２０８ 中国肿瘤临床２０１３年第４０卷第４期ＣｈｉｎＪＣｌｉｎＯｎｃｏｌ ２０１３，Ｖｏ１．４０，Ｎｏ．４ ｗｗｗ．ｃｊｃｏ．ｃｎ 胰腺癌患者外周血循环ｃ－Ｍｅｔ和ｈ－ＴＥＲＴ表达的 临床意义 胡 亮①周家华②余泽前②易永祥①丁摘要海①赵 亮① 目的：探讨胰腺癌患者外周血循环肝细胞生长因子受体ｃ—Ｍｅｔ和端粒酶亚催化单位（ｈｕｍａｎｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎ— ｓｅｆｉｐｔａｓｅ，ｈ－ＴＥＲＴ）表达的临床意义。方法：联合应用纳米免疫磁珠及巢式ＰＣＲ方法检测胰腺癌患者外周血循环中ｃ—Ｍｅｔ和 ｈ－ＴＥＲＴ的表达以确定微转移是否存在，并探讨其临床意义。结果：胰腺癌患者外周血循环ｃ—Ｍｅｔ与ｈ－ＴＥＲＴ的表达与性别、年 龄、肿瘤大小、血清ＣＡ一１９９７ＬＣＥＡ无统计学相关（Ｐ＞Ｏ．０５）。不同肿瘤分期间ｃ—Ｍｅｔ和ｈ－ＴＥＲＴ阳性表达率有显著性差异（Ｐ＜０．０５）， 外周＿６－ｅ—Ｍｅｔ与ｈ－ＴＥＲＴ表达阳性患者有肿瘤复发风险，ｈ－ＴＥＲＴ阳性患者较Ｃ—Ｍｅｔ阳性患者肿瘤复发率高（Ｐ＜０．０５）。ｃ—Ｍｅｔ表达阳 性的患者无瘤生存中位时间为１２个月，阴性患者为２０个月（Ｐ＝０．０４４）；ｈ－ＴＥＲＴ表达阳性患者无瘤生存中位时间为９个月，阴性患 者为１５个月（Ｐ＜０．００１）。结论：外周血存在微转移的胰腺癌患者肿瘤复发率高，外周血ｈ－ＴＥＲＴ较ｃ—Ｍｅｔ表达阳性患者肿瘤复发 率高，预后更差。 关键词胰腺癌微转移ｃ—Ｍｅｔ ｈ—ＴＥＲＴ ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００—８１７９．２０１３．０４．００７ Ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｉｃａｎｃｅ ｆｏｆ ｈ．ＴＥＲＴ ａｎｄ Ｃ－Ｍｅｔ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｔｈｅ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ Ｌｉｎｇ ＨＵ ，Ｊｉａａｈｕａ ＺＨＯＵ ，Ｚｅｑｉａｎ ＹＵ ，Ｙｏｎｇｘｉａｎｇ ＹＩ ，Ｈａｌ ＤＩＮＧ ，Ｌｉａｎｇ ＺＨＡＯ Ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ ｔｏ：Ｊｉａｈｕａ ＺＨＯＵ；Ｅ—ｍａｉｌ：ｌａｎｃｅｔ１９８０＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＨｅｐａｔｏｂｉｌｌｉａｒｙ Ｓｕｒｇｅｒｙ，ｔｈｅ ＳｅｃｏｎｄＡｆｉｌｆｉａｔｅｄ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＳｏｕｔｈｅａｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１０００３，Ｃｈｉｎａ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆＨｅｐａｔｏｂｉｌｌｉａｒｙ Ｓｕｒｇｅｒｙ，Ｚｈｏｎｇｄａ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆＳｏｕｔｈｅａｓｔ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｎａｎｊｉｎｇ ２１０００３，Ｃｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ ０ｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｈｉｓ ｓｔｕｄｙ ａｉｍｅｄ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｃｅ ｏｆ ｔｈｅ ｈｕｍａｎ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ （ｈ＿ＴＥＲＴ）ａｎｄ ｃ—Ｍｅｔ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｏｆ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｍａｇｎｅｔｉｃ ｃｅｌｌ ｓｏｒｔｉｎｇ ａｎｄ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ—ｎｅｓｔ—ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ ｃｈａｉｎ ｒｅａｃｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｔｏ ｄｅｔｅｃｔ ｈ—ＴＥＲＴ ａｎｄ Ｃ－Ｍｅｔ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｏｆｐａｎｃｒｅ— ａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｗｈｅｔｈｅｒ ｏｒ ｎｏｔ ｍｉｃｒｏｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｗａｓ ｐｒｅｓｅｎｔ．Ｔｈｅ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｆｍｉｃｒｏｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｗａｓ ａｎａｌｙｚｅｄＲｅ ．ｓｕｉｔｓ：Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅｓ ｏｆ ｃ—Ｍｅｔ ａｎｄ ｈ－ＴＥＲＴ ｄｉｄ ｎｏｔ ｓｉｇｎｉｉｃａｎｔｌｆｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅ ｗｉｔｈ ｇｅｎｄｅｒ，ａｇｅ，ｃａｎｃｅｒ ｓｉｚｅ，ｃａｎｃｅｒ ａｎｔｉｇｅｎ １９—９ａｎｄ ｃａｒ— ，ｃｉｎｏｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ａｎｔｉｇｅｎ ｉｎ ｔｈｅ ｓｅｒｎｍ ｆＰ＞０．０５）．Ｔｈｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒａｔｅｓ ｏｆ ｃ—Ｍｅｔ ａｎｄ ｈ－ＴＥＲＴ ｇｅｎｅｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｏｆ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎ— ｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｓｉｇｎｉｉｆｃａｎｔｌｙ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＴＮＭ ｓｔａｇｉｎｇ ｒＰ＜０．０５）．