｍｉｎｏａｃｅｔａｔｅ ｗａｓ ｓｔｕｄｉｅｄ．Ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｙｉｅｌｄ ９０．９７％ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｂｙ ｔｈｅ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｏｆ ３。５－ｄｉｃｈｌｏｒｏ－２－ｈｙｄｒｏｘｙ一４－ｍｅｔｈｏｘｙａｃｅｔｏｐｈｅｎｏｎｅ ｗｉｈ ｇｌｔｙｃｉｎｅ ｅｔｈｙｌ ｅｓｔｅｒ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ｉｎ ｌ：３ｍｏ－ ｌａｒ ｒａｔｉｏ ｕｎｄｅｒ ｒｏｏｍ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｉｎ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ｆｏｒ １ ｈ。Ｔｈｅ ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ａｎｄ ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｈｅ ｐｒｏｄｕｃｔｔ ｗａｓ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚｅｄ ｂｙ Ｕ ＩＲ，ＬＣＭＳ， Ｈ ＮＭＲ，ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｓｐｅｃｔｒａ ｎｄ ａＸ—ｒａｙ ｓｉｎｇｌｅ ｃｒｙｓｔａｌ ｄｉｆｒａｃｔｉｏｎ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ． Ｔｈｅ ＵＶ ｓｐｅｃｔｒａ ｏｆ ｔｈｅ ｔｒｇｅｔａ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｉｎ ｍｅｔｈａｎｏｌ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｈａｔｔ ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ盯＿÷ １Ｔ ｅｌｅｃｔｒｏｎ ｒａｎｓｉｔｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｅｎｏｌ ａｎｄ ｋｅｔｏ ｔａｕｔｏｍｅｒ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ａｐｐｅａｒｅｄ ａｔ ３３０ ｎｎｌ ａｎｄ ４１０ ｎｎ１．ｒｅ— ｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｉｔ ｈａｓ ｂｌｕｅ ｏｒ ｖｉｏｌｅｔ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｉｎ ｍｅｔｈａｎｏｌ，ＤＭＦ，ｄｉｃｈｌｏｒｏｍｅｔｈａｎｅ ａｎｄ ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ ｓｏｌｕｔｉｏｎ，ａｎｄ ｈｅ ｔｍａｘｉｍｕｍ ｅｘｃｉａｔｔｉｏｎ ａｎｄ ｅｍｉｓｓｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ａｔ ３３２—３７２ ｎｌＴｌ ａｎｄ ４５１－４９９ ａｍ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｒｎ— ｐｏｕｎｄ ｗａｓ ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚｅｄ ｉｎ ｍｏｎｏｃｌｉｎｉｃ ｓｙｓｔｅｍ，ｓｐａｃｅ ｇｒｏｕｐ Ｐ２１／ｃ，ｗｉｈ ＝９１．ｔ１３１（５）。，ａ＝４．５７１ １（１８）Ａ， ｂ＝３０．３０２（１２）Ａ，Ｃ＝ｌ０．６０２（４）Ａ， ＝１ ４６８．２（１０）Ａ ，Ｄｃ＝１．４４８ｘ１０ ｋｇ。ｍ ，Ｚ＝４，Ｒ，＝０．０５８ ９，ｗＲ２＝０．１２３ ２． 收稿日期：２０１５—０５—２９ 基金项目：国家自然科学基金项目（８１４Ｏ２５１１）；安徽省高校自然科学研究重点项目（ＫＪ２０１２Ａ０５０）；安徽省研究生“千人联 合培养”计划项目ｒ２０１３０００７）；安徽省大学生创新创业训练计￣］（ＡＨ２０１５１０３６０１５２） 作者简介：Ｔ￣（１９８８一），男，安徽安庆人，硕士生，研究方向为药物中间体合成。 通信作者：￣（１９６３一），男，河南唐河人，博士，教授，研究方向为分析化学和天然药物化学。 第４期 丁盛等：【∞一１一（３，５－－＂氯一２一羟基一４一甲氧基苯基）亚乙氨基】．．