第4卷第2期 2018 年 4 月
生物化工
Biological Chemical Engineering
Vol.4 No.2Apr. 2018
文章编号：2096-0387 (2018) 02-0100-03
龙生蛭胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用
方欢乐，韩宁娟，牛睿
(西安培华学院，陕西西安710125)
摘要：目的：研究龙生蛭肢囊对脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用。方法：采用线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血再灌注 损伤模型，观察大鼠缺血再灌注后缺血脑梗死面积，脑水分含量、丙二醛（MDA)含量和超氧化物歧化酶（S0D)活性。结果:模型 组脑梗死面积及脑含水量比假手术组显著增大（P < 0.01);脑组织中S0D活性降低、MDA含量增加（P < 0_05);各用药组与 模型组比脑梗死面积及脑含水量减小，各用药组S0D活性升高、MDA含量降低，龙生蛭中剂量组效果更好（P < 0.01)。结论： 龙生蛭肢囊通过抗炎化保护大鼠脑缺血再灌注损伤脑组织。
关键词：脑缺血再灌注；龙生蛭肢囊；氧化损伤中图分类号：R285.5
文献标志码：A
Protective Effects of on Brain Longshengzhi Capsuleof Cerebral Ischemic/Reperfusion Rats
Fang Huan-le, Han Ning-juan, Niu Rui (Xi 'an Peihua University,Shaanxi Xi 'an 710125)
Abstract: Objective: To investigate the protective effect of Longshengzhi capsule on oxidative damage in rats with cerebral ischemic/repeifusion injury.Method: Themodels of cerebral ischemia repertusion injury model rats were established
by the middle cerebral artery occlusion ( MCAO ) .The changes of the cerebral ischemic area, the contents of brain wet,calcium,MDA,S〇D activity in cerebral tissue were observed inrats after modeling.ResultsrCompared with sham operation group，cerebral ischemic area of model group increased significantly.Compared with model group，cerebral ischemic area of each medication groups decreased,there was significant difference, especially in combination of Longshengzhi capsule. Compared with sham operation group,the contents of MDA,calcium and brain wet of model group increased significandy while SOD activity decreased.Those parameters of each medication groups were significandy lower than model group,SOD activities of each medication groups were higher than model group,especiaQy in combination of Longshengzhi capsule group. Conclusion:The protective effect of Longshengzhi capsuleis better than them alone on cerebral ischemia repeifusion injury.
Key w〇rds：Cerebral ischemia reperfusion injury;Longshengzhi capsule;Oxidative damage
缺血性脑血管病是最为常见的脑血管病类型， 在世界各国都有很高的发病率、死亡率和致残率。 据统计,全球每年约有460万人死于脑血管病[1]。我 国是脑中风的高发国之一，每年脑血管病的死亡率在 0.6% ~ 1.2%,患病率也在5%以上'脑血管疾病的高 发病率率,使得对脑血管病的相关酿一誠为 世界医药学界的研究热点。龙生赚囊是陕西步长制 药有限公司研制的独家专利，产品具有补气活血、逐疲
通络的功效，目前主要用于治疗脑血栓，在临床应用中 取得了獅的紙本雛氧化改善脑》明触才脑驗補注损伤大鼠的脑W
阐
作用，
从而为药_随上的細雛更加有力的理论娜。
1实验部分
1.1实验材料与试剂
龙生經胶囊(陕西步长制药，批号：20170914 );
脑心通胶囊（陕西步长制药，批号：20170804);氯
基金项目：西安培华学院校级科研项目资助（PHKTl7〇63)。
作者简介:方欢乐（1981—)，女，陕西咸阳人，硕士，讲师，研究方向：心血管药理学、执业药师。
第2期方欢乐等：龙生蛭胶囊对脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用
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101
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化三苯四氮唑（1TC，上海羽朵生物科技有限公司， 批号：20140702);丙二醛（MDA)、超氧化物歧化 酶（SOD )测定试剂盒(南京建成生物工程研究所）。
1.5脑组织含水量及脑梗死面积测定
(1)月給水量测定。灌注況h后，大■麵头取 脑，在冰块上迅速取脑,用万分之一天平称取脑质量，放 在藤況h后，再次称量，脑制C量=(1 _干质量/湿质 量）x 100%。（2)采用氯化^四氮唑(TTC)染色测量 各组大鼠脑廠E体积。（3)取大鼠大脑，称重后加4倍 生理盐水制备20%脑匀浆，经3000 r/min离心lOmin，取 上清_
照说明书要求测定脑组织中SOD和MDA含量。
