江苏农业科学２０１２年第４０卷第９期 ．－——９７．－—— 黎萍，刘连军，彭靖茹，等．木薯组培苗移栽技术［Ｊ］．江苏农业科学，２０１２，４０（９）：９７—９９ 木薯组培苗移栽技术 黎 萍 ，刘连军 ，彭靖茹 ，苏文潘 ，石兰蓉 ，李慧敏 ，黄 强 （１．广西壮族自治区亚热带作物研究所／广西木薯研究所，广西南宁５３０００１；２．广西南亚热带农业科学研究所，广西龙州５３２４１５） 摘要：为了完善木薯培养苗离体快繁体系，以ＧＲ９１１木薯组培苗为材料，研究了不同生根天数、生长高度、炼苗天 数、移栽季节及移栽基质对组培苗生根移栽效果的影响。结果表明：在春季（３叫月）采用在生根培养基上３５ ｄ、高度 达５～６ ｃｍ的健壮苗作为移栽成活的前提条件；组培苗在温室大棚自然光条件下炼苗４ ｄ，移栽基质为草炭：表土 （１：１）可以明显提高成活率，移栽成活率达８９．５１％。 关键词：木薯；组培苗；移栽；成活率 ’ 中图分类号：￥５３３．０４ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２—１３０２（２０１２）０９—００９７—０３ 木薯（Ｍａｎｉｈｏｔ ｅｓｃｕｌｅｎｔａ Ｃｒａｎｔｚ）属大戟科木薯属植物，是 木薯是一种无性繁殖作物，传统方法是采用木薯的成熟木质 重要的淀粉作物，是世界三大薯类作物（木薯、马铃薯、甘薯） 化种茎，作为第２年的种茎；但该繁殖方法不能满足生产需 之一，被誉为“地下粮仓…‘淀粉之王”，是一种重要的非粮生 要，良种供不应求，亟须加快繁殖木薯良种种茎，组织培养快 物物质能源作物 。广西是我国最大的木薯产区，其木薯种 速大量繁殖木薯良种种苗成为解决种苗问题的有效途径 Ｊ。 植面积、鲜薯产量及木薯淀粉产量均居全国首位。但是，广西 利用组织培养技术快速繁殖种苗是推广良种的最佳途径。近 木薯平均产量比较低，要发展规模化木薯种植业，必须加强高 年来，木薯的组织培养快繁技术日益受到人们的关注；但多数 产稳产、高淀粉良种的选育、推广及高产栽培技术研究 。 研究仅限于木薯的组培快繁技术，缺少对木薯组培苗大田移 栽的研究。本试验对影响木薯组培苗移栽成活的因素进行比 收稿日期：２０１２—０２—２９ 较，旨在提高组培苗的移栽成活率，为其规模化生产提供 基金项目：广西科学研究与技术开发计划（编号：科技基金 依据。 １０１６９—０２）；广西科学研究与技术开发计划（编号：桂科攻 １０１２３００７—６Ａ）；广西科学研究与技术开发计划（编号：基金 １材料与方法 ０９２０３—０３）。 作者简介：黎萍（１９６６一），女，广西博白人，农艺师，从事生物技术 １．１材料 研究。Ｔｅｌ：（０７７１）２５３９０９７；Ｅ—ｍａｉｌ：ｌｉｐｉｎｇｇｘ１０２６＠１６３．ｃｏｒｎ。 木薯为广西亚热带作物研究所引种繁育的优良品种 通信作者：黄强，硕士，高级农艺师，从事农作物育种与推广研究。 ＧＲ９１１，由广西壮族自治区亚热带作物研究所木薯育种室组 Ｔｅｌ：（０７７１）２５３９０９９；Ｅ—ｍａｉｌ：ｒｚｓｈｑ＠１６３．ｎｅｔ。 培成功的组培生根苗。 （上接第９６页） 版社，２０００：１８５—１８５． 活性狭义遗传率低，受环境的影响较大，不宜在早代选择。可 ［８］胡晋．对种子活力测定方法一ＴＹＣ定量法的修进［Ｊ］．种子， 溶性糖含量与可溶性蛋白含量广义遗传率较高，而狭义遗传 １９８６（５）：７１—７２． 率较低，二者受基因的非加性效应影响较大。 ［９］张亚宏，孙万仓，魏文慧，等．自交对甘蓝型油菜叶片ＳＯＤ，ＣＡＴ， ＡＰＸ活性的影响［Ｊ］．华北农学报，２００８，２３（１）：１０５—１０８． 参考文献： ［１Ｏ］赵世杰，许长城，邹琦，等．