…・ ３３１ Ｉｔ ＷａＳ ａ ｍｉｌｄ ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ，ｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｒａｔｅ ｏｆ １，１－ｄｉｐｈｅｎｙｌ一２一ｐｉｃｒｙｌ ｈｙｄｒａｚｙｌ（ＤＰＰＨ）ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌｓ ＷａＳ ２７．９５％ｕｎｄｅｒ ｈｅ ｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｏｆ ６２．５０ ｍｇ’Ｌ～．Ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｈａｄ ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ａｇａｉｎｓｔ Ｅ ｃＪＩｌ－ ｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ ｎｄ ａＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ，ｂｏｔｈ ｍｉｎｉｍａｌ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ（ＭＩＣ）ｗｅｒｅ １．０ ｘ １ ０ ｍｏｌ・Ｌ一 ，ｂｕｔ ｈａｄ ｎｏ ｎｔａｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｙ ｔａｇａｉｎｓｔ Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｐａｅｏｎｏｌ；３，５－ｄｉｃｈｌｏｒｏ－２－ｈｙｄｒｏｘｙ一４－ｍｅｔｈｏｘｙａｃｅｔｏｐｈｅｏｎｅ；ｇｌｙｃｉｎｅ ｅｔｈｙｌ ｅｓｔｅｒ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ；ｓｙｎｔｈｅ－ ｓｉｓ；ｂｉｏａｃｔｉｖｉｙ ｔ丹皮酚（２一羟基一４一甲氧基苯乙酮）是中药丹皮及徐长卿的主要活性成分ｕ ，具有抗菌消炎瞄 、抗肿瘤［３ １、抗 动脉粥样硬化嘲、抗肝纤维化［６１等药理活性，但丹皮酚易挥发，水溶性较差，应用受到一定。近年来丹皮 酚及其衍生物的研究受到重视【’～１。丹皮酚苯磺酰衍生物４一甲氧基苯磺酸一２一乙酰基一５一甲氧基苯酯 １具有较 好的抗乙肝病毒（ＨＢＶ）活性，半数抑制浓度Ｉｃ 。为０．３６ ｍｍｏｌ・Ｌ～。丹皮酚布洛芬酯化反应产物３一（４一异丁基 苯基）丁酸一２一乙酰基一５一甲氧基苯酯具有较强的消炎作用【ｌ０】。丹皮酚缩氨基硫脲类席夫碱衍生物 ｕ 对蘑菇 酪氨酸酶具有较强的抑制活性，Ｉｃ 。值为０．００６ ｍｍｏｌ・Ｌ一。白林山等【 研究了丹皮酚结构类似物２一羟基一４一 甲氧基苯甲醛杂环席夫碱的合成方法，采用ＩＲ、。Ｈ ＮＭＲ、元素分析和ｘ一射线单晶衍射等方法表征产物的分 子及晶体结构。 本文研究氯代丹皮酚衍生物３，５一二氯一２一羟基一４一甲氧基苯乙酮及其与甘氨酸乙酯盐酸盐缩合反应产 物【 一１一（３，５一二氯一２一羟基一４一甲氧基苯基）亚乙氨基】乙酸乙酯的合成方法，采用ｕ ＩＲ，ＬＣＭＳ， ＨＮＭＲ， 荧光光谱和ｘ一射线单晶衍射等方法对产物的分子及晶体结构进行表征，探讨产物的抗氧化及抗菌作用。 １实 验 １．１主要试剂 浓ＨＣ１（ａＲ）、浓Ｈ ＳＯ （９８％，ＡＲ）（溧阳市东方化学试剂有限公司）；浓ＨＮＯ，（６８％，ＡＲ，上海凌峰化学试 剂有限公司）；丹皮酚（９９％）、双氧水（３０％，ＡＲ）、ＮａＣ１（ＡＲ）、无水乙醇（ＡＲ）、乙腈 ）、甘氨酸（ＢＲ）、牛肉膏 （ＢＲ）、胰蛋白胨（ＢＲ）、酵母提取物（ＢＲ）、Ｎ，Ｎ一二甲基甲酰胺（ＤＭＦ，ＡＲ）、二甲亚砜（ＤＭＳＯ，ＡＲ）（国药集团化学 试剂有限公司）。１，１一二苯基一２一苦基肼（ＤＰＰＨ，９６％，上海晶纯生化科技股份有限公司）；其它试剂均为分析 纯。 革兰氏阳性菌（Ｇｒａｍ ｐｏｓｉｔｉｖｅ）：金黄色葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｓ ａｕｒｅｕｓ）ＡＴＣＣ ２５９２３；革兰氏阴性菌（Ｇｒｍ ａｎｅｇａｔｉｖｅ）：大肠杆菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ）ＤＨ５ａ；铜绿假单胞菌（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ）ＡＴＣＣ ２７８５３。大肠杆菌 由本实验室提供，其余３种菌种购自中国普通微生物菌种保藏中 Ｉ￣，（ＣＧＭＣＣ）。 １．