1.2动物
健康Wistar成年大鼠100只，体重（220 ± 18 ) g, 实验动物由第四军医大学实验动物中心提供,生产许 可证号：SCXK(军)2012-0007。
1.3仪器及设备
低温离心机、iMaxk全自动酶标仪（美国Bio- Red 公司 ）， JA10003B 大量程电子精密天平 (上海精 密仪器公司）。
1.6统计学方法
采用SPSS 16.0统计软件，结果数据采用均数土 标准差。土 s )表示，采用单因素方差分析，组间比较 采用t检验，P < 0.05为差异具有统计学意义。
1.4模型的复制[31
大麵驗JC合氯醛0-lmIAg腹腔注射麻醉，固定 麵肖毒，赃中切口，分离右侧颈动脉,雜备用，缴L 颈外、颈总动脉，用动脉夹夹闭颈内动脉远心端后，在颈 内动脉与颈外动脉分叉处做一切口，从切口处插入尼龙 线(插入深度18mm左右)有阻力感时停止进线并记录 缺血时间，最终实麵缺血，结扎固定尼M
缝合，消毒
2结果与分析
2.1各组动物脑组织含水量比较
各组动物脑组织中含水量测定如表1所示。表 1结果表明，模型组大鼠脑组织含水量及脑梗死面积 与假手术组相比显著增加（P < 0.05 );与模型组比 较，龙生蛭胶囊治疗后，中剂量可显著降低脑梗死面 积及脑组织含水量（P < 〇_〇5) 〇
脑梗死面积
0.00 ± 0•00*32.31 ±3.28
2h后将尼龙线头端轻轻拔出到近切口处,实现再灌注。
给药剂量/ (g/kg)
表1各组动物脑组织中含水量的比较
组别假手术组模型组龙生蛭大剂量龙生蛭中剂量龙生蛭小剂量脑心通
注：与模型组比较，*P
组别假手术组模型组龙生蛭大剂量龙生蛭中剂量龙生蛭小剂量脑心通
注：与模型组比较，*P
< 0.05,
**P<0.01
2.881.440.722.72
< 0.05,
*叩<0.01
2.881.440.722.72
脑组织含水量/%
73.28 ± 0.76*80.01 ± 1.0176.06 ± 0.76.23 ± 0.87*78.56+0.9875.25 ± 0.77*
13.48 ±3.68**19.03 ± 4.87*23.31+3.0814.25 ±3.77**
。
表2
各组动物脑组织中SOD和MDA的含量
SOD
302.49 ±40.56*178.59 ± 42.50238.57 ±50.63*217.52 ±38.24*187.16 ±50.85241.32 ±48.37*
MDA3.27 ±0.38*5.12 ±0.363.24 ±0.42*4.27 ±0.34*5.13 ±0.583_26±0.52*
给药剂量/(g/kg)
〇
2.2各组动物脑组织中SOD和MDA的含量影响
各组动物脑组织中SOD和MDA的含量测定如 表2所示。表2研究结果表明，和假手术组相比，模 型组大鼠脑组织中MDA含量明显增加、SOD含量下 降（P< 0.05)。而与模型组相比，龙生睡胶囊中、
大剂量组，脑组织中SOD含量升高、MDA含量降低, 差异具有统计学意义（P < 〇_〇5 )。2.3龙生蛭胶囊药理分析
氧化应激作为缺血性脑血管疾病发病机制之 一，与缺血性脑血管疾病发生、发展、转归关系密切'
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生物化工2018 年
for Fatal Stroke and Ischemic Heart Disease: a Prospective Follow up of the Health Survey For England[J].Atheroscleros i9,2011,219(2):807-810.
脑的重量只占人体重量之2%，但是脑需氧量高，产 生的氧自由基也较多。脑缺血及缺血/再灌注时， ROS大量释放。脑细胞缺血缺氧超氧自由基的形成， 加重脑损伤。通过观察MDA的含量变化可反应机体 细胞受自由基攻击的严重程度1
[2]
张微，黄小民.动脉粥样硬化的中医辨证论治[J].中西医结合心脑血管病杂志，2011，9(2):216-218•
3结论
本研究观察到，脑缺血再灌注后，大鼠脑组织 MDA含量明显升高，SOD活性下降，表明脑组织处 于氧化应激状态。而龙生蛭胶囊各组同模型组比较， 脑组织中MDA含量降低，说明药物具有抗氧化作 用，可以改善脑缺血再灌注损伤大鼠的脑组织，从而 为药物治疗脑血栓提供更加有力的理论依据。参考文献
[l]Hamer M, Batty GD, Stamatakis E, et al.Comparison of Risk Factors
[3] 张庆 .红花黄素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用 [D].
济南：山东大学,2011.
[4]
孔卫国，吴晓牧，张昆南，等.大鼠局灶性脑缺血/在灌注模型的制作及经验体会[J].实用临床医学，2010，11(3):13-15.
[5]
任俊伟，杨琴•白藜芦醇对脑缺血/再灌注氧化应激损伤保护机制的研究进展[J]■中国药理学报，2011，27(4):448-451•
[6] 张莉， 高志军 ，赵静 .丹参和川芎嗪联合应用对大鼠脑缺血在
灌注氧化损伤的保护作用研究[J].中国药房，2011，22(39):33-
3366.
(上接第102页)
表4
红斑
天数
鼠1
1234567
00000000
桃花乳动物皮肤多次接触剌激反应积分
水肿
样品组鼠2
00000000
]L
对照组
鼠4
00000000
样品组
鼠4
00000000
对照组
鼠4
00000000
鼠3
01000001
鼠1
00000000
鼠2
00000000
0
鼠3
00000000
鼠1
00000000
鼠2
00000000
0
鼠3
00000000
鼠1
00000000
鼠2
00000000
0
鼠3
00000000
鼠4
00000000
小计
平均积分 样品组平均积分=0.25对照组平均积分=0
[3]
的用量超过3%产品容易起泥，产品未添加防腐剂因此 不能长时间保存，可以在織时对包装盒®^菌消毒。 参考文献
[1]
耿明江，刘振岭，席荣英，等.正交法优选桃花精油的提取工艺[J].新乡医学院学报，2007,4(4):3-365.
[4]
马自俊.乳化液与含油废水处理技术[M].北京：中国石化出版社，2006.
郭彩珍，邵芬娟，闫桂琴.桃花多糖的提取及其抗氧化活性研究[J].中草药，2009,40(sl):156-158.
[5] [6]
南国峰•化妆品乳化剂的选用方[J].才智,2009，(22):150-151.
R〇lf Ohrmann,陆婕，陈临婧•两种植物来源的新型乳化剂[J].中国
[2]
刘杰超，张巧莲，焦中高，等.桃花提取物对酪氨酸酶的抑制作用及其动力学分析[J]■王思新，果树学报，2014,31(5):836-841.
化妆品（行业版)，2〇1〇，(11):8〇_85.新乡医学院