Ｔｈｅ ｒｅｃｕｒｒｅｎｃｅ ｒａｔｅ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｉｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐｏｓｉ— ｔｉｖｅ ｈ—ＴＥＲＴ ｃｏｍｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈａｔ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐｏｓｉｔｉｖｅ Ｃ－Ｍｅｔ．Ｔｈｅ ｍｅｄｉａｎ ｄｉｓｅａｓｅ—ｆｒｅｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｔｉｍｅ ｆｏｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｈ—ＴＥＲＴ ａｎｄ Ｃ－Ｍｅｔ ｗａｓ １ ２ ａｎｄ ９ ｍｏｎｔｈｓ，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ．Ｔｈｅ ｍｅｄｉａｎ ｄｉｓｅａｓｅ．ｆｒｅｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｔｉｍｅ ｗａｓ ２０ ｍｏｎｔｈｓ ｆＰ＝００４４）ｆｏｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ．ｗｉｔｈ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｈ－ＴＥＲＴ．Ｆｏｒ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｎｅｇａｔｉｖｅ ｃ—Ｍｅｔ，ｔｈｅ ｍｅｄｉａｎ ｄｉｓｅａｓｅ—ｆｒｅｅ ｓｕｒｖｉｖａｌ ｔｉｍｅ ｗａｓ １ ５ ｍｏｎｔｈｓ ｆＰ＜ ０．００１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ ｉｓ ｐｏｏｒｅｒ ｉｎ ｈ－ＴＥＲＴ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｔｈａｎ ｉｎ ｃ—Ｍｅｔ—ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ．Ｔｈｅ ｒｅｌａｐｓｅ ｒａｔｅ ｗａｓ ｈｉｇｈｅｒ ｉｎ ｈ－ＴＥＲＴ－ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｈｏ ｈａｖｅ ｐｏｏｒ ｐｒｏｇｎｏｓｉｓ． Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ，ｍｉｃｒｏｍｅｔａｓｔａｓｉｓ，Ｃ－Ｍｅｔ，ｈ．ＴＥＲＴ ９０％胰腺癌患者确诊后生存率不足１年，５年生 存率仅为１％～３％。虽然以手术为主的综合治疗可 转移，微转移是形成转移病灶的第一步 。应用敏感 度及特异度较高的纳米免疫磁珠及逆转录～巢式一多 延长生存期，但５年生存率仍较低，约为４％，即使行 聚酶链反应（ＲＴ—ｎｅｓｔ—ＰＣＲ）方法，检测胰腺癌患者外 根治性切除术，８０％患者２年内出现复发。胰腺癌患 周血是否表达ｈ－ＴＥＲＴ和ｃ—Ｍｅｔ上皮性肿瘤标志物， 者预后不良的原因主要是转移…，预后不良与肿瘤患 可确定微转移是否存在。 者早期出现微转移有关。患者在被确诊为肿瘤时， １材料与方法 肿瘤细胞已从原发病灶脱落于血管、骨髓并形成微 １．