２主要仪器 Ｓｐｅｅｏｒｄ ２００ Ｐｌｕｓ型紫外可见分光光度计（Ａｎａｌｙｔｉｋ Ｊｅｎａ公司，德国）；Ｓｐｅｃｔｒｕｍ Ｏｎｅ型傅里叶变换红外光 谱仪（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ公司，美国）；ＬＳ５５型荧光光谱仪（ＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒ公司，美国）；ＳＭＡＲＴＡＰＥＸ１１型ｘ射线单晶 衍射仪（Ｂｒｕｋｅｒ公司，德国）；Ａｖａｒｉｃｅ ＩＩ ４００型核磁共振波谱仪（Ｂｒｕｋｅｒ公司，瑞士）；Ｒ－１００２型旋转蒸发仪、 ＳＨＢ－ＩＩＩ型循环水式多用真空泵（郑州长城科工贸有限公司）；ＫＤＭ型控温加热套（甄城华鲁电热仪器有限公 司）；ＷＲＳ一１Ｂ型数字熔点仪（上海精科实业有限公司）；Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ Ｍｕｌｔｉｓｋａｎ ＦＣ型酶标仪（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ公司，美国）；Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ Ｆｏｒｍａ ９０５型超低温冰箱（一８６ ｏＣ，Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｉｆｃ公 司，美国）；ＳＷ－ＣＪ一１Ｇ型单人净化工作台（苏州净化设备有限公司）；ＺＷＹＲ－２００Ｄ型恒温培养振荡器（上海智 城分析仪器制造有限公司）；ＬＲＨ一１５０型生化培养箱（上海一恒科学仪器有限公司）；ＨＶＥ一５０型高压灭菌器 （Ｈｉｒａｙａｍａ公司，日本）；ＲＯ ｌａｂ型实验室超纯水机（上海和泰仪器有限公司）；移液器（０．５～１０ Ｌ，２０￣２００ Ｌ， １． ５．０ ｍＬ），培养Ｉ１１１（￣９０ ｍｍ）。 １．３ ３。５一二氯一２一羟基一４一甲氧基苯乙酮的合成 取０．１６６ ６ ｇ（０．００１ ｏｏ１ｔ）丹皮酚和４０ ｍＬ ６．０ ｍｏｌ・【『’ＨＣＩ溶液于２５０ ｍＬ两口烧瓶中，搅拌至溶解，缓慢升 温至４５℃。加人０．２ ｍＬ（２ ｍｍｏ１）３０％双氧水，在６０℃下反应１５ ｍｉｎ。置于冰浴中搅拌冷却至２５－３０ ｏＣ， 抽滤，真空干燥，得浅黄色产物３，５一二氯一２一羟基一４一甲氧基苯乙酮０．１６５ ０ ｇ，产率７０．１８％，理论化学 ３３２ 安徽工业大学学报（自然科学版） ２０１５正 式Ｃ Ｈ。Ｃ１ Ｏ ，化学式量２３５．１ ｇ・ｍｏｌ～。合成路线见 图１。 １．４甘氨酸乙酯盐酸盐的合成 取２．６２８ ０ ｇ（０．０３５ ｍｏ１）甘氨酸于２５０ ｍＬ圆底 Ｏ ｏ 烧瓶中，加入１００ ｍＬ无水乙醇，在室温下通人干燥 ＨＣＩ气体，搅拌至溶解，加热回流６ ｈ，冷却至室温， 减压蒸馏至近干，加入５０ ｍＬ无水乙醇，减压蒸馏， 真空干燥，得白色甘氨酸乙酯盐酸盐４．８０１ ０ ｇ，产率 ９８．２６％，理论化学式Ｃ Ｈ 。Ｃ１ＮＯ：，化学式量 图１ ３，５－二氯一２一羟基一４一甲氧基苯乙酮的合成 Ｆｉｇ．１ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ３．５－ｄｉｃｈｌｏｒｏ一２一ｈｙｄｒｏｘｙ一４一 ｍｅｔｈ０ｘｙａｃｅｔ０ｐｈｅ０ｎｅ ｔ）｝Ｉ （’ ｌ 。．， 一 Ａ．…Ｎ －－－．Ｈ¨ ，１３９．６ ｇ・ｍｏｌ～。合成路线见图２。 １．５【 一卜（３，５一二氯－２－羟基－４－甲氧基苯基）亚 乙氨基１乙酸乙酯的合成 取０．２３５ ０ ｇ（ｏ＿００１ ｍｏ１）３，５一二氯一２一羟基一４一 甲氧基苯乙酮和０．４１５ ５ ｇ（０．００３ ｍｏ１）甘氨酸乙酯盐 酸盐于两口烧瓶中，加入１０ ｍＬ乙腈，搅拌溶解，加 图２甘氨酸乙酯盐酸盐的合成 Ｆｉｇ．２ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｇｌｙｃｉｎｅ ｅｔｈｙｌ ｅｓｔｅｒ ｈｙｄｒｏｃｈｌｏｒｉｄｅ ｅ（｝１）Ｅｔ Ｃｔｌ ＣＮ／－ １ Ｎ ．．Ｈｌ ｛ Ｅｔ Ｎ 入０．５０ ｍＬ三乙胺（０．００３ ５ ｍｏｏ，室温下反应１ ｈ，得 图３目标化合物的合成 Ｆｉｇ．３ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ 黄色溶液。减压蒸馏，析出黄棕色固体，用５．０～ １０．０ｍＬ乙醇洗涤，真空干燥，得黄色固体０．２９１ ３ ｇ， １．６荧光分析 收率为９０．９７％。理论化学式ｃ ，Ｈ Ｃ１２ＮＯ ，化学式量３２０．２ ｇ・ｍｏｌ～。合成路线见图３。 分取２—３ ｍＬ ５ｘ１０～ｍｏｌ・Ｌ 目标化合物的甲醇、ＤＭＦ、二氯甲烷和氯仿溶液于１ ｃｍ石英比色皿中。设置 仪器光电倍增管电压为７００ Ｖ，狭缝宽度为１５ ａｍ，波长扫速为５００ ｎｌＴｌ・ｍｉｎ－ ，在３００－７００ ａｍ范围内，用ＬＳ５５ 型荧光光谱仪分别测试目标化合物的荧光激发和发射光谱。 １．７晶体结构表征 取３０．０ ｍｇ目标化合物置于５０ ｍＬ烧杯中，加入４～６ ｍＬ无水乙醇，加热溶解，室温静置数天，使溶剂缓慢 Ｍ器 挥发，得到黄色针状晶体。选取０．２１ ｍｌＴｌ×０．２０ｍｍ×０．１９ＩｎｌＴｌ晶体，用ＳｍａｒｔＡｐｅｘＩＩ型ｘ射线单晶衍射仪进 行衍射试验。在２９６（２）Ｋ下用经石墨单色化的Ｍｏ Ｋｃｘ作为人射线 ＝０．７１０ ７３ Ａ），以，ｏ／２０￣描方式收集衍 厂Ｎ 射数据。晶体结构由直接法解出，非氢原子的坐标及各项异性参数经最小二乘法修正，强度数据经Ｌｐ因子 校正和经验吸收校正。计算均用ＳＨＥＬＸＬ ９７软件完成［ 。 盯 ｍ １１．８抗氧化活性测试 ｍ 采用ＤＰＰＨ法初步评价目标化合物的抗氧化活性［１４－ｎ ５１。 １）称取３．１５５ ０ ｇ ＤＰＰＨ，用１００ ｍＬ无水乙醇溶解，配制成８Ｏ ｍｍｏｌ・Ｌ 溶液，低温避光保存，使用前稀释 到０．２ ｍｍｏｌ・Ｌ～。 ２）称取１．３０２ ０ ｇ目标化合物，用１００ ｍＬ ＤＭＳＯ溶解，配制成１．００￣１０ ｍｇ・Ｌ 溶液，低温避光保存。使用 前分别稀释为３１．２５，６２．５０，１２５．００，２５０．００，５００．００，１ ０００．Ｏ０ ｍｇ・Ｌ～。 ３）在９６孔板中加入２００ Ｌ ＤＰＰＨ溶液和ｌ０ Ｌ目标化合物溶液，混匀，室温静置３０ ｍｉｎ，记为溶液ｌ（样 品组）；在９６孑Ｌ板中加入２００ Ｌ ＤＰＰＨ溶液和ｌ０ Ｌ无水乙醇，混匀，室温静置３０ ｍｉｎ，记为溶液２（对照组）； 在９６孔板中加入２００ ＬＤＭＳＯ和１０ Ｌ目标化合物溶液，混匀，室温静置３０ｍｉｎ，记为溶液３（空白组）；用酶 标仪于５１７ ｎｌｎ处测定各溶液吸光度，分别记为 ， ， 。根据公式（１）计算待测化合物对ＤＰＰＨ自由基的平 均清除率（Ｓ ，ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ａｃｔｉｖｉｔｙ）。 ５ ＝（，一 ）刈。。％ ㈣ 式中： 。为样品组吸光度； ：为对照组吸光度； ，为空白组吸光度。 第４期 １．９抗菌作用测试 丁盛等：［㈣一１一（３，５－－＂氯一２一羟基一４一甲氧基苯基）亚乙氨基】‘．…・ ３３３ 采用微量梯度稀释法初步评价目标化合物的抗菌作用ｎ 。 １）ＬＢ培养基（用于大肠杆菌培养及抗菌测试）。取ｌ０．２１ ｇ胰蛋白胨，５．２２ ｇ酵母提取物，１０．１３ ｇＮａＣＩ于 １ ０００ｍＬ蓝盖试剂瓶中，加人１ ０００ｍＬ蒸馏水，微热溶解，用ＮａＯＨ溶液调节至ｐＨ ７．０，１２１℃灭菌２０ｍｉｎ。 营养肉汁（用于金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌培养及抗菌测试）：取１０．３４ ｇ胰蛋白胨，３．３２ ｇ牛肉膏， ５．１２ ｇ ＮａＣＩ于１ ０００ ｍＬ蓝盖试剂瓶中，加入１ ０００ ｍＬ蒸馏水，用ＮａＯＨ溶液调节至ｐＨ ７．０，１２１℃灭菌 ２０ｍｉｎ。 ２）菌液制备。将超低温保存的细菌安瓿瓶开封，恢复培养，待测菌种转移到合适的新鲜培养基上，在恒 温培养振荡器上，分别振荡１２￣１４ ｈ（大肠杆菌）、１８￣２０ ｈ（金黄色葡萄球菌）和２４ ｈ（铜绿假单胞菌）。用无菌 水将菌液稀释１０ ０００倍。 ３）待测物溶液。取０．１８０ ６ ｇ（０．０００ ５ ｍｏ１）目标化合物，用５０ ｍＬＤＭＳＯ溶解，用滤菌膜过滤除菌，配成 １．０×１０一ｍｏｌ・Ｌ 溶液，备用。使用时用ＤＭＳＯ稀释为１．０×１０－４ １０．０ Ｉｚｍｏｌ・Ｌ～。 ４）抑菌活性评价。于超净工作台上向９６孔板１～９孔中分别加入９０ Ｌ培养基，ｌ～８孔加入ｌ０ Ｌ菌液， １￣６孑Ｌ中分别加入ｌ０ Ｌ １．０×１０—４￣１０．０ Ｉｘｍｏｌ・Ｌ 目标化合物稀释液，第７孔加入１０ Ｌ ＤＭＳＯ（阴性对照组， ＤＭＳＯ－培养基一菌液），第８孔（对照组，培养基一菌液），第９孔（空白对照组，培养基）。将９６孔板置于生化培养 箱内保证一定湿度，３７℃培养２４ ｈ。于６２０ ｎｎｌ波长下，用酶标仪测定１～９孔的ＯＤ值。平行测定３次，计算 平均ＯＤ值。根据不同浓度目标化合物溶液对菌液ＯＤ值的影响，评价目标化合物的抑菌活性。 ２结果与讨论 ２．１紫外可见吸收光谱 测试５．Ｏ×１０ ｍｏｌ・Ｌ 目标化合物甲醇溶液的紫外可见吸收光谱，结果见图４。由图４可知，目标化合物 在２８５ ｌｌｌｎ处出现苯环１Ｔ一１Ｔ｝电子跃迁Ｋ带吸收，在３３０ ｎｌｎ和４１０ ｎｌ／ｌ处分别出现烯醇式和酮式亚胺互变异 构体（见图５）吸收峰。 Ｃｌ ＭｅＯ Ｃｌ Ｈ Ｉ Ｃ１ Ｎ－－．￣ （：Ｏ０Ｅｔ 图５目标化合物的烯醇式和酮式亚胺互变异构平衡 Ｆｉｇ．５ Ｔａｕｔｏｍｅｒｉｓｍ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ 波长／ｎｍ 图４目标化合物在甲醇溶液中的紫外可见吸收光谱 Ｆｉｇ．