植物组织中丙二醛测定方法的改 ［１］Ｇｕｒｕｓｉｎｇｈｅ Ｓ，Ｂｒａｄｆｏｒｄ Ｋ Ｊ．Ｇａｌａｅｔｏｓｙ ｓｕｃｒｏｓｅ ｏｌｉｇｏｓａｅ ｅｈａｒｉｄｅｓ ａｎｄ 进［Ｊ］．植物生理学通讯，１９９４，３０（３）：２０７—２１０． ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｌｏｎｇｅｖｉｔｙ ｏｆ ｐｒｉｍｅｄ ｓｅｅｄｓ［Ｊ］．Ｓｅｅｄ Ｓｃｉ Ｒｅｓ，２００１，ｌ １：１２１ ［１１］郝建军，康宗利，于洋．植物生理学实验技术［Ｍ］．北京：化 学工业出版社，２００６：１０１—１０２． —１３３． ［２］颜启传．种子学［Ｍ］．北京：中国农业出版社，２００１：９１—１０２． ［１２］孙显明，汤国民，于立芝，等．高油玉米种子活力检测适宜方法 ［３］欧阳西荣．种子活力与发芽环境对玉米种子蛋白酶和ｄ一淀粉 初探［Ｊ］．中国农学通报，２００７，２３（１１）：１９７—２０１． 酶活性的影响［Ｊ］．湖南农业大学学报：自然科学版，２００３，２９ ［１３］孔祥生．植物生理学实验技术［Ｍ］．北京：中国农业出版社。 ２００８：１４５—１４８． （１）：２２—２７． ［４］刘军，黄上志，傅家瑞．不同活力玉米种子胚萌发过程中蛋白 ［１４］高之仁．数量遗传学［Ｍ］．成都：四川大学出版社，１９８６：４２２ —４３１． 质的变化［Ｊ］．热带亚热带植物学报，１９９９，７（１）：６５—６９． ［５］杨建肖，王桂荣，张永升，等．钾对玉米种子萌发及其生理特性的 ［１５］孙群，王建华，孙启宝．种子活力的生理和遗传机理研究进展 ［Ｊ］．中国农业科学，２００７，４０（１）：４８—５３． 影响［Ｊ］．华北农学报，２００８，２３（４）：１４５—１４８． ［１６］孙鸿有，郑勇平，翁春媚，等．杉木种子园种子品质性状变异及 ［６］智慧，陈洪斌，凌莉，等．加速老化法测定谷子种子活力的研 遗传参数［Ｊ］．浙江林学院学报，２００５，２２（１）：６１—６５． 究［Ｊ］．中国农业科学，１９９９，３２（３）：６６—７１． ［１７］顾兴芳，封林林，张春震，等．黄瓜低温发芽能力遗传分析［Ｊ］． ［７］李合生．植物生理生化实验原理和技术［Ｍ］．北京：高等教育出 中国蔬菜，２００２（３）：５—７． 一９８一 江苏农业科学２０１２年第４０卷第９期 间的移栽成活率无差异，但却极显著高于其他处理下的移栽 成活率；较矮的植株对外界环境的适应能力较弱 ］，叶片数 量少，达不到光合作用的效果，从而影响了移栽的成活率；株 高在５～７ ｅｍ之间的苗移栽后叶片数量增长较快，生活力强， １．２ 方法 １．２．１组培苗生根天数对移栽成活率的影响 试验共设５ 个处理，生根天数分别为２５、３０、３５、４０ ｄ、＞４５ ｄ，比较组培苗 生根天数对移栽成活率的影响。 １．２．２不同生长高度组培苗对移栽成活率的影响选取生 移栽成活率也提高了，平均移栽成活率最高达８９．０７％；株 高＞７ ｃｍ的苗移栽时萎蔫较严重，恢复能力弱，成活率最低， 仅为６９．１７％。 根培养３５ ｄ的组培苗，将生长高度分成５个等级３～４ ｃｍ、 ４—５ ｅｍ、５—６ ｃｍ、６—７ ｅｍ、＞７ ｃｍ，比较不同生长高度组培 苗对移栽成活率的影响。 １．２．３组培苗炼苗天数对移栽成活率的影响设５个处理， 炼苗天数分别为０…２ ４ ６ ｄ、＞６ ｄ，比较组培苗炼苗天数对移 栽成活率的影响。 １．２．４不同移栽时期试验设４个处理，即分别在春季（３— ４月）、夏季（６—７月）、秋季（９一ｌ０月）、冬季（１２月至翌年１ 月）４个季节进行移栽，并根据设置在温室内自计２４ ｈ的温 度记录，比较不同移栽时期对移栽成活率的影响。 １．２．