１一般资料 作者单位：①东南大学附属南京市第二医院肝胆外科（南京市２１０００３）；②东南大学附属中大医院肝胆外科 通信作者：周家华ｌａｎｃｅｔ１９８０＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｒｎ 一中旦翌 圭 ±堑 查箜 塑 ｉＩ１』 ＪｉＩ１ ｎｃ ０ Ｉｌ３．Ｖｏ１．４０，Ｎｏ．４ ＷＷｗ．ｃｊｃｏ．ａｎ 表１ 引物序列及产物扩增长度 Ｔａｂｌｅ １ Ｐｒｉｍｅｒ ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ ａｎｄ ａｍｐｌｉｉｃａｔｆｉｏｎ ｐｒｉｍｅｒ ｌｅｎｇｔｈ ２０９ 选取２００７年１１月至２０１０年ｌ２月期间东南大学 附属中大医院和东南大学附属南京市第二医院肝胆 外科收治的胰腺癌患者，共计４６例（胰腺癌组）。本 组均系初次诊断为胰腺癌，未接受放疗，化疗及手术 治疗患者。男性２８例，女性１８例，年龄４４～８０岁，平 均５７．８岁。ＴＮＭ分期：ＩＢ期４例，ⅡＢ期７例，Ⅲ期２２ 例，Ⅳ期１３例。全组经病理学检查证实诊断，术后常 规随访。对照组２７例，年龄２４～６０岁，平均４０岁，其中 ９例为胆囊结石，９例胆管结石，６例胆囊息肉，３例肝内 Ｌｅｎｇｔｈ （ｂｐ） ＧＡＰＤＨ Ｆｏｒｗａｒｄ Ｆ：５’一ＡＣＣＡＣＡＧＴＣＣＡＴＧＣＡＴＣＡＣ一３ Ｒｅｖｅｒｓｅ Ｒ：５１－ＴＣＣＡＣＣＡＣＣＣＴＧＴＴＧＣＴＧＴＡ一３’ ｈ—ＴＥＲＴ Ｏｕｔｅｒ Ｆ：５１＿ＴＧＧＴＧＧＡＴＧＡ Ｉ ＩＴＣＴＴＧ ＩＴｒＧＧ一３’ Ｒ：５’一ＧＣＡＣＣＡＧＧＡＴＣＴＴＧＴＡＧＡＴＧＴＴＧ一３ Ｉｎｎｅｒ Ｆ：５１－ＣＣＣＴＧＡＡＴＧＡＧＧＣＣＡＧＣＡＧＴ一３ １６１ ４５０ 胆管结石。此研究经东南大学伦理委员会同意。 １．２方法 １．２．１标本采集采集患者术前外周静脉血。弃去 第１管外周血约５ ｍＬ（防止上皮细胞污染）。取第２ 管外周静脉血１０～２０ ｍＬ，以乙二胺四乙酸（ＥＤＴＡ） 抗凝后采用淋巴细胞分离液获取外周血单核细胞 （ＰＢＭＣ）。样本静置于４℃冰箱，于采血后４ ｈ内分离 ＰＢＭＣ。 １．２．２纳米免疫磁珠富集肿瘤细胞按照纳米免疫 磁珠分选（ＭＡＣＳ￣）说明书，利用黏附有Ｅｐ—ＣＡＭ抗 体的免疫磁珠对ＰＢＭＣ进行阳性分选、分离富集上皮 肿瘤细胞。 １．２－３总ＲＮＡ及ｃＤＮＡ合成总ＲＮＡ提取按ＴＲｉｚｏｌ 说明书进行操作。分光光度计检测ＲＮＡ的纯度和浓 度，Ａ 。／Ａ 。比值为１．７～２．０。总ＲＮＡ提取后即进行 ｃＤＮＡ合成。以Ｏｌｉｇ（ｄＴ）为下游引物进行常规逆转录 反应。按如下反应体系进行逆转录合成ｃＤＮＡ：Ｏｌｉｇ （ｄＴ）５ ｍＬ，总ＲＮＡ ７ ｍＬ，ＲＴ缓冲液４ ｍＬ，ｄＮＴＰｓ ２ ｍＬ， ＲＮＡ酶抑制剂ｌ ｍＬ，逆转录酶（ＡＭＶ）１ ｍＬ，４２℃反应 １ ｈ，４℃维持。 １．２．４ ＲＴ～ｎｅｓｔ—ＰＣＲ从基因库（ＧｅｎＢａｎｋ）中查询 ｃ—Ｍｅｔ和ｈ－ＴＥＲＴ的ＲＮＡ序列，根据引物设计原则， 利用Ｐｒｉｍｅｒ ５．０软件设计引物，引物合成由上海生物工 程公司完成（表１）。根据ＲＮＡ原液的浓度取１ ｍＬ，按 照反应体系依次加入ｄＮＴＰ，随机引物及缓冲液等，利 用ＰＣＲ仪进行扩增。ＧＡＰＤＨ作为内参。样品管均外 加两个复管，另设空白和阴性对照管。 ＰＣＲ扩增ＧＡＰＤＨ：９４℃预变性２ ｒａｉｎ，９８℃变性 １０ Ｓ，６０ｃＣＩ退火３０ Ｓ，６８ 延伸３０ Ｓ，５个循环，４￣Ｃ维 持。外引物扩增ｈ－ＴＥＲＴ、ｃ—Ｍｅｔ：９５℃预变性５ ｍｉｎ， ９５℃变性４５ ｓ，５０℃、５１ ｏＣ退火４５ Ｓ，７２￣Ｃ延伸４５ Ｓ，３５ 个循环；最后７２℃延伸５ ａｒｉｎ。