４ ＵＶ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｉｎ ｍｅｔｈａｎｏｌ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ２．２红外光谱 用ＫＢｒ压片法测试了目标化合物的红外光谱， 结果见图６。由图６可知，在３ ４４４ ｃｍ－ 处出现分子 内Ｏ—Ｈ…Ｎ缔合羟基伸缩振动吸收峰，在ｌ ２１０ ｃｍ。 附近出现酚羟基Ｃ—ｏ—Ｈ伸缩振动吸收峰，在 ｌ ６２１ ｃｍ－ 处出现Ｃ＝Ｎ伸缩振动特征吸收峰， 波长／ｃｍ 图６目标化合物的红外光谱（ＫＢｒ压片法） Ｆｉｇ．６ ＩＲ ｓｐｅｃｔｒａ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ（ＫＢｒ ｄｉｓｃ） ３ ４３２ ｃｍ 及３ ３０２ ｃｍ－。附近一ＮＨ：的Ｎ—Ｈ伸缩振动吸收峰及１ ６６０ ｃｍ－ 附近Ｃ＝Ｏ伸缩振动吸收峰消失，表明 生成了目标席夫碱化合物。 ３３４ ２．３荧光光谱 安徽工业大学学报（自然科学版） ２０１５年 采用ＬＳ５５型荧光光谱仪测试了目标化合物的荧光激发和发射光谱，结果见图７及表１。由图７及表ｌ可 知，目标化合物在甲醇、ＤＭＦ、二氯甲烷和氯仿溶液中具有蓝紫色荧光，最大荧光激发和发射波长分别为 ３３２ ３７２ ｍ和４５１－４９９ ｎｍ。随溶剂极性增大，最大荧光激发波长红移。可能是在极性溶剂中，目标化合物 酚羟基与溶剂中Ｏ原子形成氢键，改变了第一单重激发态的能量㈣，对光谱特性产生显著影响。 表ｌ目标化合物在不同有机溶剂中的荧光光谱数据 ＝５￣１０ ｍｏｌ・Ｌ ） ａｂ．１ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ Ｔｓｐｅｃｔｒａ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｉｎ 越 慧 ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｏｒｇａｎｉｃ ｓｏｌｖｅｎｔｓ（ｃ＝５ｘ１０ ｍｏｌ・Ｌ ） 波长／ｎｍ 图７目标化合物在不同有机溶剂中的荧光激发和发射光谱 Ｆｉｇ．７ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｓｐｅｃｔｒａ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｉｎ ｏｒｇａｎｉｃ ｓｏｌｕｔｉｏｎｓ ２．４质谱分析 采用ＬＣＭＳ ２０２０型液质联用仪测试了目标化 慧 合物的质谱，结果见图８。由图８可知，目标化合物 的质谱主要峰值包含分子质子峰，与理论化学式 量（３２０．２ ｇ・ｍｏｌ ）接近，证明目标产物的生成。 ２．５核磁共振分析 采用Ａｖａｎｃｅ ＩＩ ４００型核磁共振波谱仪，以 ＣＤＣ１，为溶剂，四甲基硅烷（ＴＭＳ）为内标，测试目标 化合物的 Ｈ核磁共振谱，结果见图９及表２。在目标 ｍ／ｚ 图８目标化合物的质谱 Ｆｉｇ．８ Ｍａｓｓ Ｓｐｅｃｔｒａ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ 化合物的 Ｈ ＮＭＲ谱中，仕学位移 在１．４０～１．４４处三 重峰为５位氢信号峰，６：ｉ￣２．３６～２．３７处双重峰为 ３位氢信号峰。 ＝２．５７处单峰为４位氢信号峰， ３．０６处的单峰为２位氢信号峰， ＝６．５０处单峰为 ＝甲氧基氢信号峰， ＝７．７１处双重峰为苯环上１位氢 信号峰，酚羟基信号峰出现在 ＝１２．６７处。 表２目标化合物的’Ｈ ＮＭＲ分析结果（ＣＤＣＩ３； ） Ｔａｂ．２ Ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ Ｈ ＮＭＲ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍ— ｃ ； ｉ． ．１ ０ 一 ｌ ｌ １ 寸 ｎ卜 ｐｏｕｎｄ（ＣＤＣＩ ； ） —ｒ— ０ 一 一｛ ０ ｛∞寸 —— — １——‘“。 ——— Ｔ。——— 。 一Ｈ —Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ｌ２．６７．Ｓ ６．５０，Ｓ ７．７１，ｄ ’Ｈ ３ ４ ５ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ ２３６－２．３７，ｄ ．Ｉ４ １２ １０ ８ 艿 ６ ４ ２ Ｏ ＯＨ ＯＣＨ３ １ —２５７．Ｓ ．图９目标化合物的 Ｈ核磁共振分析（ＣＤＣＩ３，２５℃） Ｆｉｇ．９ Ｈ ＮＭＲ ｓｐｅｃｔｒａ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｉｎ ＣＤＣＩ３ １４４～１．４０．ｔ ．２ ３．Ｏ６．Ｓ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ａｔ２５℃ ２．