５不同移栽基质对移苗成活的影响选取黄心土、草炭 土、圃地表土、河沙等４种不同基质进行配比，处理Ｉ：草 炭：表土（１：１）；处理Ⅱ：纯草炭；处理Ⅲ：黄心土：表土 （１：１）；处理Ⅳ：河沙：表土（１：１）；处理Ｖ：黄心土，比较不 同基质对移栽成活率的影响。 进行以上各个处理后将生根培养后的组培苗用药勺轻轻 刮出，放入装有自来水的塑料盆，洗净根部培养基，然后移栽 ｖ僻呈｛镊 基质，每个处理２０个植株，重复３次。移栽后３０ ｄ用Ｅｘｃｅｌ 软件进行数据统计，采用ＳＴＳＴ软件进行统计分析。 ２结果与分析 ２．１ 组培苗生根时间对移栽成活率的影响 由图１可见，生根４０ ｄ和＞４５ ｄ移栽成活率差异不显 著，生根２５、３Ｏ、３５、４０ ｄ之间移栽成活率差异极显著，移栽成 活率随着培养天数的增加先升高后降低。其中生根培养３５ ｄ 的组培苗移栽成活率最高，为９０．７０％，其组培苗根系活力旺 盛，幼苗健壮；其次是生根培养３０ ｄ，移栽成活率为８４．５０％， 培养２Ｏ ｄ生根移栽成活率最低，仅为５２．ｏ７％。生根２０ ｄ组 培苗根系较弱、短，苗生长状态较差，不适合移栽；生根＞４５ ｄ 组培苗由于消耗了培养基中营养成分，叶色变黄、植株老化， 生长高度超过瓶盖后往下卷，清洗时容易损伤嫩茎部分。因 此，移栽时可选择培养３５ ｄ的生根试管苗，此时根系发达，主 茎粗、节间较短，有利于移栽，能提高移栽成活率。 褂 娌 铬 生根时间（ｄ） 图１ 不同生根天数对移栽成活率的影响 ２．２ 不同生长高度组培苗对移栽成活率的影响 从图２可以看出，组培苗生长高度在５—６和６～７ ｅｍ之 生长高度（ｃｍ） 图２不同生长高度对移栽成活率的影响 ２．３组培苗炼苗时间对移栽成活率的影响 从图３可知，炼苗６ ｄ和＞６ ｄ之间的移栽成活率无差 异，炼苗４、６ ｄ、＞６ ｄ之间的移栽成活率差异显著，一 ｖ瓣蜒馁 炼苗４、 ６ ｄ、＞６ ｄ移栽成活率极显著高于未炼苗和炼苗２ ｄ的成活 率。未炼苗的试管苗移栽后前３ ｄ，出现了不同程度的萎蔫， 随着时间的延长，叶片颜色逐渐变绿，恢复正常生长。炼苗后 的组培苗移栽后逐渐适应外界环境，叶片变厚、叶色变绿，炼 苗天数越长，对外界环境的适应性越强；当炼苗天数＞６ ｄ时 组培苗叶片变黄，植株下部分叶片脱落，时间越长对移栽越不 利。因此适当炼苗，可以加快育苗速度，降低生产成本，彳Ｊ利 于规模化生产 。 炼苗时间（ｄ） 图３ 炼苗天数对移栽成活率的影响 ２．４不向时期移栽对组培苗移栽成活率的影响 从图４可以看出，不同处理之间移栽成活率差异极显著。 春季（３—４月）的移栽成活率最高，达８７．６７％，其次为夏季 （６—７月），为４３．０６％，秋季（９—１Ｏ月）的成活率最低，仅有 ２４．３３％。从温室温度记录可知，６—１Ｏ月平均气温高达３０～ ３２℃，天气炎热，而移栽需要保湿，在高温高湿环境下，基质 中微生物孳生严重，易致移栽苗从基部腐烂致死，造成移苗成 活率低 ；冬季（１２月至翌年１月）由于光照不足，幼苗不能 很好地进行光合作用，影响新根的形成，因此冬季不适合在南 宁地区开展木薯组培苗的移栽工作。 黎萍等：木薯组培苗移栽技术 一９９一 藿 图４ 不同时期移栽对组培苗移栽成活率的影响 ２．５ 不同移栽基质对移苗成活的影响 从图５可以看出，处理Ｉ和处理Ⅳ基质的移栽效果较好， 它们之间移栽成活率无差异，苗生长最快，成活率分别达 ８９．８７％、８８．３９％，与其他处理差异极显著，这与土质疏松且 保湿条件好的基质有关；处理Ⅱ和处理Ｖ移栽成活率最低，分 别达８０．５７％、７０．７０％，处理Ⅱ基质较疏松，但不利于水分保 持；处理Ｖ基质易造成土壤表面板结，淋水时水分不易渗透， 同时与基质本身含有较少的营养有关 。因此，宜选择有良 好的保水、保肥性能，利于排水、透气、适宜组培苗生长的 基质。 