内引物扩增ｈ－ＴＥＲＴ、 ｃ—Ｍｅｔ：９５。Ｃ预变性５ ｍｉｎ，９５。Ｃ变性４５ ｓ，５７ｏＣ、５５ 退火 ４５ ｓ，７２℃延伸４５ ｓ，３５个循环；最后７２℃延伸５ ｍｉｎ。将 所得ＰＣＲ产物均以２％琼脂糖凝胶电泳检测，用 １００ ｂｐ ＤＮＡ梯度作为分子质量标志，应用凝胶显像 系统摄片。 Ｒ：５＇－ＣＴＣＣＡＴＧＴＣＧＣＣＣＴＡＧＣＡＣＡ一３’ ｃ—Ｍｅｔ Ｏｕｔｅｒ Ｆ：５’一ＧＣＡＡＧＡＡＡＣＴＧＴＡＴＧＣＴＧＧＡＴＧ一３’ ２４４ Ｒ：５’一ＧＡＧＡＡＧＧＡＴＡＣＧＧＡＧＣＧＡＣＡ Ｉｎｎｅｒ Ｆ：５’一ＧＴＡＡＧＴＧＣＣＣＧＡＡＧＴＧＴＡＡＧＣ一３ Ｒ：５ＩｉＣＣＴＧＧＡＣＣＡＧＣＴＣＴＧＧＡ ｒｒ一３ １．２．５随访所有患者术后每２个月复查１次。随 访中位时间为１６．５（６～３０）个月。生存时间指手术日 至死亡日或最后随访日；术后肿瘤转移指手术日至 第１次随访发现有转移；无瘤生存时间将死亡日或转 移日作为截止日。 １．３统计学分析 采用ＳＰＳＳ １７．０统计软件，计量资料以均数±标准 差（ ±ｓ）表示，计数资料采用ｘ 检验。生存时间、无瘤 生存时间采用Ｋａｐｌａｒ—Ｍｅｉｅｒ统计，生存曲线使用Ｌｏｇ ｒａｎｋ分析。Ｐ＜０．０５为差异有统计学意义。 ２结果 ２．１胰腺癌患者与对照组外周血循环ｃ—Ｍｅｔ和 ｈ—ＴＥＲＴ基因表达率 胰腺癌组ｃ—Ｍｅｔ和ｈ－ＴＥＲＴ基因表达率分别为 ６７．４％（３１／４６）和８９．１％（４１／４６），而对照组表达率为 ３．７％（１／２７）和０（０／２７）。两组的阳性率之间有显著性 差异（均Ｐ＜０．０５，图ｌ～２）。 ２．２ ｃ—Ｍｅｔ和ｈ－ＴＥＲＴ在胰腺癌患者外周血循环的 表达与临床病理参数关系 胰腺癌患者外周血循环ｃ—Ｍｅｔ与ｈ—ＴＥＲＴ的表达 与性别、年龄、肿瘤大小、血清ＣＡ一１９９及ＣＥＡ无统计 学相关（Ｐ＞０．０５）。不同肿瘤分期间ｃ—Ｍｅｔ与ｈ－ＴＥＲＴ 阳性表达率有显著性差异（Ｐ＜０．０５，表２）。ｃ—Ｍｅｔ表达 阳性的Ⅳ期胰腺癌患者有肝转移８例，无肝转移３例。 ２．３ ｃ—Ｍｅｔ和ｈ－ＴＥＲＴ的阳性表达率与术后生存率 之间关系 外周血ｅ—Ｍｅｔ表达阳性的胰腺癌患者术后１２个月 有２５．８％（８／３１）肿瘤复发，阴性患者有１３．３％（２／１５）出 现复发（Ｐ＞０．０５）；外周血ｈ－ＴＥＲＴ表达阳性的胰腺癌 患者术后１２个月有４６．３％（１９／４１）复发，其复发率高 于阴性患者０（０／５）（Ｐ＜０．０５）。提示外周血ｃ—Ｍｅｔ与 一中旦 型墨 堡 ±笙 查箜 塑 ｉｎ』 ！ｉＩ１ ｃｏｌ ２０１３，Ｖｏ１．４０，Ｎｏ．４ ｗｗｗ．ｒｊｃｏ．ｃｎ ，２１ １ 在已知的６个端粒酶亚单位（ｈＴＲ，ＴＥＰ１，ｈ－ＴＥＲＴ， ｈｓｐ９０，ｐ２３，ｄｙｓｋｅｒｉｎ）中，以端粒酶亚催化单位 （ｈ－ＴＥＲＴ）在端粒酶活性中最具特异性，两者之 间相关性＞８０％。ｈ－ＴＥＲＴ ｍＲＮＡ可作为胰腺癌诊断 ８ Ａｎｔｏｎｉｏｕ ＫＭ，Ｍａｒｇａｒｉｔｏｐｏｕｌｏｓ ＧＡ，Ｐｒｏｋｌｏｕ Ａｃｔ ａ１．Ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ／ｔｅｌｏｍｅｒｅｓ ｓｙｓｔｅｍ ｉｎ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｅｓｅｎｃｈｙｍａｌ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ ｄｅｒｉｖｅｄ ｆｒｏｍ ＩＰＦ ｎｄ ａＲＡ＿ＵＩＰ口］．