６晶体结构 采用ＳＭＡＲＴ ＡＰＥＸｚｚ １Ｉ型ｘ射线单晶衍射仪，测定目标化合物的晶体分子结构，结果见表３，４及 图１０，１１。晶体结构解析表明，目标化合物属单斜晶系，空间群为尸＝２ ／ｃ， ＝９１．１３１（５）。，ａ＝４．５７１ １（１８）Ａ， ｂ＝３０．３０２（１２）Ａ，ｃ＝１０．６０２（４）Ａ， ＝１ ４６８．２（１ｏ）Ａ ，Ｄ ＝１．４４８ｘ１０ ｋｇ，Ｚ＝４，Ｒ ＝０．０５８ ９，ｗＲ ＝０．１２３ ２。目标 第４期 丁盛等：［㈣一ｌ一（３，５一二氯一２一羟基一４一甲氧基苯基）亚乙氨基】．．…・ ３３５ 化合物的所有键长和键角值均在正常范围内，Ｃ８＝Ｎ１双键键长为１．２９７（３）Ａ，证明席夫碱的生成，与红外 光谱及 ＨＮＭＲ结果一致，目标化合物整个分子以ＣＳ＝Ｎ１为中心呈Ｅ式构型。 表３目标化合物的晶体学数据 Ｔａｂ．３ Ｃｒｙｓｔａｌ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｄａｔａ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｅｍｐｉｒｉｃａｌ ｆｏｒｍｕｌａ Ｆｏｒｍｕｌａｗ￣ｇｈｔ Ｃｒｙｓｔａｌ ｓｙｓｔｅｍ Ｃｌ３Ｈｌ５ＣＩ２ＮＯ， ３２０．２ Ｍｏｎｏｃｌｉｎｉｃ 。Ｓｐａｃｅ ｇｒｏｕｐ ，ｃ ａ／Ａ ｂ｜ ｃ／Ａ ，（。） ｖ／（Ａ ） Ｚ ４．５７１ １（１８） ３０．３０２（１２） １０．６０２（４） ９１．１３１（５） ｌ ４６８．２（１０） ４ Ｄ￣／（ｍｇ Ｉｎ＂ ） ／（ｍｍ ） １．４４８ ０．４５３ ６６４ Ｏ．２ｌ ＩＴＩＩＴＩ×０．２０ ａｌｉａ×０．１９ ｍｉｌｌ ２．３４≤０≤２７．４８ —Ｆ（Ｏ００） Ｃｒｙｓｔａｌ ｓｉｚｅ ｏ／（。） Ｌｉｍｉｔｉｎｇ ｉｎｄｉｃｅｓ Ｒｅｆｌｅｃｆｉｏｍ ｃｏｌｌｅｃｔｅｄ／ｕｎｉｑｕｅ Ｃｏｍｐｌｅｔｅｎｅｓｓ ｔｏ ｔｈｅｔａ＝２７．５７ Ｒｅｆｍｅｍｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄ ４≤五≤５，－３９≤七≤３１，－１３≤Ｊ≤１３ ８ ８６９／３ ２９７［ ｉｎｔ）＝０．０２００】 ９８．７％ Ｆｕｌｌ—ｍａｔｒｉｘ ｌｅａｓｔ—ｓｑｕａｒｅｓ ｏｎ Ｐ ３ ２９７／０／１８２ １．０３６ ＲＩ＝０．０４４２．Ｉ ＝０．１１３ ５ Ｄａｔａ／ｒｅｓｔｒａｉｎｔｓ／ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ Ｇｏｏｄｎｅｓｓ．ｏｆ－ｆｉｔ ｏｎ Ｐ Ｆｉｎａｌ Ｒ ｎｄｉｉｃｅｓ【／＞２ｓｉｇｍａ（／）】 Ｒｉｎｄｉｃｅｓ（ａｌｌ ｄａｔａ） Ｒ ＝０．０５８ ９．帜２＝０．１２３ ２ ３３６ 安徽工业大学学报（自然科学版） ２０１５钲 图ｌ１目标化合物的晶胞堆积（沿ｎ轴方向） 图１Ｏ目标化合物的分子结构 Ｆｉｇ．１０ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ Ｆｉｇ．１１ Ｐａｃｋｉｎｇ ｄｉａｇｒａｍ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ （ｖｉｅｗｅｄ ｄｏｗｎ ｔｈｅ ａ ａｘｉｓ） ２．７抗氧化作用 采用ＤＰＰＨ法探讨目标化合物的抗氧化活性， 结果见图ｌ２。由图１２可知，在３１．２０～５６２．５０ ｍｇ・Ｌ 范围内，目标化合物对ＤＰＰＨ自由基清除率随浓度 增大而增大，在质量浓度为６２．５０ ｍｇ・ 时ＤＰＰＨ自 由基清除率最大为２７．９５％。当质量浓度大于 ＼。 薅 篷 逛 ６２．５０ ｍｇ・Ｌ一 ，ＤＰＰＨ自由基清除率随浓度增大而逐 渐减小。 ２．８抗菌作用 Ｐｌ（ｍｇｌｌ ） 图ｌ２目标化合物的ＤＰＰＨ自由基清除率 Ｆｉｇ．１２ Ｓｃａｖｅｎｇｉｎｇ ｒａｔｅ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ ｏｎ ＤＰＰＨ ｆｒｅｅ ｒａｄｉｃａｌｓ 采用微量梯度稀释法评价目标化合物对大肠 杆菌ＤＨ５ａ、金黄色葡萄球菌ＡＴＣＣ ２５９２３和铜绿假 单胞菌ＡＴＣＣ ２７８５３的抗菌作用。在９６孔板内，将 逐级稀释的目标化合物溶液加入到待试菌液中，用 酶标仪测定其光密度值（ＯＤ），结果分别见图１３及 表５。ＯＤ值与细菌浓度呈正比，ＯＤ值越小，则抗菌 作用越强。由表５可知，目标化合物对大肠杆菌和 金黄色葡萄球菌具有一定抗菌作用，最低抑菌浓度 （ＭＩＣ）均为１．０ Ｉｘｍｏｌ・Ｌ。对铜绿假单胞菌基本无 抗菌作用。 表５目标化合物的抗菌作用 Ｔａｂ．５ Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ｃｏｍｐｏｕｎｄ 第４期 丁盛等：【㈣一１一（３，５一二氯一２一羟基一４一甲氧基苯基）亚乙氨基］．．