褂 妲 铬 移栽基质 图５不同配比基质对成活率的影响 ３结论与讨论 利用分子标记进行木薯常规育种在遗传育种中起到了重 要的作用，只有组培苗移栽成活才能真正通过转基因工程改 造最终实现常规应用；是否能获得较好的经济效益，取决于组 培苗能否有较高的移栽成活率 。组培苗移栽成活是离体 快繁体系中最后关键的一步，组培苗移栽，是从精细培养基和 无菌环境到一个比较粗放的移栽基质和有菌的环境，影响组 培苗成活率的因素很多，做好移栽前准备工作及移栽后管理 工作极为重要，但最重要的前提条件是获得健壮的生根组培 苗。木薯组培苗主要特点表现在顶端优势生长较快，培养 ２５—３０ ｄ试管苗有些高达８—１０ ｃｍ，超过瓶盖后往下卷成团 块，这些苗的节间细长、根系细、植株较弱，移栽时萎蔫特快， 无法适应外界环境，不利于移栽成活。本研究在原来培养的 生根组培苗中剪取带有１～２个腋芽的顶芽重新接入新生根 培养基，然后保留原来生根组培苗继续培养３５ ｄ左右，高约 ５～６ ｅｍ时进行移栽，此时的生根组培苗生长较健壮，节间较 短，主茎粗，移栽后恢复能力特强，春季移栽时不需盖膜，有利 于提高出瓶移栽成活率和移栽质量，平均移栽成活率可达 ９０％，显著提高了移栽成活率。组培苗生长在长期的封闭环 境，虽能正常形成根茎叶等营养器官，但是这些器官却无法很 快适应外界环境。恢复组培苗的生理功能是进行炼苗的主要 原因，炼苗能促使其组织发育完全，以适应外界环境生活，提 高其对环境的适应能力。木薯试管苗无论是否进行炼苗，移 栽后都出现了不同程度的萎蔫，经炼苗后植株萎蔫程度随着 炼苗时间的延长而减轻，不炼苗的移栽成活率最低，仅为 ３５．９７％，选择炼苗４ ｄ较为适宜，平均移栽成活率达８５％左 右。木薯组培苗春季移栽成活率高，主要是因为此时南方温 度逐渐回升，适宜幼苗生长；夏季高温高湿，温室内猝倒病危 害严重，移栽成活率低；冬季组培苗在温室内能安全过冬，温 度较低病菌虽不易孳生，但组培苗生长速度较春季缓慢。因 此，在南方最好选择春季（３—４月）进行移栽较为适合。选用 草炭：表土（１：１）作为移栽基质，移栽成活率最高可达 ８９．８７％，这与该基质的特性有关，不但保水能力强，而且质地 松软、通气性良好、化学和营养性质也很好，有利于木薯幼苗 生长。如何提高木薯组培苗移栽成活率还需要对继代培养及 生根培养阶段进行研究。培育健壮生根组培苗是提高移栽成 活率的基础，在培养阶段可以通过使用矮壮素、多效唑等生长 延缓剂来调节植株生长，从而获得根系发达、主茎粗、节间短 的组培苗。 参考文献： ［１］杜学梅，郭黄萍，赵玉军，等．枣试管苗生根及移栽技术［Ｊ］．中 国果树，１９９７（４）：２６—２７． ［２］张立娟，于亚军，周其兴，等．新铁炮百合试管苗的生根与移栽技 术研究［Ｊ］．北方园艺，２００４（４）：７２—７３． ［３］宋庆安，童方平，易霭琴，等．虎杖组培苗移栽技术研究［Ｊ］．中 国农学通报，２００７，２３（４）：１３５—１３８． ［４］许建兰，韦军，俞明亮，等．Ｄａｍａｓｌ ８６９李组培苗移栽技术研究 ［Ｊ］．江苏农业科学，２００９（２）：１４３—１４４． ［５］代丽，赵锦，刘孟军．四倍体酸枣组培苗移栽研究［Ｊ］．中国 农学通报，２０１１，２７（３）：１５９—１６３． ［６］符少萍，李瑞梅，惠杜娟，等．木薯试管苗炼苗移栽技术研究［Ｊ］． 广东农业科学，２０１１，３８（１１）：３９—４ｏ． ［７］宋庆安，童方平，易霭琴，等．虎杖组培苗移栽技术研究［Ｊ］．中 国农学通报，２００７，２３（４）：１３５—１３８． ［８］王小玲，高柱，余发新，等．观赏羽扇豆试管苗移栽成活率的影 响因素研究［Ｊ］．北方园艺，２０１１（１４）：６２—６４．