Ｊ Ｉｎｆｌａｎｕｎ（Ｌｏｎｄ），２０１２，９（１）：２７． ９ Ｇｒｏｃｈｏｌａ ＬＦ，Ｇｒｅｉｔｈｅｒ Ｔ，Ｔａｕｂｅｒｔ ＨＷ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｒｅｌｅｖａｎｃｅ ｏｆ ｈＴＥＲＴ ｍＲＮＡ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｉｎ ｄｕｃｔａｌ ａｄｅｎｏｃａｒｃｉｎｏｍａ ｏｆ ｔｈｅ ｐａｎ— 及预后判断的附加指标，其在绝大多数恶性肿瘤组 织均显示明显的端粒酶活性，提示端粒酶的基因表 达可能发生在细胞癌变的早期阶段 。本研究中 ４６例胰腺癌患者中ｈ－ＴＥＲＴ基因阳性表达率为 ｃｒｅａｓ［Ｊ］．Ｎｅｏｐｌａｓｉａ，２００８，１０（９）：９７３－９７６． １０ ＬｅｅＪＨ，Ｋｈａｄｋａ Ｐ，Ｂａｅｋ ＳＨ，ｅｔ １ａ．ＣＨＩＰ ｐｒｏｍｏｔｅｓ ｈｕｍａｎ ｔｅｌｏｍｅｒ． ａｓｃ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ ｄｅｇｒａｄａｔｉｏｎ ａｎｄ ｎｅｇａｔｉｖｅｌｙ ｒｅｇｕｌａｔｅｓ ｔｅｌｏｍ・ ｅｒａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ［］］．Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，２０１０，２８５（５３）：４２０３３－４２０４５． ８９．１％（４１／４６）高于ｃ—Ｍｅｔ基因表达率６７．４％（３１／４６）。 ｃ—Ｍｅｔ是一种由癌基因编码的蛋白产物，为肝细 胞生长因子受体，具有酪氨酸激酶活性，与多种癌基 因产物和调节蛋白存在相关性。研究表明，大部分 肿瘤患者在肿瘤的发生和转移过程中均有ｃ—Ｍｅｔ过 度表达和基因扩增 。本研究中胰腺癌患者ＴＮＭ 分期越晚，ｃ—Ｍｅｔ阳性表达率越高。有研究报道，肝 转移的大肠癌患者ｃ—Ｍｅｔ表达高于无肝转移患者，说 明ｃ—Ｍｅｔ过度表达的患者更有肝转移的倾向，本研究 中ｃ—Ｍｅｔ表达阳性的Ⅳ期胰腺癌患者有肝转移８例， 无肝转移３例，与既往报道结果一致 。 本研究发现在ＩＢ，ｌｉｂ期的胰腺癌患者的外周血 循环中，早期已存在微转移但无任何临床表现。微 转移是胰腺癌预后不良的指标。对于患者进行随访 后发现，外周血循环ｃ—Ｍｅｔ与ｈ－ＴＥＲＴ的表达阳性患 者更有复发风险，且ｈ－ＴＥＲＴ较ｃ—Ｍｅｔ表达阳性的患 者更有肿瘤复发风险，提示ｈ－ＴＥＲＴ表达阳性患者肿 瘤恶性程度更高，更有复发及转移倾向，预后较差。 参考文献 １ Ｙｅｋｅｂａｓ ＥＦ，Ｂｏｇｏｅｖｓｋｉ Ｄ，Ｂｕｂｅｎｈｅｉｍ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｓｔｒｏｎｇ ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｎｏｄａｌ ａｎｄ ｂｏｎｅ ｍａｒｒｏｗ ｍｉｃｒｏ——ｉｎｖｏｌｖｅｍｅｎｔ ｉｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉ出ｐａｎｃｒｅａｉｔｃ ｄｕｃｔｌａ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｒｅｃｅｉｖｉｎｇ ｎｏ ａｄｊｕｖａｎｔ ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａ－ ｐｙⅡ］．