…－ ３３７ ３结 论 合成了一种新型席夫碱衍生物［（Ｅ）－１－（３，５一二氯一２一羟基一４一甲氧基苯基）亚乙氨基】乙酸乙酯，其存在烯 醇式和酮式亚胺互变异构现象、具有蓝紫色荧光。产物晶体属于单斜晶系，空间群为Ｐ２ ／ｃ；具有一定抗氧化 作用，对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌具有一定抗菌作用，对铜绿假单胞菌基本无抗菌作用。 参考文献： ［１杨正生，彭振辉，１】姚青海，等．丹皮酚的药理作用研究进展［Ｊ】．中国药物与临床，２０１１，１１（５）：５４５—５４７． ［２】Ｈｉｍａｙａ Ｓ Ｗ Ａ，Ｒｙｕ Ｂ Ｍ，Ｑｉａｎ Ｚ Ｊ＇ｅｔ ａ１．Ｐａｅｏｎｏｌ ｆｒｏｍ Ｈｉｐｐｏｃａｍｐｕｓ 如Ｂｌｅｅｌｅｒ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｄ ｔｈｅ ｎｅｕｒｏ—ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｖｉａ ＮＦ—ｒｄ３ ａｎｄ ＭＡＰＫ ｓｉｇｎａｌｉｎｇ ｐａｔｈｗａｙｓ［Ｊ］．Ｔｏｘｉｃｏｌｏｇｙ ｎｉ Ｖｉｔｒｏ，２０１２，２６（６）：８７８—８８７． 【３】Ｙｉｎ Ｊ，Ｗｕ Ｎ Ｓ，Ｚｅｎｇ Ｆ Ｑ．Ｐａｅｏｎｏｌ ｉｎｄｕｃｅｓ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｉｎ ｈｕｍａｎ ｏｖａｒｉａｎ ｃａｎｃｅｒ ｃｅｌｌｓ［Ｊ］．Ａｃｔａ Ｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｃａ，２０１３，１１５（８）：８３５—８３９． 【４］Ｗｕ Ｊ，Ｘｕｅ Ｘ，Ｗｕ Ｚ．Ａｎｔｉ—ｔｕｎｌｏｒ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆｐａｅｏｎｏｌ ｖｉａ ｒｅｇｕｌａｔｉｎｇ ＮＦ—ＫＢ，ＡＫＴ ｎａｄ ＭＡＰＫｓ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ：Ａ ｑｕｉｃｋ ｒｅｖｉｅｗ［Ｊ］．Ｂｉｏｍｅｄ－ ｉｃｉｎｅ＆Ｐｒｅｖｅｎｔｉｖｅ Ｎｕｔｒｉｉｔｏｎ，２０１４，４（１）：９—１４． 【５］Ｂａｏ Ｍ Ｈ，Ｚｈａｎｇ Ｙ Ｗ Ｚｈｏｕ Ｈ Ｈ．Ｐａｅｏｎｏｌ ｓｕｐｐｒｅｓｓｅｓ ｏｘｉｄｉｚｅｄ ｌｏｗ・ｄｅｎｓｉｔｙ ｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎｄｕｃｅｄ ｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｖｉａ ａｃｔｉ． ｖａｔｉｏｎ ｏｆＬＯＸ一１／ｐ３８ＭＡＰＫ／ＮＦ－ｒ，Ｂ ｐａｔｈｗａｙ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＥｔｈｎｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，２０１３，１４６（２）：５４３—５５１． 【６］Ｋｏｎｇ Ｄ，Ｚｈａｎｇ Ｆ’Ｗｅｉ Ｄ Ｈ．Ｐａｅｏｎｏｌ ｉｎｈｉｂｉｔｓ ｈｅｐａｔｉｃ ｉｆｂｒｏｇｅｎｅｓｉｓ ｖｉａ ｄｉｓｒｕｐｔｉｎｇ ｎｕｃｌｅａｒ ｆａｃｔｏｒ－ＫＢ ｐａｔｈｗａｙ ｉｎ ａｃｉｔｖａｔｅｄ ｓｔｅｌｌａｔｅ ｃｅｌｌｓ：／ｎ ｖｉｖｏ ｎａｄ ｉｎ ｖｉｔｒｏ ｓｔｕｄｉｅｓ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＧａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙ ｎａｄ Ｈｅｐａｔｏｌｏｇｙ，２０１３，２８（７）：１２２３—１２３３． 【７】Ｄｏｂｌｅ Ｍ，Ｋａｒｔｈｉｋｅｙａｎ Ｓ，Ｐａｄｍａｗａｒ Ｐ Ａ，ｅｔ ａ１．ＱＳＡＲ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆｐａｅｏｎｏｌ ａｎａｌｏｇｕｅｓ ｆｏｒ ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ｏｆｐｌａｔｅｌｅｔ ａｇｇｒｅｇａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｂｉｏｏｒ－ ｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２００５．１３（２１）：５９９６—６００１． ［８】袁金伟，屈凌波，白云亮，等．