ＷｏｒｌｄＪ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２００６，１２（４０）：６５１５—６５２１． ２ Ｚｈａｏ Ｌ，Ｍｏｕ ＤＣ，ＰｅｎｇＪＲ，ｅｔ １ａ．Ｄｉａｇｎｏｓｉｔｃ ｖａｌｕｅ ｏｆ ｃｎａｃｅｒ－ｔｅｓｉｔｓ ｎａｔｉｇｅｎ ｍＲＮＡ ｉｎ ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌ ｂｌｏｏｄ ｆｒｏｍ ｈｅｐａｔｏｃｅｌｌｕｌａｒ ｃａｒｃｉｎｏｍａ ｐａｔｉｅｎｔｓ［］］．ＷｏｒｌｄＪ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２０１０，１６（３２）：４０７２－－４０７８． ３ Ｍｕｔｏ Ｙ，Ｍａｔｕｂａｒａ Ｈ，Ｔａｎｉｚａｗａ Ｔ ｅｔ ａ１．Ｒａｐｉｄ ｄｉａｇｎｏｓｉｓ ｏｆ ｍｉｃｒｏ— ｍｅｔａｓｔａｓｉｓ ｏｆ ｇａｓｔｉｒｃ ｃａｎｃｅｒ ｕｓｉｎｇ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ ｌｏｏｐ——ｍｅｄｉａｔ— ｅｄ ｉｓｏｔｈｅｒｍａｌ ａｍｐｌｉｉｆｃａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ｏｎｃｏｌ Ｒｅｐ，２０１１，２６（４）：７８９—７９４． ４ Ｐａｔｅｒｌｉｎｉ－Ｂｒｅｃｈｏｔ Ｐ，Ｂｅｎａｌｉ ＮＬ．Ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ｔｕｍｏｕｒ ｃｅｌｌｓ（ＣＴＣ）ｄｅ— ｔｅｃｔｉｏｎ：ｃｌｉｎｉｃａｌ ｉｍｐａｃｔ ａｎｄ ｆｕｔｕｒｅ ｄｉｒｅｃｔｉｏｎｓ￣．Ｃａｎｃｅｒ Ｌｅｔｔ，２００７， ２５３（２）：１８０－２０４． ５ Ｋｕｍａｒｉ Ａ，Ｓｒｉｎｉｖａｓａｎ Ｒ，Ｖａｓｉｓｈｔａ ＲＫ，ｅｔ ａ１．Ｐｏｓｉｉｔｖｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｈｕｍａｎ ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ｒｅｖｅｒｓｅ ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔａｓｅ ｇｅｎｅ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ａｎｄ ｔｅｌｏｍ— ｅｒａｓｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｂｙ ＤＮＡ ｍｅｔｈｙｌａｔｉｏｎ ｉｎ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒ［Ｊ］．Ａｎｎ Ｓｕｒｇ Ｏｎｃｏｌ，２００９，１６（４）：１０５１－－１０５９． ６胡 亮，周家华，余泽前，等．纳米免疫磁珠联合ＲＴ－ｎｅｓｔ－ＰＣＲ法检 测胰腺癌外周血微转移的敏感度及特异性口］．东南大学学报（医学 版），２００９，２８（４）：２８７－－２９０． ７ ＺｈｏｕＪ，Ｈｕ Ｌ，Ｙｕ Ｚ，ｅｔ ａ１．Ｍａｒｋｅｒ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｎｉ ｃｉｒｃｕｌａｔｉｎｇ ｃａｎｃｅｒ ｃｅＨｓ ｏｆｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃａｎｃｅｒｐａｔｉｅｎｔｓ．［１］．Ｊ ＳｕｒｇＲｅｓ，２０１１，１７１（２）：６３１—６３６． １ １ Ｃｈｒｙｓｏｖｅｒｇｉｓ Ａ，Ｇｏｒｇｏｕｌｉｓ ＶＧ，Ｇｉｏｔａｋｉｓ Ｉ，ｅｔ ａ１．