丹皮酚结构改造研究进展［Ｊ】＿河南工业大学学报（自然科学版），２０１１，３２（３）：８８—９４． ［９】Ｈｕａｎｇ Ｔ Ｊ’Ｃｈｕａｎｇ Ｈ，Ｌｉｎａｇ Ｙ Ｃ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｓｉｎｇ，ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄ ｂｉｏｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆｐａｅｏｎｏｌ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ ａｓ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｎａｔｉ—ＨＢＶ ａｇｅｎｔｓ 【Ｊ】．Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＭｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，２０１５，９０：４２８—４３５． ［１０】Ｗ＿ｕ Ｄ，Ａｏ Ｇ Ｚ，Ｃａｏ Ｑ Ｒ，ｅｔ ａ１．／ｎ ｖｉｔｒｏ ｎａｄ ｉｎ ｖｉｖｏ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｂｕｐｒｏｆｅｎ—ｐａｅｏｎｏｌ ｃｏｎｊｕｇａｔｅ［Ｊ］．Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｏｎｔｒｏｌｌｅｄ Ｒｅｌｅａｓｅ． ２０１ ｌ，１５２（Ｓ１）：ｅ９８－ｅ１００． ［１ １】Ｚｈｕ Ｔ Ｈ，Ｃａｏ Ｓ Ｗ Ｙｕ Ｙ Ｙ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｐａｅｏｎｏｌ ｔｈｉｏｓｅｍｉｃａｒｂａｚｏｎｅ ｎａａｌｏｇｕｅｓ ａＳ ｍｕｓｈｒｏｏｍ ｔｙｒｏｓｉｎａｓｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓ［Ｊ］．Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍａｃｒｏｍｏｌｅｃｕｌｅｓ，２０１３，６２：５８９—５９５． 【ｌ２］白林山，周影，李竹琴，等．５一甲氧基一２一｛㈣一［（３一甲基吡啶一２一基）亚氨基】甲基）苯酚的合成与表征［Ｊ】．安徽工业大学学报 （自然科学版），２０１５，３２（２）：１３８—１４２． 【１３】Ｓｈｅｉｄｒｉｃｋ Ｇ Ｍ．ＳＨＥＬＸＴＬ９７：Ｐｒｏｇｒａｍ ｆｏｒ Ｃｒｙｓｔａｌ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ｒｅｆｍｅｍｅｎｔ［ＣＰ］．Ｕｎｉｖｅｒｓｉｙｔ ｏｆＧｏｅａｉｎｇｅｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ，１９９７． 【１４】Ｂｌｏｉｓ Ｓ Ｍ．Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｓ ｂｙ ｈｔｅ ｕｓｅ ｏｆａ ｓｔａｂｌｅ ｒｆｅｅ ｒａｄｉｃａｌ［Ｊ］．Ｎａｔｕｒｅ，１９５８，１８１：ｌ１９９—１２００． 【ｌ５】吴建章，李物兰，陈玲姿，等．查尔酮及其螺杂环衍生物的合成、晶体结构、抗氧化活性研究［Ｊ］．有机化学，２０１２，３２（１１）：１４１— ２１４７． 【１６】Ｃｌｉｎｉｃａｌ ａｎｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｓｔａｎｄａｒｄｓ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ．Ｍｅｈｔｏｄｓ ｏｆｒ ｄｉｌｕｔｉｏｎ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｙｔ ｔｅｓｔｓ ｏｆｒ ｂａｃｔｅｒｉａ ｈｔａｔ ｒｇｏｗ ａｅｒｏｂｉ． ｃａｌｌｙ ａｐｐｒｏｖｅｄ ｓｔａｎｄａｒｄ，Ｍ７一Ａ７［Ｓ］．７ｔｈ ｅｄ．【ｓ．１．］：ｗａｙｎｅ，ＰＡ，２００６． 【１７】Ｍｅｇｙｅｓｉ Ｍ，Ｂｉｃｚ６ｋ Ｌ，Ｇ６ｍｅｒ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｏｌｖｅｎｔ ｐｏｌａｒｉｙｔ ｎａｄ ｈｙｄｒｏｇｅｎ ｂｏｎｄｉｎｇ ｏｎ ｈｔｅ ｌｆｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ ｏｆｔｒａｎｓ一 ４－ｈｙｄｒｏｘｙ－４ ｎｉｒｔｏｓｔｉｌｂｅｎｅｓ［］Ｊ．Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｐｈｙｓｉｃｓ Ｌｅｔｔｅｒｓ，２０１０，４８９（１／３）：５９—６３． 责任编辑：丁吉海