Ｓｉｍｕｌｔｎａｅｏｕｓ ｏｖｅｒ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ＥＧＦＲ，ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ（ｈ＿１ ＲＴ），ａｎｄ ｃｙｃｆｉｎ Ｄ１ ｃｏｒｒｅ— ｌａｔｅｓ ｗｉｔＩｌ ａｄｖａｎｃｅｄ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎ ｌａｒｙｎｘ ｓｑｕａｍｏｕｓ ｃｅｌｌ ｃａｒｃｉｎｏｍａ：ａ ｔｉｓｓｕｅ ｍｉｃｒｏａｒｒａｙ ｎａａｌｙｓｉｓ［１］．Ｍｅｄ Ｏｎｃｏｌ，２０１１，２８（３）：８７１—８７７． １２ Ｍｉｙａｍｏｔｏ Ｍ，Ｏｊｍｉａ Ｈ，１ｗａｓａｋｉ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ｐｒｏｇｎｏｓｔｉｃ ｓｉｎｇｉｉｆｃｎａｃｅ ｏｆ ｏｖｅｒｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ ｏｆ ｃ—Ｍｅｔ ｏｎｃｏｐｒｏｔｅｉｎ ｉｎ ｃｈｏｌｎａｇｉｏｃｒａｃｉｎＯｍａ［１］．Ｂｒ Ｊ Ｃａｎｃｅｒ，２０１１，１０５（１）：１３１－１３８． 、 １３ Ｏｈ ＹＭ，Ｓｏｎｇ ＹＪ，Ｌｅｅ ＳＢ，ｅｔ ａ１．Ａ ｎｅｗ ｎａｔｉ—ｃ—ｍｅｔ ａｎｔｉｂｏｄｙ ｓｅｌｅｃｔ— ｅｄ ｂｙ ａ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ－ｂａｓｅｄ ｄｕａｌ－ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ ｍｅｔｈｏｄ：ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｐｏ— ｔｅｎｔｉａｌ ｉｎ ｃａｎｃｅｒ［］］．Ｍｏｌ Ｃｅｌｌｓ，２０１２，３４（６）：５２３－５２９． １４ Ｈｅｒｒｅｒｏｓ－Ｖｉｌｌｎａｕｅｖａ Ｍ，Ｚｕｂｉａ－Ｏｌａｓｃｏａｇａ Ａ，Ｂｕｊａｎｄａ Ｌ．ｃ－Ｍｅｔ ｎｉ ｐａｎｃｒｅａｔｉｃ ｃｎａｃｅｒ ｓｔｅｍ ｃｅｌｌｓ：ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃ ｉｍｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ［Ｊ］．Ｗｏｒｌｄ Ｊ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ，２０１２，１８（３８）：５３２１－－５３２３． １５ Ｇａｒｄｉａｎ Ｋ，Ｊａｎｃｚｅｗｓｋａ Ｓ，Ｏｌｓｚｅｗｓ￣、￣ ，ｅｔ ａ１．Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆｐａｎｃｒｅａｔ— ｉｃ ｃａｎｃｅｒ ｍｉｃｒｏｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ：ｒｏｌｅ ｏｆ ｍａｃｒｏｐｈａｇｅ ｉｎｆｌｉｔｒａｔｅｓ ａｎｄ ｒｇｏｗｔｈ ｆａｃｔｏｒｓ ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ￣］．Ｊ Ｃａｎｃｅｒ，２０１２，３：２８５－－２９１． （２０１２－－０４－－１３收稿） （２０１３－０１－１ｌ修回） （本文编辑：张假）
